Клиническое значение гемоглобина крови

Методы определения концентрации гемоглобина в крови

Для определения концентрации гемоглобина в крови используются:

- унифицированный гемиглобинцианидный метод;

- гемихромный метод – новый колориметрический метод, не содержащий в составе реагентов ядовитых цианистых соединений;

- гематологические анализаторы.

Распространенный в прошлом метод определения гемоглобина по Сали недостаточно точный и в настоящее время не применяется.

Определение концентрации гемоглобина крови унифицированным гемиглобинцианидным методом

Принцип. Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красной кровяной солью) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином соединение красного цвета – гемиглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.

Реактивы.

1. Трансформирующий раствор: ацетонциангидрин – 0,5мг; калий железосинеродистый – 0,2г; натрия гидрокарбонат – 1,0г; дистиллированная вода - до 1л. Раствор стабилен при комнатной температуре в течение нескольких месяцев при хранении в посуде из темного стекла. При обесцвечивании и появлении осадка непригоден.

2. Калибровочный раствор гемиглобинцианида – для построения калибровочного графика (при использовании ФЭКа). В настоящее время для определения гемоглобина крови в большинстве клинико-диагностических лабораторий пользуются готовыми наборами реактивов, выпускаемыми рядом фирм.

Специальное оборудование: ФЭК или МИНИГЕМ-540.

Ход определения. В пробирку с помощью градуированной пипетки или автоматического дозатора наливают точно 5мл трансформирующего раствора и вносят в него 0,02мл (капилляр Сали) крови, промывая капилляр 2-3 раза трансформирующим раствором. Тщательно перемешивают содержимое пробирки. При этом получается разведение крови в 251 раз. Колориметрируют содержимое пробирки через 20 минут на МИНИГЕМе-540 или на ФЭКе при условиях: светофильтр зеленый (длина волны 520-560 нм), кювета 10мм; против трансформирующего раствора. При использовании ФЭКа содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику.

Нормальное содержание гемоглобина в крови:у мужчин 130-160 г/л; у женщин 120-140 г/л.

Снижение концентрации гемоглобина в крови является основным лабораторным признаком анемии. Умеренное снижение содержания гемоглобина чаще бывает при железодефицитных анемиях, а значительное снижение характерно для острой кровопотери, гипопластической и В₁₂-дефицитной анемий. Однако для диагностики анемии не достаточно выявления снижения концентрации гемоглобина – это только устанавливает факт наличия анемии. Для уточнения характера анемии требуются дополнительные исследования (определение количества эритроцитов, их морфологии, расчетных эритроцитарных индексов, количества ретикулоцитов и др.).

Повышение содержания гемоглобина обычно сочетается с увеличением количества эритроцитов в крови и характерно для эритремии. Физиологическое повышение концентрации гемоглобина наблюдается у новорожденных.

1.3.4. Контрольные вопросы по теме «Определение концентрации гемоглобина в крови»

1. Какие исследования входят в общий анализ крови?

2. В каких случаях проводят укороченный анализ крови?

3. Какие документы регламентируют правила безопасной работы с биологическим материалом в КДЛ?

4. Основные правила безопасной работы с кровью.

5. Основная функция гемоглобина.

6. Чем строение гемоглобина взрослых отличается от гемоглобина плода?

7. Почему патологические соединения гемоглобина не могут выполнять дыхательную функцию?

8. Причины образования карбоксигемоглобина.

9. Методы определения концентрации гемоглобина в крови.

10. Диагностическое значение гемоглобина крови.

Дата добавления: 2014-11-29