Моноклональные и поликлональные антитела

Еще до разработки технологии гибридом (гибридома – это клетка, получаемая гибридизацией, слиянием двух клеток в результате конъюгации или другим путем), позволяющей получать гомогенные (моноклональные) антитела, большое влияние на развитие клинической медицины оказали «обычные» (поликлональные) антитела. При этом наработка подходящих антител всегда осложнялась непредсказуемостью иммунного ответа, и их титр, как и перекрестные реакции, варьировали от животного к животному и от одной партии сыворотки к другой. Это определялось тем, что данный антиген вызывает образование целого набора антител.

Антитела – это гликопротеиды, образующиеся в ответ на введение антигена. Они относятся к гласу иммуноглобулинов, обладают общностью строения и отличаются способностью связывать различные антигены. В медицинской практике применяются антитела γ-класса (IgG, IgМ, IgА, IgЕ, IgD).

Один из результатов использования метода слияния клеток млекопитающих чрезвычайно быстро нашел применение в биотехнологии – это линии клеток, полученных при гибридизации с участием клеток миеломы (так называемые «гибридомы»), с помощью которых могут вырабатываться моноклональные антитела. Этот метод разработан Мильштейном с соавт. в Кембридже. Он основан на создании «бессмертных» клеток, то есть клеток нормальных лимфоцитов, обусловливающих иммунный статус организма, производящих антитела, за счет слияния их с клетками миеломы *. Таким способом получаются моноклональные антитела только одного типа в каждом конкретном случае. Область их применения различна: в диагностике вирусных и онкологических заболеваний; в определении (идентификации) возбудителей инфекционных заболеваний; при пересадке органов; при очистке белков методом иммуно-адсорбции; при очистке интерферонов и т.п.

Примечание: Миелома* - это злокачественные новообразования иммунной системы; они развиваются в результате неконтролируемой пролиферации линии лимфоцитов. При этом в больших количествах синтезируется один тип миеломных белков-антител, или так называемых аномальных иммуноглобулинов. Миеломные белки – удобная мишень для структурного изучения антител, так как они представляют собой структурно-гомогенные антитела, вырабатываемые опухолевыми плазматическими клетками – потомками одной злокачественно-перерожденной клетки. Иными словами, миеломы являются природными продуцентами моноклональных антител.

В основе получения моноклональных тел, как сказано выше, лежит гибридомная технология (уровень «клеточной» инженерии). Здесь осуществляется гибридизация β-лимфоцитов (выделенных из периферической крови, миндалин или селезенки человека) и клеток миеломы млекопитающих (мышей, крыс, человека). Слияние достигается с помощью, например, полиэтиленгликоля. Полученная гибридома способна продуцировать так называемые моноклональные антитела. В производствах антител биотехнологический процесс рассчитан на использование метода выращивания гибридомных клеток в инкапсулированном виде. При достижении клетками определенной плотности в капсулах антитела выделяются и очищаются с помощью простейших процедур. Таким способом можно получать практически неограниченное количество гомогенных (моноклональных) антител.

Дата добавления: 2014-01-07