Санитарно- микробиологическое исследование почвы

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ТАБЛИЦА. ПОЛИТИЧЕСКИЕ РЕЖИМЫ.

Критерии	Режимы
Демократический	Тоталитарный	Авторитарный
Полномочия главы государства	Строго ограничены законом	Фактически не ограничены совершенно	Практически не ограничены
Представительные органы	Имеют широкий круг полномочий	Марионеточные (т.е. управляемые)	роль представительных органов власти ограничена, хотя они и могут существовать
Принцип разделения власти	Реализован	Формально признается, но не исполняется	Отвергается
Полномочия местных органов власти	Максимальные	Формально широкие	Минимальные
Партии	Многопартийность	Единственная правящая партия	Возможны несколько, но одной направленности
Идеология	Политический плюрализм (от англ. множественность)	Господство одной идеологии	существует частичный плюрализм, сохраняется ограниченная цензура
Права и свободы	Разрешено все, что не запрещено законом	Запрещено все, что не разрешено законом	Разрешено все, что не имеет отношения к политике
Карательные органы	Строго регламентированы законом	Осуществляют массовые политические репрессии	Осуществляют тайный политический сыск
Оппозиция	Действует легально	Запрещена	Запрещена

Вопросы и задания.

1.) Понятия власти в широком смысле

2.) Особенности государственной власти

3.) Структура гос. власти

4.) Классификация государственной власти

5.) Понятие политического режима.

6.) Определить понятие «демократия» через признаки.

7.) Формы реализации демократии 2 (формы)

8.) Теории демократий – история развития

9.) Сравнить тоталитарный и авторитарный режимы по одинаковым критериям.

10.) Виды тоталитарных и разновидности авторитарных режимов.

11.) Понятие плебисцита, шовинизма, теократии, легальности и легитимности.

ПОЛИТИЧЕСКИЕ РЕЖИМЫ

Демократические Недемократические

Прямая Представительная Авторитарный Тоталитарный

Смешанная

Формы демократии

коммунистический

военный теократический

личный

либеральный фашистский

теократический

монархический нацистский

корпоративный (тирания)

(деспотия)

Почва является главным резервуаром и естественной средой обитания микроорганизмов в природе. Именно микроорганизмы принимают участие в процессе формирования и самоочищения почвы и в круговороте веществ в природе. Почва формируется из горных пород, которые разрушаются под действием ветра, воды, а также в результате гибели и разложения живых организмов. Микроорганизмы обитают в воде и коллоидных пленках, обволакивающих почвенные частицы. При этом широко осуществляется передвижение микроорганизмов в водных коллоидных пленках, находящихся вокруг гиффов грибов.

Качественный состав микрофлоры почвы очень разнообразен: множество видов бактерий, в том числе и спорообразующих, актиномицеты, спирохеты, микоплазмы, грибы, вирусы, сине- зеленые водоросли, простейшие.

Состав и соотношение между различными группами микроорганизмов зависит от вида почв. Количество микроорганизмов может достигать 1 млрд в 1 гр почвы. Распределение микроорганизмов в слоях следующее: поверхностный слой и слой почвы на глубине 4-5 м бедны микроорганизмами, слой 10-20 см от поверхности содержит наибольшее количество микроорганизмов.

Вследствие загрязнения почвы снижается ее биологическая активность, замедляются процессы самоочищения, что приводит к загрязнению воды, воздуха, пищевых продуктов и других контактирующих с почвой объектов.

Результаты исследований почвы использую для:

· определения степени опасности для здоровья людей в населенных пунктах (по эпидемиологическим покзаниям);

· профилактики инфекционных и неинфекционных заболеваний (предупредительный санитарный надзор);

· текущего санитарного контроля за объектами, прямо или косвенно воздействующими на окружающую среду.

При выборе объектов в первую очередь обследуют почвы территорий, наиболее значимых для здоровья населения. Выбор показателей для исследования регламентирован ГОСТом 17.4.2.01-81 "Охрана природы. Почва. Номенклатура показателей санитарного состояния", их объем и перечень- МУ № 1446-76 "Методические указания по санитарному микробиологическому исследованию почвы" и МУ 2.17.730-99 "Гигиеническая оценка качества почвы населенных мест".

При проведении текущего санитарного надзора за состоянием почвы ограничиваются кратким санитарно- микробиологическим анализом, указывающим на наличие и степень фекального загрязнения. Полный санитарно- микробиологический анализ почвы проводят в форме предупредительного санитарного надзора. По эпидемическим показаниям проводят индикацию патогенной микробиоты.

Отбор и предварительная обработка образцов почвы.

Правила отбора и подготовки проб к исследованиям регламентированы МУ 14446-76 и МУ № 2.1.7.730-99. Санитарно- микробиологическое исследование почвы предваряет санитарное обследование территории санитарным врачом, который на основании карты санитарного состояния территории описывает исследуемый регион и выбирает точки отбора проб.

При определении степени загрязнения почвы промышленными источниками места для отбора проб располагают на площади трехкратной величины санитарно- защитной зоны вдоль вектора розы ветров на расстоянии 100, 200, 300, 1000, 5000 м и более от источника загрязнения (ГОСТ 17.4.4.02-84).

При контроле состояния почв в районе точечных источников загрязнения пробные площадки размером 5*5 закладывают на разном расстоянии от источника и в относительно чистом месте (контроль). На каждой из выбранных площадок пробы отбирают "по правилу конверта". В месте отбора пробы выкапывают шурф размером 0,3*0,3 м и глубиной 20 см. Для этой цели используют почвенный бур Некрасова. Поверхность одной из стенок шурфа защищают стерильным ножом и вырезают из этой стенки почвенный образец массой 200 г, что обычно составляет пласт размером 20*3*3 см.

При оценке почв сельскохозяйственных территорий пробы отбирают два раза в год (весной и осенью) с глубины 0-25 см с глубины 0-25 см. а каждые 0-15 га закладывают не менее одной площадки размером 100-200 кв. м в зависимости от рельефа местности и условий землепользования. Применяемые для работы инструменты перед взятием каждого нового образца подвергают стерилизации. Все отобранные образцы собирают в отдельные стерильные промаркированные "Крафт"-пакеты или стерильные емкости, которые после заполнения закрывают пробками с бумагой и немедленно доставляют в лабораторию для анализа. Допускается хранение образцов до начала исследования при температуре 4-5 ºС не более 24 ч.

Сопроводительный документ (карту санитарного обследования земельного участка) составляют по следующей форме:

· местонахождение земельного участка;

· дата и время отбора пробы;

· характеристики территории (размер, назначение, принадлежность);

· преобладающая роза ветров;

· характеристика почвы (расположение относительно жилой зоны, мест водозабора и др.);

· возможные пути распространения загрязнения;

· наличие контакта человека с почвой на исследуемой территории.

В лаборатории из 5 точечных проб почвы, взятых с одного участка, готовят усредненную пробу массой около 500 г, тщательно перемешивая и растирая образцы в стерильной фарфоровой чашке резиновым пестиком в течение 5 мин. Посторонние примеси (корни растений, камни, щепки) удаляют путем просеивания почвы через сито, которое предварительно протирают ватным тампоном, смоченным 96% этиловым спиртом. Из усредненной пробы отбирают навески (от 1 до 50-55 г в зависимости от определенных показателей) и готовят суспензию 1:10 на стерильной водопроводной воде (10 г почвы на 90 куб.см воды). Для десорбции микроорганизмов с поверхности почвенных частиц приготовленную почвенную суспензию встряхивают в течение 3 мин на мешалке механического диспергатора. После отстаивания суспензтт в течение 30 с готовят последовательные 10-кратные разведения почвы до концентрации 10-4-10-5 г/см3.

Санитарно- показательные микроорганизмы, характеризующие загрязнение почвы.

Общее количество бактерий- количество микроорганизмов, образующих колонии на МПА при температуре 37ºС в течение 24 ч, - суммарный показатель микробиологического загрязнения почвы микрофлоры преимущественно фекального происхождения.

Термофильные микроорганизмы- микроорганизмы, образующие колонии на МПА при температуре 60 ºС в течение 24 ч, - показатель загрязнения почвы компостом или навозом. Почвы, показывающие высокое содержание кишечных палочек и низкое - термофилов, считают фекально загрязненными.

БГКП- грамотрицательные не образующие спор короткие палочки, ферментирующие лактозу и глюкозу до кислоты и газа при температуре 37 ºС в течение 24-48 ч, не обладающие оксидазной активностью. ГОСТ 17.4.2.01-81 регламентирует определение ЛПК (лактозопозитивных кишечных палочек)- БГКП, сбраживающих только лактозу до кислоты и газа при температуре 37 ºС в течение 24 ч или ФКП - БГКП, расщепляющих только лактозу до кислоты и газа при температуре 43-45 ºС в течение 24 ч.

Перфрингенс- титр- титр грамположительных облигатно- анаэробных спорообразующих палочек,, восстанавливающих сульфиты. Присутствие Clostridium perfringens (споровых форм) свидетельствует о давнем фекальном загрязнении.

Аммонификаторы- микроорганизмы, превращающие азот в катионы аммония. Аммонификация (гниение) белков- результат деятельности гнилостной микробиоты (актиномицеты, грибы, анаэробные бациллы). Высокое содержание в почве этой микробиоты свидетельствует о присутствии органических веществ.

Нитрификаторы- микроорганизмы, окисляющие азот тз солей аммония в нитраты и нитриты. К этой группе относятся представители родов Nitrosococcus, Nitrosolobus, Nitrosobacter. Их присутствие свидетельствует о наличии органического загрязнения и активно идущих процессах самоочищения.

Аэробные целлюлозоразрушающие микроорганизмы- почвенная микробиота, использующая целлюлозу в качестве источника углерода. В этой группе велика роль неспоровых бактерий, базидиальных, дрожжеподобных и несоверщенных грибов.

Общая численность сапрофитов- колтчество микроорганизмов, образующих колонии на МПА при температуре 28-30 ºС в течение 72 ч. Высокая численность сапрофитной микробиоты свидетельствует об органическом загрязнении почвы.

Патогенные микроорганизмы- сальмонеллы, патогенные клостридии, возбудитель сибирской язвы, вирусы.

Определение общего количества бактерий в почве.

Посев проводят в 1,5% МПА- (не менее 2-х разведений), из каждого разведения посев проводят минимум в две параллельные чашки (метод "глубинного посева"), инкубация составляет 24 ч при температуре в 37 ºС.

Определение БГКП

1) Бродильный (титрационный) метод- используют при невысокой степени фекального загрязнения почвы. 10 см3 почвенной суспензии из разведения 1:10 заливают во флакон с 50 см3 среды Кесслер, последующие стандартные разведения высевают по 1 см3 в пробирки с 9см3 той же среды. Посевы инкубируют 48 ч при температуре 37 ºС. Отсутствие через 48 ч газообразования, помутнения среду или изменения цвета индикатора позволяет дать отрицательный ответ о наличии БГКП. При наличии признаков бактериального роста проводят высев на среду Эндо. Чашки с посевами инкубируют при температуре 37 ºС 24 ч. В случае отсутствия признаков роста на чашках дают отрицательное заключение. Красные, розовые с металлическим блеском типичны для кишечных палочек.

На заключительном этапе исследования проводят идентификацию выросших на агаризованных средах харрактерных колоний. Результаты анализа выражают коли- титром.

2) Метод мембранных фильтров. Его используют в качестве ускоренного метода анализа слабозагрязненных почв.Через стерильные мембранные фильтры № 3 с помощью фильтровального аппарата Зейтца пропускают 5-10 см3 почвенной суспензии первого разведения, которую предварительно центрифугируют пр 2000 об/мин в течение 5 мин. Дальнейшее исследование проводят аналогично анализу БГКП в воде методом мембранных фильтров.

3) Прямой поверхностный посев на плотные питательные среды. Этот метод применяют при исследовании почвы из мест интенсивного фекального загрязнения. Проводят прямой поверхностный посев почвенной суспензии в количестве 0,1 или 0,05 см3 на среду Эндо. При анализе сравнительно чистых почв посев проводят из разведений 1:10-1:100, для загрязненных почв используют разведения 1:10-6. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37 ºС в течение 24 ч. На следующем этапе исследования идентифицируют выделенные бактерии (аналогично определению БГКП в воде).

Результаты двух последних методов исследований выражают коли- титром или коли- индексом.

Определение перфрингенс- титра.

1) Посев почвенных разведений в среду Вильсона-Блер.

Из всех почвенных разведений (до 10-6) образцы по 1 см3 переносят в 2 параллельных ряда пробирок. Один ряд пробирок прогревают при температуре 80 ºС в течение 15 мин и / или при 90 ºС - 10 мин. Затем во все пробирки добавляют по 9-10 см3 свежеприготовленной среды Вильсона- Блер. Инкубацию посевов проводят при температуре 37 или 43 ºС в течение 24 ч.

2)Использование сред накопления для определения клостридий в почве.

По 1 см3 прогретых и нативных почвенных разведений засевают в пробирки с полужидкими и жидкими питательными средами, предварительно регенерированными кипячением (Клодницкого, Китт- Тароцци и др.). После инкубации посевов при температуре 37 ºС в течение 18-20 ч проводят высев 0,5-1 см3 материала из помутневших пробирок в среду Вильсона- Блер или сульфит- полимиксин- неомициновую среду. Посев, инкубацию и учет при этом проводят аналогично первому способу.

Определение термофильных бактерий.

Учет термофильных сапрофитных микроорганизмов производят на МПА, который разливают толстым слоем. Посев проводят из разведений 1:10-1:10-6 в 2-3 параллельные чашки Петри. Учет проводят после инкубации в течение 24 ч при температуре 60ºС аналогично, как при определении общего количества бактерий в почве.

Определение нитрифицирующих бактерий.

Для определения нитрифицирующих бактерий сеют почвенные разведения во флаконы с минеральной средой Виноградского, разлитой тонким слоем. В ходе эксперимента два флакона со средой оставляют незасеянными в качестве контроля чистоты среды. Посевы инкубируют при температуре 28 ºС в течение 14-15 сут. При развитии нитрифицирующих бактерий в среде образуется азотистая или азотная кислоты, которые определяют на 5-7 сутки после посева и вторично на 14-15. Титр нитрифицирующих бактерий определяют качественной реакцией с дифениламином, который в присутствие азотистой или азотной кислот дает синие окрашивание. Пастеровской пипеткой несколько капель среды из каждого флакона, не взмучивая осадок, переносят на стеклянную или фарфоровую пластинку, добавляют несколько капель дефениламина, разведенного в концентрированной серной кислоте. Синее окрашивание указывает на присутствие в среде продуктов метаболизма нитрифицирующих бактерий. Среда контрольных флаконов должна остаться без изменения окраски.

Дата добавления: 2013-12-13