Методы исследования

ВВЕДЕНИЕ В ПРЕДМЕТ. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. ИСТОРИЯ РАЗВИТИЯ

Гистология (от греч. histos – ткань; logos – учение) – наука о строении, развитии и жизнедеятельности тканей организма. Относится к морфологическим наукам и, в отличие от анатомии, изучает микроскопическое строение организма, его тканевую, клеточную и субклеточную организацию.

Изучаемый предмет состоит из 4-х разделов:

– Общая гистология – учение о тканях.

– Частная гистология – изучает строение органов и систем организма (микроскопическая анатомия).

– Цитология – учение о клетке (клеточная биология).

– Эмбриология – учение о зародыше (об эмбриональном развитии животных и человека).

Поэтому наш предмет называется «Гистология, цитология и эмбриология».

Гистология – это базовая, фундаментальная наука, которая лежит в основе медицинских знаний. Без знания микроскопического строения органов и тканей невозможно понять их болезни и пути лечения.

Для оценки размеров клеток используют единицы измерения микрометры (мкм) или микроны (µ) (1 µ = 1/1000 мм или 10^{-6 м). Для оценки размеров субклеточных структур обычно используют единицы в тысячу раз меньшие – нанометры (1 нм = 1-3} µ или 10^{-9 м).}

Основным методом исследования в гистологии является микроскопический, а аппараты, позволяющие изучать микрообъекты, называются микроскопы. Разрешением (разрешающей способностью микроскопов) считают наименьшее расстояние между двумя точками, при котором они видны отдельно. Такое расстояние равно половине длины световых или иных волн, используемых в микроскопе. Наиболее часто применяют обычные световые микроскопы, где в качестве источника освещения используют естественный или искусственный свет с длиной волны 0,4-0,7 мкм. Поэтому разрешение светового микроскопа не превышает 0,2 мкм (не путать с увеличением микроскопа, которое равно произведению увеличений его окуляра и объектива).

Разновидностями световой микроскопии являются: а) ультрафиолетовая микроскопия, использующая более короткие ультрафиолетовые лучи с длиной волны около 0,3 мкм; б) люминесцентная микроскопия, источником света в которой являются ультра фиолетовые лучи или лучи синей части спектра с длиной волны 0,3-0,4 мкм. В момент действия этих лучей изучаемые структуры начинают светиться, и на основании различных типов свечения можно проводить их химический анализ; в) фазовоконтрастная микроскопия дает возможность изучать неокрашенные объекты благодаря особому устройству оп тики. Используется также тёмнопольная, интерференционная, поляризационная, конфокальная, сканирующая лазерная микроскопия, принципы которой Вы должны понять при изучении физики.

В электронном микроскопе используется пучок электронов, длина волны которых в 100 тыс. раз меньше, чем в световом микроскопе. Соответственно, и разрешение его будет во столько же раз больше.

Для качественного и количественного химического анализа гистологических структур используются гистохимические методы, с помощью которых можно оценить содержание различных веществ (белки, нуклеиновые кислоты, углеводы, липиды), а также активность различных ферментов. Поэтому гистохимию часто называют топографической биохимией. Для количественного гистохимического анализа используются методы цитоспектрофотометрии. Иммуногистохимия – исследование локализации антигенов в структурах с помощью меченых антител. Авторадиография – метод исследования, при котором исследуемому животному вводят меченое радиоактивным изотопом вещество, а затем прослеживают его распределение в клетках и органах с помощью фотоэмульсии, которой покрывают срезы, наблюдая участки её восстановления.

Для исследования тканей и органов в микроскопе необходимо сначала приготовить их гистологический препарат: сделать тонкий срез органа и окрасить его с помощью специальных красителей. Последние делятся на основные и кислые. При этом структуры, которые окрашиваются основыми красителями, называют базофильными, а структуры, которые окрашиваются кислыми красителями, называются оксифильными. Полихроматофилия – способность окрашиваться обоими типами красителей. Метахромазия – способность структур окрашиваться в тон, не свойственный цвету красителя (например, структуры окрашиваются синим красителем в красный цвет).

Подробней гистологическую технику изучают на практических занятиях, а также в научном студенческом кружке, где можно научиться самим изготавливать гистологические препараты. Она описана также в нашем учебно-методическом пособии «Методы исследования в гистологии» (2010).

Дата добавления: 2014-01-07