Реакция коагглютинации 9 страница

Наряду с питательными средами для культивирования можно использовать культуры тканей.

БХ свойства позволяют выявлять как родовые, так и видовые признаки. При дифференциации видов, входящих в род Mycoplasma, учитывают их способность расщеплять глюкозу, маннозу, аргинин, желатину, казеин и др. Характерный родовой БХ признак уреаплазм – способность вызывать гидролиз мочевины Þ дифференциально-диагностические среды (в качестве индикатора расщепления мочевины используют MnSO₄). На такой среде уреаплазмы дают колонии коричневого цвета.

Патогенность микоплазм и уреаплазм сочетается со способностью вызывать агглютинацию эритроцитов животных разных видов.

АГ. Трехслойная мембрана микоплазм содержит видоспецифические АГ (выделяют 69 видов). Наиболее специфичный метод серологической идентификации микоплазм – тест угнетения роста. Он основан на подавлении размножения микроорганизмов на питательной среде, куда внесена гомологичная для данного вида иммунная сыворотка. Другие серологические реакции (ИФ, РСК, РНГА) также применяются, но они не столь точны. Уреаплазмы отличаются от микоплазм АГ свойствами, у них в большей степени выражена типовая специфичность. Например, вид U.urealiticum представлен 14 сероварами.

Экология и распространение. Живут в организмах животных и человека. Многие виды являются сапрофитами и обитают в полости рта, ЖКТ. Единичные виды вызывают заболевания у человека – М.pneumoniae; М.hominis (условно-пат возбудители негонорейных уретритов, простатитов, сальпингитов, пиелонефритов и др. заболеваний урогенитальной сферы); М.fermentans и М.arthritidis. Из уреаплазм патогенны U.urealiticum (воспалительные процессы урогенитальной сферы).

Очень чувствительны к изменению осмотического давления, рН, увеличению температуры, УФ, дезинфектантам под действием которых быстро гибнут. Устойчивы к пенициллину (т.к. нет клеточной стенки), но чувствительны к антибиотикам.

Источник заражения – больные люди. Путь распространения – воздушно-капельный (М. pneumoniae) при близком и длительном контакте (малоустойчивы в окружающей среде). Широко распространены во всех странах мира.

Патогенез. В основе лежат уникальные свойства мембранных паразитов. Механизм включает тесный контакт мембран микроорганизмов с клетками эпителия или других тканей с помощью особых концевых структур (ЛП), взаимодействующих с рецепторами клеток микроорганизмов. При этом липидные компоненты мембран микоплазм диффундируют в мембрану клетки, а холестерин клеток микроорганизмов поступает в мембрану микоплазм. Заканчивается этот процесс откреплением или поглощением микоплазмы клеткой вследствие фагоцитоза. В последнем случае микоплазмы размножаются внутриклеточно (есть спец ферменты).

В фагоцитах из первичного очага поражения могут попадать в другие органы и длительно персистировать в организм. Токсинов не выделяют, повреждающее действие реализуется через продукты обмена (NН₄ и Н₂О₂), оказывающих неблагоприятное действие на мембраны пораженных клеток. Часто приобретает хроническое или латентное течение. Этому же способствует антигенная мимикрия.

В патогенезе определенную роль играет способность стимулировать пролиферацию окружающих их клеток, что способствует непрямому повреждению тканей, вызывая усиление клеточных иммунных реакций (ГЗТ) и увеличивает чувствительность клеток к вирусам (т.к. они интенсивно размножаются именно в делящихся клетках). Могут быть бессимптомные формы микоплазмоза; часто сочетается с ОРЗ. Условно-патогенные микоплазмы могут вызывать заболевания у лиц с иммунодефицитами в ассоциации с другими микроорганизмами.

Особенно тяжёлые заболевания в детском возрасте. У детей микоплазмоз сопровождается поражением органов дыхания и НС. Часто происходит генерализация с развитием патологических очагов в других внутренних органах. Наиболее тяжелое течение болезни у новорожденных и недоношенных.

Иммунитет. Наиболее ранняя ответная иммунная реакция носит клеточный характер, гуморальный иммунитет развивается позднее. Продолжительность приобретенного иммунитета зависит от интенсивности и формы инфекционного процесса. Например, микоплазменные пневмонии вызывают выраженный клеточный и гуморальный иммунитет на 5-10 лет.

Диагностика. Серологическое исследование с использованием РСК, ИФА, РНГА и др. В последнее время – регистрация клеточной иммунной реакции при микоплазмозе. Для ранней диагностики – ИФА мазков из бронхиальных и носоглоточных смывов и из другого материала.

Профилактика и лечение. Вакцинная профилактика к настоящему времени не разработана. Для лечения – АБ тетрациклинового ряда, эритромицин.

34. Возбудитель холеры. Лабораторная диагностика холеры. НАГ-вибрионы.

Vibrio cholerae – холерный вибрион.

Морфология.

Прямые или изогнутые подвижные палочки размерами 1,4-2,6х0,5-0,8 мкм; подвижность обусловлена одним или несколькими жгутиками. В их основании расположена базальная гранула (тело), погруженная в цитоплазму. Снаружи они покрыты оболочкой, образованной выростом наружного слоя клеточной стенки.

Хемоорганотрофы; метаболизм окислительный и бродильный. Температурный оптимум вариабелен; некоторые виды растут при температуре 20°С, большинство - при 30°С. Оксидаза-положительны. Восстанавливают нитраты. D-глюкозу и некоторые углеводы ферментируют с образованием кислоты, но не газа.Большинство видов сбраживает мальтозу, маннозу и трегалозу. Вибрионы распространены не только в пресных, но и солёных водоёмах, особенно в эстуариях рек. Покрывают дно, растительность и колонизируют организмы водных животных. Некоторые виды патогенны для водных беспозвоночных и позвоночных животных; часть вибрионов также патогенна для человека. Наибольшее медицинское значение имеют V. cholerae, V. parahaemolyticus и V. vulnificus (табл. 13-2). Типовой вид рода - V. cholerae.

Vibrio cholerae. Возбудитель холеры - тяжёлой инфекции с высокой летальностью.Европейская медицина столкнулась с холерой лишь в первой половине XIX века; до этоговремени холера вызывала эпидемии в ограниченном регионе полуострова Индостан. Закономерной особенностью эпидемиологии холеры были вспышки в период военных действий. Широкое распространение заболевания связано, в первую очередь, с колониальной экспансией Великобритании в Индии и на Среднем Востоке. В Западную Европу и Россию холера проникла вовремя польского восстания 1830-1831 гг. Основными воротами для прорыва возбудителя в Европу были некоторые регионы Ближнего Востока (Левант, Анатолия), Египет и порты Среди-земноморья. Для изучения холеры в Египет были направлены 2 экспедиции - французская (Ру, Нокар, Штраусс и Тюйе) и немецкая (Кох, Гаффки, Фишер и Тресков). Работа исследователей проходила в сложной и нервной обстановке, подогреваемой кампанией франко-прусскогошовинизма. Во время исследований Луи Тюйе заразился и погиб. К чести Коха, он сам нёс телоколлеги на кладбище и возложил на его могилу венок со словами: «Это скромный венок излавров, но им венчают героев». Работа немецкой экспедиции привела к открытию холерноговибриона («запятая Коха») в 1883 г., чему немало способствовал метод культивированиябактерий на твёрдых средах (желатина на стеклах), разработанный Кохом. После открытияхолерного вибриона было выделено большое количество гемолитических вибрионов и было предложено считать гемолитические виды непатогенными. Данный критерий считали вполне обоснованным до выделения супругами Готшлих гемолитических вибрионов из трупов мусульман-паломников на карантинной станции Эль-Тор в Египте (1906). Поскольку в то время эпидемии не было, то и роль вибриона Эль-Тор осталась недоказанной. Но в 1939 г. возбудительвызвал эпидемическую вспышку на острове Сулавеси (Индонезия), а позднее был признан этиологическим агентом седьмой пандемии холеры. В начале 1993 г. появились сообщения о вспышках холеры в юго-восточной Азии, вызванных вибрионами ранее неизвестной серогруппы, обозначенных как серовар 0139 (Бенгал).

МОРФОЛОГИЯ. Клетки холерного вибриона размерами 1,5-4,0х0,2-0,4 мкм имеют одинполярный жгутик, снабженный чехликом и продольным выростом, напоминающим ундул.

Типичные формы обычно наблюдают в образцах клинического материала; в мазках из колоний, выросших на плотных средах, доминируют палочковидные формы. Наибольшую вариабельность дают при выращивании на средах с крахмалом. Подвижность бактерий весьма выражена, и её определение (методом висячей или раздавленной капли) - важный диагностический признак. Деление клеток происходит очень быстро, на щелочной пептонной воде возбудитель даёт видимый невооружённым глазом рост уже через 6 ч. В старых культурах S-образно изогнутые, кокковидные или булавовидные инволюционные формы. Способны образовывать фильтрующиеся, а под действием пенициллина и L-формы. Тинкториальные свойства аналогичны таковым у энтеробактерий, вибрионы хорошо окрашиваются многими анилиновыми красителями. Наибольшее распространение получила окраска водным фуксином Пфайффера или.карболовым фуксином Циля. Для окраски органоидов, в частности жгутиков, предпочтительнапротрава с последующим импрегнированием солями тяжёлых металлов.

На твёрдых средах возбудитель образует небольшие круглые дисковидные прозрачные S-колонии с ровными краями, голубоватые в проходящем свете (что сразу их отличает отболее грубых и мутно-белых колоний энтеробактерий). Колонии маслянистые, легко снимаются со среды и эмульгируются, давая феномен «тяжа». Старые культуры несколько грубеют и приобретают желтовато-коричневый оттенок. На скошенном агаре через 24 чхолерный вибрион образует блестящий желтоватый налёт. На агаре с тиосульфатомцитратом, солями жёлчных кислот и сахарозой (TCBS-arap) Vibrio cholerae ферментирует последнюю и образует жёлтые колонии. На пластинках желатины через 48 ч вырастают беловатые зернистые колонии, окруженные зоной разжижения. При посеве уколом через 48-72 ч вызывает воронкообразное разжижение, его верхняя часть при просматривании сбоку представляется пузырьком воздуха; позднее разжижение увеличивается, и полость заполняется белёсой массой вибрионов. Также образуются неровные, мутные R-колониибактерии из них утрачивают чувствительность к бактериофагам, антибиотикам и не агглютинируются О-антисыворотками.

На жидких средах вызывает помутнение и образование нежной голубоватой плёнки на поверхности, её края приподняты вдоль стенок пробирки; при встряхивании она легко разрушается и оседает на дно. На 1% пептонной воде (рН 8,8-9,0) растут, опережая бактерии кишечной группы, и образуют нежную голубоватую плёнку и муть.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА. Факультативный анаэроб с более выраженными аэробнымисвойствами; быстро погибает в анаэробных условиях. Не образует спор и хорошо растет напростых питательных средах. Температурные пределы для роста 16-40°С; оптимум - 37°С.Может расти при высоком рН среды (7,6-8,0); подобные галофильные свойства используют в подборе элективных средств, а также применяя дезинфектанты с кислым рН.

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА. Холерные вибрионы сбраживают с образованием кислоты (безгаза) глюкозу, сахарозу, мальтозу, маннозу, маннит, лактозу (сравнительно медленно), ле-вулёзу, гликоген и крахмал. Инертны к арабинозе, дульциту, инулину, инозиту и рамнозе.Ферментация маннозы, сахарозы и арабинозы (триада Хёйберга) имеет диагностическое значение; холерные вибрионы разлагают только маннозу и сахарозу и принадлежат к 1 группе Хейберга (по отношению к этим трём углеводам все вибрионы разделяют на 6 групп). Проявляют протеолитическую активность - разжижают желатину с образованием «воронки» с пузырьком воздуха вверху, также гидролизуют казеин. Обладают плазмокоагулирующим (свёртывают плазму кролика) и фибринолитическим (разжижают свёрнутую сыворотку по Лёффлеру) действиями. Свёртывают молоко и разлагают другие белки и их дериваты до аммиака и индола. H₂S не образуют. Восстанавливают нитраты и образуют индол; эту способность учитывают в нитрозоиндоловой реакции, также известной как Пеля-Буйдвида, или холеpa-рот реакция. На основании биохимических и биологических различий холерные вибрионы разделяют на 2 биовара (биотипа): классический (V. cholerae asiaticae) *Эль-Тор (V. cholerae eltor). В настоящее время значительная часть изолятов Эль-Тор утеряла свои гемолитические свойства и дифференцируется только по способности агглютинировать эритроциты, резистентности к полимиксину и фагу IV. Бактерии группы 0139 устойчивы к полимиксину и не проявляют гемолитическую активность

Гемолитическая активность (реакция Грейга) может варьировать; классические вибрионы способны приобретать гемолитические свойства при хранении, а вибрионы Эль-Тор могут их терять при пассировании.

АНТИГЕННАЯ СТРУКТУРА. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- и термолабильные Н-Аг.

Н-Аг - общие для большой группы бактерий, разделённой на А и В группы; в группу А входят холерные вибрионы; в группу В - вибрионы, биохимически отличные от холерных.

По структуре О-Аг выделяют 139 серогрупп; возбудители классической холеры и холеры Эль-Тор объединяют в 01 (изолированную от холероподобных и парахолерных вибрионов) и, несмотря на существующие биохимические различия, при исследовании на холеру обязательно проводят типирование 01-антисывороткой. Кабешима и Такано (1913) установили, что О-Аг 01 группы холерных вибрионов неоднороден и включает А-,В - и С- компоненты, разные сочетания которых присущи сероварам Огава (АВ), Инаба (АС)и Хикоджйма (АВС, промежуточный серовар). Эти свойства используют в качестве эпидемиологического маркёра для дифференцирования очагов по возбудителям, хотя иногда от одного больного можно выделить бактерии разных сероваров. У шероховатых R-форм отмечают утрату О-Аг и они, а также слизистые М-формы (с измененной структурой 0-Аг), не агглютинируются О-антисыворотками (для идентификации OR- и R-диссоциатов используют OR-антисыворотки). Бактерии серовара 0139 не агглютинируются видоспецифической 01 и типоспецифическими Огава-, Инаба- и RO-антисыворотки.

Поскольку холероподобные вибрионы также не агглютинируются 01-антисывороткой, их обозначают как неагглютинирующиеся, или НАГ, вибрионы. Гарднер и Венкатрамен установили, что вибрионы группы В имеют неоднородную структуру О-Аг и разделяются на 6серологических подгрупп, состав которых совпадает с биохимической схемой Хайберга.

БАКТЕРИОФАГИ. Холерные бактериофаги были впервые выделены д'Эреллем (1920); они специфичны (лишь изредка могут давать перекрёстные реакции с родственными видами).Все Vibrio cholerae лизируются бактериофагом группы IV (по Мукерджи, 1963), а вибрионы биовара Эль-Тор - фагами группы V; тем не менее, создать схему типирования вибрионов Эль-Тор не удалось. Многочисленные исследования показали, что холерные бактериофаги практически не имеют терапевтического эффекта.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. Холера - типичная кишечная инфекция, и многое в её эпидемиологиианалогично поражениям, вызываемым энтеропатогенными бактериями

Выделяют 2 типа эпидемий холеры - эпидемии-вспышки с едиными источником инфекции и путями распространения, характеризующиеся одномоментным появлением большого количества больных, и вялотекущие эпидемии с перманентной заболеваемостью небольшого контингента и трудно выявляемыми путями передачи возбудителя

Единственный природный резервуар - больные и бактерионосители; основной механизм передачи - фекально-оральный, реже - контактный. Факторы передачи - пищевые продукты, вода, объекты окружающей среды. Определённую роль играют мухи, способные переносить возбудитель с испражнений на пищевые продукты. Несмотря на то, что выделение возбудителя в окружающую среду происходит в течение короткого времени, большое количество скрытых форм поддерживает циркуляцию возбудителя.

Индивидуальная восприимчивость к холере чрезвычайно вариабельна. Достаточно вспомнить неудачные опыты с самозаражениями И.И. Мечникова, З.В. Ермольевой и Петтенкофера. Наиболее предрасположены к холере лица, проживающие в неблагоприятных условиях и не соблюдающие правил личной гигиены. При эпидемических вспышках большую часть больных составляют взрослые, чаще мужчины; при вялотекущих эпидемиях в эндемичных районах основную группу заболевших составляют дети.

В большинстве случаев подъём заболеваемости наблюдают в тёплый сезон, но в эндемичном регионе сезонные колебания имеют серьёзные различия. В Дакке (Бангладеш) холера появляется после муссонных дождей и исчезает в сухой период; в Калькутте (Индия), по другую сторону дельты Ганга и Брамапутры, болезнь распространяется в сухой периоди исчезает во время дождей.

Холерный вибрион плохо переносит неблагоприятные воздействия внешней среды - солнечное облучение, высушивание и конкуренцию со стороны другой микрофлоры. Циркуляция возбудителя в воде прямо связана с наличием больных и бактерионосителей; после их изоляции он спонтанно исчезает через несколько суток (в стоячих водоёмах может сохраняться до 2-3 нед.). В выгребных ямах может существовать до 3-4 мес. Он может длительно сохраняться в продуктах с щелочным рН и высокой влажностью, а также одежде и постельном белье, испачканных испражнениями больных. Вибрионы биотипа Эль-Тор более устойчивы во внешней среде, что позволяет легко выделять их изводы и испражнений; все описанные в литературе бактерионосители холеры были инфицированы этим биотипом. Все вибрионы высоко чувствительны к действию дезинфектантов, особенно с кислым рН.

ПАТОГЕНЕЗ ПОРАЖЕНИЙ. Попав в организм человека, большая часть вибрионов погибает под действием кислой среды желудка. Лишь их небольшая часть достигает тонкой кишки. Факторы патогенности, обеспечивающие колонизацию, - жгутики (обеспечивают подвижность), муциназа (разжижает слизь и облегчает достижение поверхности эпителия) и нейраминидаза (обеспечивает взаимодействие с микроворсинками). В ответ на проникновение бактерий эпителиальные клетки выделяют щелочной секрет, насыщенный жёлчью, идеальная среда для размножения возбудителя. Клинические проявления холеры обусловливает способность к токсинообразованию; холерные вибрионы образуют эндо- и экзотоксины. Эндотоксин - термостабильный ЛПС, сходный по структуре и активности с эндотоксинами прочих грамотрицательных бактерий. Проявляет иммуногенные свойства, индуцируя синтез вибриоцидных AT. Не играет существенной роли в развитии характерных проявлений. ). Экзотоксин (холероген) - термолабильный белок; разрушается фенолом и формалином, но резистентен к действию протеолитических ферментов. Молекула токсина включает 2 компонента: компонент Б (образован пятью кольцевидно соединёнными субъединицами) взаимодействует с моносиаловым ганглиозидным рецептором что обусловливает проникновение в клетку компонента А. Компонент А составляют А1 субъединица (активный центр) и субъединица А2 связывающая оба компонента. Субъединица А1 катализирует рибозилирование гуанилзависимого компонента аденилатциклазы, приводит к повышению внутриклеточного содержания цАМФ и выходу жидкости и электролитов из клеток либеркюновых желёз в просвет кишечника. Токсин не способен реализовать своё действие на любых других клетках. Бактерии серовара 0139 также продуцируют экзотоксин с аналогичными свойствами, но в меньших количествах; токсинообразование кодируют как хромосомные, так и плазмидные гены. Возможно, что определённую роль в поражениях, вызываемых биотипом Эль-Тор, играют гемолизины.

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ. У большинства инфицированных лиц заболевание протекает бессимптомно либо возможна лёгкая диарея. По имеющимся данным, соотношение тяжёлых поражений к количеству стёртых проявлений для классической холеры составляет 1:5-10, для холеры Эль-Тор - 1:25-100.

Для клинически выраженных случаев инкубационный период варьирует от нескольких часов до 5 сут. (в среднем 2-3 дня); заболевание характеризуется общим недомоганием, болями в животе, рвотой и развитием выраженного диарейного синдрома. Для последнего характерно выделение значительного количества (до 10 л/сут) водянистых бесцветных испражнений («рисовый отвар»). Другая характерная черта - сладковатый «рыбный» (но не фекальный) запах у испражнений. В зависимости от степени интоксикации,симптоматика может иметь характер гастроэнтерита или энтерита.

В тяжёлых случаях у больных резко снижается объём мочи с развитием почечной недостаточности. Характерна охриплость голоса или афония. Ведущие патогенетические факторы - гиповолемия и выраженные нарушения электролитного баланса, вследствие чего развиваются артериальная гипотензия, сердечная недостаточность, нарушение сознания и гипотермия. Подобное состояние определяют как холерный алгид. Отмечают характерное проявление fades hippocrafica (запавшие глаза, заострённые черты лицас резко выступающими скулами). Продолжительность проявлений зависит от своевременного, адекватно проводимого лечения и варьирует от нескольких часов до нескольких дней. При отсутствии лечения летальность больных в алгидной стадии достигает 60%.в. Выздоровление сопровождается выработкой непродолжительной невосприимчивости, нередко отмечают случаи повторного заражения.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Основу составляют выделение и идентификация возбудителя. Цели исследований: выявление больных и бактерионосителей; установление окончательного диагноза при исследовании погибших; контроль за эффективностью лечения больных и санации носителей; контроль над объектами внешней среды и эффективностью дезинфекционных мероприятий. Материалы для исследований - испражнения, рвотные массы, жёлчь, секционный материал (фрагменты тонкой кишки и жёлчного пузыря), постельное и нательное бельё, вода, ил, сточные воды, гидробионты, смывы с объектов окружающей среды, пищевые продукты, мухи и др.

Наилучшие результаты даёт исследование проб, взятых до начала антибактериальной терапии. Испражнения лучше всего отбирать резиновыми катетерами. Можно использовать стеклянные трубочки с оплавленными краями (также вводят в анальное отверстие) или ректальные тампоны. При исследовании жёлчи отбирают порции В и С (доставляют нативный материал). Секционный материал помещают в стерильную тару раздельно. Все образцы помещают в герметически закрываемую транспортную тару. Материал следует доставлять в лабораторию не позже 2 ч после забора. При невозможности образцы помещают в транспортные среды.

Основным в лабораторной диагностике холеры является:

1) обнаружение в мазках из испражнений изогнутых тонких грамотрицательных палочек, располагающихся в виде «стайки рыб»;

2) активная подвижность вибрионов в раздавленной капле;

3) мгновенная их иммобилизация при добавлении 0–холерной сыворотки;

4) образование голубоватой пленки–паутинки на пептонной воде через 5–6 ч и характерных колоний–росинок на щелочном МПА (12 ч);

5) агглютинабельность вибрионов в противохолерных сыворотках и их лизабельность типовыми холерными фагами С и Эль–Тор.

Схема бактериологического исследования. Так как окончательные результаты должны быть выданы через 30–36 ч, то исследование проводится круглосуточно.

I этап. Из испражнений и рвотных масс готовят мазки, высушивают на воздухе, фиксируют смесью Никифорова и окрашивают водным фуксином или по Граму. Параллельно с этим изучается подвижность вибриона в раздавленной капле. Одновременно испражнения высевают на 1% щелочную пептонную воду, щелочной мясопептонный агар и TCBS. Все посевы помещают в термостат при температуре 37°С. Дают первое заключение о наличии в материале вибрионов.

II этап. Через 5–6 ч инкубации в термостате на пептонной воде вырастает едва видимая пленка, из которой делают мазки, препараты раздавленной капли. Пленку агглютинируют в капле О–холерной сыворотки и выдают второе заключение о природе выделенного вибриона. Пленки пересевают на вторую пептонную воду и щелочной МПА.

III этап. Спустя 12–16 ч от момента посева на среды испражнений больного представляется возможность повторно изучить морфологию, подвижность и агглютинабельность вибрионов пленки, выросшей на второй пептонной воде, а также провести те же исследования, отобрав с плотных сред подозрительные колонии.

Определив, что колонии состоят из вибрионов, агглютинирующихся в О–холерной сыворотке, разведенной 1:100, и в одной из типовых сывороток Инаба и Огава, разведенных 1:50, дают третье заключение о результатах исследования. Подозрительные колонии пересевают на скошенный агар для накопления культуры и определения ферментативных свойств.

IV этап. Установив, какие ферменты продуцирует культура вибриона на ряде Гисса, определяют ее чувствительность к холерным фагам и дают окончательное заключение.

35. Риккетсии. Возбудитель сыпного тифа. Лабораторная диагностика.

Риккетсии – это многочисленная группа бактерий–паразитов, названная именем их первооткрывателя, американского ученого Г. Риккетса, который, установив риккетсиозную природу пятнистой лихорадки Скалистых гор Северной Америки, в 1910 г. погиб в результате внутрилабораторного заражения. Большая часть риккетсий является безвредными бактериями–симбионтами членистоногих. Некоторые виды вызывают заболевания у человека. Рикеттсии являются естественными симбионтами членистоногих насекомых: клещей, вшей, блох. Обитая в организме насекомых, рикеттсии могут передаваться человеку и животным при укусе. Рикеттсии являются возбудителями сыпного тифа.

МОРФОЛОГИЯ. Риккетсии – плеоморфные и разнообразные по размерам микроорганизмы. Чаще всего имеют форму коккобактерий длиной 0,8–2 мкм и шириной 0,3–0,6 мкм, но в мазке вместе с этим встречаются бактериальные, бациллярные и нитевидной формы риккетсий длиной от 3 до 20–30 мкм. В организме больного обнаруживаются в цитоплазме и в ядре клеток.

По Граму риккетсий окрашиваются отрицательно. Для их дифференциации чаще применяется предложенная П.Ф. Здродовским облегченная модификация способа Циля–Нильсена: окраска водным фуксином (5 мин) с последующей обработкой мазка 0,01 % раствором соляной кислоты (1–3 с) и докрашиванием 0,5 % метиленовым синим (10 с). Обладая относительной кислотоустойчивостью, риккетсий при этом окрашиваются в рубиново–красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы или синего ядра клеток.

По Романовскому–Гимзе риккетсии окрашиваются в сиреневый цвет; при внеклеточном расположении часто имеют вид биполярных палочек или гантелек. Спор, капсул и жгутиков не образуют.

Облигатные внутриклеточные паразиты, могут размножаться только в живой клетке. Во внешней среде сохраняются некоторое время. У рикеттсий выделяют 2 морфоформы, которые образуются в клетке хозяина:

1) Вегетативная форма, которая размножается внутри клетки.

2) Покоящаяся форма, сохраняется в клетке, но не размножается. Имеет меньшие размеры. Вызывают хронический сыпной тиф.

Рикеттсии обладают минимальным собственным обменом веществ из-за особого строения ЦПМ. Они практически не способны выделять продукты метаболизма, это метаболически зависимые от клетки- хозяина микроорганизмы.

АГ. Риккетсии Провачека содержат два АГ:

1) растворимый АГ: термостабильный, липидополисахаридобелковый комплекс, видонеспецифический (такие же – у R. typhi и у протея ОХ₁₉)

2) нерастворимый АГ: термолабильный, видоспецифический, белково-полисахаридный комплекс.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Культивируются на куриных эмбрионах, культурах клеток, в живом организме (организме членистоногих). Затем из них делается препарат-мазок, окрашивается по Цилю-Нильсену (Здродовскому) и микроскопируется.

36. Лептоспиры. Лабораторная диагностика лептоспирозов.

Семейство Spirochaetaceae – патогенны 3 рода:

Treponema (возбудитель сифилиса – Т. pallidum, фрамбезии – Т. pallidum subsp. tenue, пинты – Т.carateum);

Borrelia (возбудитель эпидемического возвратного тифа – В. recurrentis, клещевого возвратного тифа – В. persica, В. hispanisa и др.)

Leptospira семейства Leptospiraceae (возбудитель лептоспироза – L. interrogans).

Спирохеты имеют штопорообразную извитую форму. Они отличаются друг от друга характером и числом завитков, длиной клеток, а также другими морфологическими и физиологическими признаками.

Все спирохеты Гр–. Большая их часть – свободно живущие микроорганизмы, в организме человека обитают как сапрофиты, патогенны немногие.

Лептоспиры имеют сигмообразную или С–образную форму, нередко с крючками на концах, около двух десятков мелких завитков. Длина их 6–20 мкм, а поперечник часто меньше разрешающей силы оптического микроскопа (0,2 мкм), поэтому лептоспиры предпочтительнее изучать в темнопольном микроскопе. По Романовскому – Гимзе окрашиваются в розовый цвет.

Дата добавления: 2014-10-17