Гидрофобная хроматография

Метод гидрофобной хроматографии используют для разделения БАВ на основе гидрофобных свойств, характерных для биологических объектов.

В основе механизма селективности при гидрофобной хроматографии лежит проявление так называемого гидрофобного эффекта, а также модуляция электровалентных взаимодействий, вследствие понижения локальной диэлектрической постоянной среды при введении неполярных радикалов или понижении активности растворителя.

Гидрофобная хроматография реализуется в виде нескольких различных процессов. В наиболее часто встречаемом варианте сорбция амфильных соединений гидрофобными сорбентами осуществляется из разбавленных водных растворов при низких значениях рН (2,0-4,0), а элюация – путем снижения так называемой элюатропной силы подвижной фазы, достигаемой изменением рН, уменьшением полярности элюента (при добавлении спиртов, детергентов и других органических модификаторов). Этот вид хроматографии получил название обратнофазной (ОФХ).

При введении в раствор амфильных соединений, способных вступать во взаимодействие с разделяемыми менее гидрофобными компонентами, сорбентами осуществляется из разбавленных водных растворов при низких значениях рН (2,0-4,0), а элюация – путем снижения так называемой элюатропной силы подвижной фазы, достигаемой изменением рН, уменьшением полярности элюента (при добавлении спиртов, детергентов и других органических модификаторов). Этот вид хроматографии получил название обратнофазной (ОФХ).

При введении в раствор амфильных соединении, способных вступать во взаимодействие с разделяемыми менее гидрофобными компонентами, последние все же можно разделить. Таким методом на неполярных сорбентах удается разделить даже ионизированные соединения, если добавить в раствор противоположно заряженные амфильные соединения, способные образовывать ионные пары с изучаемыми компонентами. Этот вид хроматографии был назван ион-парной обратнофазной хроматографией.

Гидрофобное взаимодействие реализуется также и при так называемой высаливающей хроматографии (ВХ), часто называемой хроматографией гидрофобных взаимодействий, основной прием которой заключается в сорбции амфильных соединений из водных растворов при большой концентрации солей с последующей элюацией солевыми растворами с более низкой ионной силой или водой. Иногда элюацию осуществляют таким образом, что одновременно с уменьшением концентрации соли повышают концентрацию гидрофобного вытеснителя. Как в обратнофазной, так и высаливающей хроматографии могут использоваться одни и те же типы сорбентов с пришитыми неполярными радикалами.

Дата добавления: 2014-01-04