Вопрос 76. Возбудитель лейшманиоза

/. Характеристика лейшманий

2. Забор материала

3. Микроскопическое исследование

4. Бактериологическое исследование

5. Биологическая проба

1. Лейшманиоз — это протозойное трансмиссивное заболевание че­ловека и животных, при котором поражаются внутренние ор­ганы (внутренний лейшманиоз) или кожа и слизистые оболочки {кожный лейшманиоз).

Возбудители относятся к семейству трипаносом, роду лейшма-ний — паразиты из класса жгутиковых. Жизненный иикл лейш-маний протекает со сменой хозяев в виде 2 стадий:

• амастиготной (безжгутиковой) в организме позвоночного жи­вотного и человека;

• промастиготной (жгутиковой) — в организме членистоногого (москитов).

2. Материал для исследования, отбор проб

При исследовании появившихся бугорков при кожном лейшма-ниозе протирают кожу спиртом и производят укол по направле­нию к середине бугорка. Из выступившей капли серозно-кровянистой жидкости готовят на предметных стеклах мазки, высушивают, фильтруют и окрашивают по Романовскому. При исследовании язвы с обильным отделяемым материал для ис­следования с поверхности брать не рекомендуется, так как обильная бактериальная флора и большое количество распав­шихся клеток затемняют картину, поэтому материал берут пу­тем пункции в приподнятый неизъязвившийся край язвы по направлению ко дну язвы. Из содержимого готовят мазки, вы­сушивают, фиксируют и окрашивают по Романовскому. При внутреннем лейшманиозе исследованию подвергают пунктат костного мозга или усиленного лимфатического узла.

3. Микроскопическое исследование. Окрашенные мазки исследуют с иммерсионной системой.

В мазках обнаруживаются лейшманиальные формы паразита. Эти стадии паразита имеют сферическую или чаще овоидную форму.

Размер 2—6 мкм, ядро одно, лежит в середине клетки, около ядра находится протопласт в виде короткой палочки или круп­ного кокка. По Романовскому цитоплазма окрашивается в голу­бой цвет, ядро — в красный, блефаропласт — в вишнево-крас­ный — более темный цвет, чем ядро.

Паразиты наблюдаются в препарате как свободно лежащими, так и в цитоплазме больших одноядерных клеток типа макро­фагов и других ретикуло-эндотелиальных клеток.

4. Бактериологическое исследование. Серозно-кровянистую жид­кость из язвы вносят на среду ННН (агар + поваренная соль + дефибринированная кровь кролика).

Засеянные пробирки выдерживают при температуре 22—25 °С. Для предотвращения высыхания среды ватные пробки проби­рок заливают горячим парафином. Рост в виде мелких про­зрачных колоний, впоследствии сливающихся, обнаруживают­ся на 3—4-й день. Без пересева культуру можно сохранить 3— 4 недели и дольше. При посеве с поверхности агара петлей снимают отдельные колонии и засевают в пробирки со свежей средой на поверхность агара.

В культуре лейшмании представлены в виде лептомонадных форм. Они имеют удлиненное ланцетовидное тело размером 10—14 х 4—5 мкм с ядром в средней части тела и блефаропла-стом, лежащим около переднего конца тела паразита. От бле-фаропласта начинается свободно выходящий через передний конец тела клетки жгут, в 1,5 раза длиннее тела паразита. Часть лептомонадных форм часто собирается в розетки (жгу­тами к центру) по 10—15 экземпляров. В старых культурах на­блюдаются формы, лишенные жгута, в виде овальных, иногда круглых образований размером 4x5 мкм.

Серологические исследования — используются реакция связывания комплемента (РСК), иммуноферментная агглютинация (ИФА). 5. Биологическая проба. Возбудитель кожного лейшманиоза (мок­нущая форма) человека может быть экспериментально привит белым мышам, песчанкам и хомякам. У последних часто раз­вивается генерализованная инфекция. Материалом для зара­жения служат клетками из язвы или из культуры. Лейшмании из культуры вводят внутрикожно. Через 10—20 дней на месте введения лейшмании развивается инфильтрат, содержащий стадии паразита.

Вопрос 77. Возбудители медленных вирусных инфекций

/. Характеристика медленных вирусных инфекций

Дата добавления: 2014-01-07