Определение числа клеток азотобактера в азотобактерине

Для определения числа клеток азотобактера в азотобактерине 10 г почвенного препарата азотобактерина помещают в 100 мл волы, выдерживают в течение 1 ч, периодически встряхивая. Затем содержимое энергично встряхивают 10 мин и 10 мл полученной бактериальной взвеси переносят в колбу с 40 мл сте­рильной водопроводной воды. Встряхивают 5 мин и получают разведение 10^-2. Затем готовят последующие разведения: 10^-3; 10^-4: 10^-5; 10^-6; 10^-7; 10 ^-8. Из последних двух разведений трижды набирают по 1 мл суспензии, помещают и 3 параллельные чашки Петри, залипают слоем и 7— 10 мм расплетенного и ох­лажденного до 45 °С агара Эшби и тщательно перемешивают его с суспензией.

Как только агар застынет, чашки переворачивают вверх дном и в таком положении выдерживают в термостате при 26— 28°С.

Подсчитывают клетки азотобактера на 3—4-е сут. Общее их число (х) определяют по формуле

где К — среднее количество колоний; Р — степень разведения.

В 1 г азотобактерина при выпуске должно быть не менее 100 млн. клеток азотобактера.

Численность посторонней микрофлоры в азотобактерине устанавливают микроскопированием исходной суспензии и посевом ее (1 мл) в 3 параллельные чашки на МПА. Коло­нии посторонних микроорганизмов определяют через 3 сут.

Дата добавления: 2014-01-04