Молекулярно-генетические методы

МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ В ГЕНЕТИКЕ ЧЕЛОВЕКА

Различная частота признака в разных популяциях.

Некоторые наследственные признаки имеют разную частоту встречаемости в генетически разных популяциях. Это объясняется накоплением определённых генов в данных популяциях. Например:

- недостаток Г6ФД или некоторые гемоглобинопатии, как серповидноклеточная анемия встречаются чаще в зонах распространения малярии, поскольку гетерозиготы по данной патологии являются устойчивыми к малярийному паразиту;

- в человеческих изолятах (территориальных, этнических или религиозных), при родственных браках возрастает частота мутантных генов.

Только совокупность вышеперечисленных критериев позволяет определить наследственную природу определённого признака. Эти критерии в отдельности не имеют практического значения.

Для определения наследственной природы признаков у человека, используются разные методы в зависимости от поставленной цели:

- молекулярно-генетические методы и цитогенетические методы для анализа наследственного материала и выявления мутаций; анализа генетических маркеров;

- биохимические методы для анализа первичного генного продукта (белка) и выявления дефектов метаболизма;

- генеалогический метод для анализа передачи нормальных и патологических признаков в семье;

- близнецовый метод для определения доли наследственных факторов и факторов среды в формировании нормального или патологического признака;

- популяционно-статистический метод для определения генетической структуры популяции.

Молекулярно-генетические методы основаны на технологии рекомбинантной ДНК и включают разные техники изучения нуклеотидной последовательности ДНК и генной экспрессии на уровне мРНК. Методы целенаправленны на выявление:

- нормальных или мутантных генов, ответственных за определенный признак;

- генных изменений, связанных с определенным фенотипом;

- некоторых особенностей организации ДНК, которые ассоциируют с определенными аномалиями - генетические маркеры (мини- и микросателлиты, сайты рестрикции, метилирование ДНК и др.)

- экспрессии генов (уровень экспрессии, тканеспецифичность экспрессии, экспрессия в разные периоды онтогенеза).

В зависимости от цели исследования возможно использовать различные методы, основанные на техниках:

- секвенированйя ДНК;

- ПЦР; Southern-blot и др.

Анализ нуклеиновых кислот является важным для:

- выявления носителей генных мутаций;

- пренатальной и постнатальной диагностики генных болезней;

- выявления генов предрасположенности к болезням;

- анализа родства (материнство/отцовство);

- анализа биологической принадлежности (в криминологии);

- выявления чужеродной ДНК (РНК) в диагностике инфекций.

На схеме показаны:

A. семья в двух поколениях, где оба родителя здоровы и имеют 5 детей, из которых 2 проявляют клинические симптомы ФКУ (фенилкетонурия, аутосомно-рецессивная болезнь);

B. результаты электрофореза продуктов ПЦР всех членов семьи: I-1,I-2, II-3, II-5, - являются гетерозиготными (Na), II-2 и II-4 являются гомозиготными по патологическому рецессивному аллелю (аа), а II.1 является гомозиготным по доминантному нормальному аллелю (NN).

Дата добавления: 2014-01-11