Исследование каннабиоидов

В данную группу наркотических веществ входят препараты, приготовленные из различных частей конопли, наиболее распространенные: марихуана (смесь листьев, соцветия), гашиш (смолка, гашишное масло). Однако наркоманами используются практически все части растения. В смолке содержится около 30 различных каннабиноидов. Наиболее важные из них представлены в таблице 1.

Табл. 1. Некоторые каннабиноиды и их аббревиатуры.

Тетрагидроканнабинол	THC (ТГК)
Каннабинол	CBN (КБН)
Каннабидиол	CBD (КБД)
Каннабихромен	CBCh (КБХ)
Каннабигерол	CBG (КБГ)
Каннабиварин	CBV (КБВ)
Тетрагидроканнабиварин	THV (ТГВ)
Каннабиноловая кислота*	CBNA
Каннабидиоловая кислота*	CBDA
Каннабихроменовая кислота*	CBChA
Каннабигероловая кислота*	CBGA
Тетрагидроканнабиноловая кислота*	THCA
Тетрагидроканнабивариновая кислота*	THVA

Структурные формулы основных каннабиноидов.

ТГК КБН

КБД

Часто по содержанию этих каннабиноидов можно сделать вывод, откуда привезена данная партия конопли.

Типичная концентрация ТГК в наркотических средствах из конопли:

марихуана – 0,5-5%

гашиш – 2-10%

гашишное масло – 10-30%.

Методы исследования наркотических средств из конопли.

Анализ каннабиноидов представляет собой определенные трудности вследствие их высокой липорастворимости и низкой концентрации в анализируемых биожидкостях – моче и крови. Поэтому более часто содержание каннабиноидов устанавливается в смывах рук и ротовой полости курильщиков. Наиболее простым и чувствительным методом обнаружения каннабиноидов являются иммунохимические методы. Наиболее селективные методы – ГЖХ, ВЭЖХ, ГХ/МС – используются в качестве подтверждающих методов.

При отборе проб большое значение имеет визуальный осмотр сырья. Если образец не большой, его можно гомогенизировать перед отбором пробы. Каннабиноиды из сырья экстрагируют органическими растворителями – этилацетатом, гексаном, петролейным эфиром. Экстракт упаривают до конечного объема 0,1 – 0,3мл и используют для предварительного обнаружения с помощью цветных реакций и методом ТСХ.

Ι. Капельные реакции.

А. В качестве индикатора используют прочный синий Б или прочный синий ББ (лучше использовать прочный синий ББ, т. к. он обладает меньшим канцерогенным действием). Несколько капель полученного после упаривания раствора наносим на фильтровальную бумагу, которую затем смачиваем раствором прочного синего Б. Для ускорения протекания реакции, прочный синий Б смешивают с безводным сульфатом натрия (1:2) и после нанесения его на пробу сверху смачивают раствором щелочи. Реакцию можно проводить и в маленькой пробирке. Для этого делают раствор прочного синего в воде и добавляют его к образцу, затем добавляют хлороформ. Полученную смесь встряхивают, она разделяется и при наличии в ней ТГК хлороформный слой окрашивается в пурпурный цвет.

Б. Также используется реактив Дюкенуа-Левина. Этот реактив рекомендуют готовить свежий. Способ приготовления: 5 капель ацетальдегида + 0,4 г ванилина + 20 мл метанола.

Образец помещают в пробирку с этим реактивом, встряхивают примерно 2 мин и добавляют 2 мл концентрированной соляной кислоты. Через 10 мин к этой смеси добавляют 2 мл хлороформа. После отстаивания при наличии ТГК хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет. Только очень немногие природные вещества дают сходную окраску.

ΙΙ.Тонкослойная хроматография.

Системы растворителей для ТСХ:

Система А: петролейный эфир – 80

диэтиловый эфир – 20

Система В: циклогексан – 52

диизопропиловый эфир – 40

диэтиламин – 8

Система С: н-гексан – 70

диоксан – 20

метанол – 10

Соотношение образца и растворителя для экстракции: 1 г марихуаны (0,5 г гашиша, 0,1 г гашишного масла) на 20 мл растворителя. Полученный раствор выдержать в течение 20-30 мин при комнатной температуре или в течение 2-3 мин при температуре кипения. После этого (фильтровать не обязательно) раствор наносим на пластинку.

Петролейный эфир и гексан количественно экстрагируют только нейтральные каннабиноиды, остальные растворители – еще и кислоты. Выбор растворителя зависит от поставленной задачи.

Для проявления хроматограмм используют раствор 50 мг прочного синего Б в 20 мл 0,1 N NaOH или в 21 мл смеси метилового спирта с водой (20:1). При опрыскивании этими растворами все каннабиноиды дают пятна разного цвета.

ΙΙΙ. Газо-жидкостная хроматография.

Для ГЖХ используют неполярные фазы: OV-1, OV-17, SE-30 или BSA, MSTFA, BSTFA (если проводится дериватизация) – для насадочных колонок; OV-1 – для капиллярных колонок. Для количественного анализа используется внутренний стандарт – н-C₁₄.

Экстракт для ГЖХ получают также как и для ТСХ, но в данном случае его желательно профильтровать.

Можно вставить хроматограмму белорусской конопли с характерным очень маленьким пиком ТГК.

VΙ. ВЭЖХ.

Используются колонки с C₁₈. Подвижная фаза: метанол:0,02 N H₂SO₄ (80:20) или метанол: вода: уксусная кислота (85:14,2:0,8). Экстракцию проводят растворителями, которые растворяются в подвижной фазе (ацетон, смесь метанола с хлороформом (9:1) и др.) в течение 10-15 мин при комнатной температуре, лучше с ультразвуком. УФ-детектор (220-254 нм).

Спектральные методы не информативны.

Дата добавления: 2014-01-06