Частная микробиология

П ринципы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.

Длительное сосуществование популяций человека и микроорганизмов в процессе эволюции привело к формированию больного количества видов микробов, способных вступать в паразитиче­ское взаимодействие с макроорганизмом, проявляющееся в виде той или иной инфекции. Насчи­тывают сотни нозологических форм инфекционных заболеваний. 3 основе их классификации лежат свойства и таксономическое положение возбудителя, механизм заражения и поражаемые ткани, клинико-эпидемиологические особенности заболевания.

Различают следующие инфекции: кишечные (их возбудители попадают в организм благода­ря постоянству пищевой связи человека с внешней средой), например, холера, брюшной тиф, ди­зентерия и др.; респираторные (инфекции дыхательных путей), например, грипп, корь, дифтерия и др.; кровяные (их возбудители при заражении попадают в кровь, которая для них является ос­новным местом обитания в организме), например, сыпной тиф, клещевой энцефалит, вирусный ге­патит и др.; а также инфекции, передающиеся контактным путем (через соприкосновение с боль­ным, микробоносителем или предметами, контаминированными их выделениями), в частности, венерические болезни, передающиеся, в основном, половым путём, например, сифилис, гонорея, трихомониаз и др.

Микробиологическая диагностика инфекций вызванных безусловнопатогенными микробами основана на следующих принципах.

1. Обнаружение микроба (его антигенов или нуклеиновых кислот) в организме больного или его выделениях. При этом имеет значение правильность взятия материала (в зависимости от Фор­мы, стадии заболевания, особенностей возбудителя и др.). Исследование проводят различными ме­тодами:

а) микроскопическим - микроскопия нативных и/или окрашенных препаратов (существенное
значение метод имеет при заболеваниях, возбудители которых имеют отличительные морфолого-
тинкториальные особенности, например, при туберкулезе, дифтерии, спирохетозах, протозойных
заболеваниях);

б) микробиологическим - посев материала от больного на питательные среды с последующим выделением чистой культуры и идентификацией возбудителя по морфолого-тинкториальным, культуральным, ферментативным (биохимическим), антигенным и другим свойствам (метод имеет абсолютное диагностическое значение, но у него есть ограничения при тех инфекциях, возбудите­ ли которых плохо иди долго растут на питательных срезах, выделение чистой культуры сопряжено с высокой опасностью заражения и т.п.);

в) экспериментальный - заражение материалом восприимчивых лабораторных животных, что позволяет в ряде случаев получить у них клинические признаки соответствующей инфекции,
учесть реакцию нейтрализации микробноготоксина, выделить чистую культуру возбудителя и
оценить её вирулентность (диагностическое значение метод имеет при обнаружении возбудителей, способных при заражении данных животных проявлять специфические патогенные свойства).

В тех случаях, когда заболевание относится к особо опасным или некоторым другим инфек­циям, проводят экспресс-диагностику - быстрое обнаружение (индикацию) в исследуемом мате­риале возбудителя или признаков его присутствия, как правило, без выделения чистой культуры. Для этого используют прямой и непрямой варианты ИФ, ИФА, РП, другие иммунные и неиммун­ные методы индикации. Они не заменяют исследование по классической схеме, а лишь позволяют дать быстрый ориентировочный ответ а ходе диагностики.

2. Выявление иммунного ответа организма на внедрение возбудителя. В зависимости от свойств возбудителя, формы и стадии заболевания, характера иммунного ответа используют 2 ме­тода диагностики:

а) серологический (серодиагностика) - обнаружение в сыворотке крови (serum) специфиче­ских иммуноглобулинов (антител), вступающих в реакции иммунитета с диагностикумами из из­вестных микробных антигенов (диагностическое значение имеет высокий титр или выравненное нарастание титра антител в сыворотках, взятых с интервалом 1-3 недели);

б) аллергодиагностика - выявление (in vivo иди in vitro) специфической сенсибилизации орга­низма к микробным аллергенам, чаще ГЗТ, обусловленной накоплением сенсибилизированных Т-лимфоцитов (диагностическое значение имеют положительные аллергопробы у больных, которые не привиты или не перенесли данную инфекцию в прошлом).

Диагностика путём выявления иммунного ответа при многих инфекциях (особенно острых) носит вспомогательный характер. Её значение снижено рядом причин: иммунный ответ поздно (чаще не ранее 2-й недели заболевания) и лишь косвенно свидетельствует о контакте с возбудите­лем; выраженность ответа определяется как свойствами возбудителя, так и состоянием иммунной системы индивидума (иногда ответные реакции не выражены, отсутствуют или отмечается иммун­ный ответ к другому возбудителю за счёт перекрёстнореагирующих, групповых, антигенов).

Микробиологическая диагностика вирусных инфекций проводится по тем же принципам, но имеются некоторые особенности:

- при микроскопическом исследовании из-за малых размеров вирусов чаще изучают не мор­фологию возбудителя, а измененные в ходе вирусной инфекции клетки макроорганизма(отмечают наличие внутриклеточных включений, ЦПД, свечение ядра или цитоплазмы при иммунофлюоресцентном исследовании);

- для обнаружения вируса обычно материалом от больного заражают живую систему (культу­ру ткани, куриный эмбрион, животных) и наблюдают за специфическими изменениями, свидетель­ствующими о репродукции вируса; идентификацию вируса проводят а реакциях иммунитета с из­вестными противовирусными сыворотками (например, в реакции нейтрализации, РТГА и др.);

- выявление иммунного ответа сводится к определению противовирусных антител в реакциях с живыми известными вирусами иди приготовленными из них инактивированными диагностику­мами; ввиду невысокой антигенности вирусов антитела к ним накапливаются медленно, в не­больших титрах.

Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных потенциально- патогенными микро­бами имеет ряд особенностей;

- поскольку потенциально-патогенные микробы обнаруживаются у здоровых людей в составе нормальной микрофлоры, факт их обнаружения в исследуемом материале не может свидетельст­вовать об их этиологической роли (причинности) при данном заболевании;

- имеет значение обнаруженные в ходе диагностики количество и локализация возбудителя в организме больного, а также динамика этих показателей в ходе лечения инфекции;

- поскольку часто причиной возникновения такой инфекции является снижение антиинфек­ционной резистентности, данные о микрофлоре должны сопоставляться с данными о состоянии естественной резистентности и иммунного статуса больного в целом;

- для более точного суждения об этиологической роли того или иного возбудителя проводят изучение его факторов патогенности (определяют вирулентность).

Дата добавления: 2014-01-05