Достоинства метода тонкослойной хроматографии

Тонкослойная хроматография. Достоинства и недостатки

Тонкослойная хроматография (ТСХ) – один из наиболее популярных методов хроматографического анализа при создании, производстве и контроле качества лекарственных препаратов. Такая широкая популярность метода обусловлена рядом существенных преимуществ тонкослойной хроматографии по сравнению с другими методами хроматографического анализа.

Экспрессность

Приготовление пробы для качественной ТСХ может уложиться в 1 минуту, для количественной – 5 – 10 минут (в отдельных сложных случаях может потребоваться до получаса). Элюция хроматограммы (в старых источниках литературы по хроматографии – проявление) в зависимости от состава элюента (подвижной фазы), длины хроматограммы и сорбента – от 5 до 30 минут. В большинстве случаев отсутствует необходимость в предварительной пробоподготовке (фильтрование, обезвоживание, концентрирование и т.д.), во многих случаях она может быть осуществлена на той же пластинке, на которой проводится анализ.

Униерсальность

ТСХ предоставляет возможность разделения многих образцов и многомерного элюирования при различных условиях. На одной и той же пластинке путем простой смены элюента (переставляем пластинку из одной камеры в другую) можно проводить двумерное элюирование можно комбинировать не только два разных элюента, но и даже тип хроматографии, например, адсорбционную и распределительную. В промежутке между двумя элюированиями можно провести обработку пластинки парами кислого или основного рагента и поменять степень ионизации компонентов изучаемой смеси.

Расход анализируемого вещества

Количество вещества, необходимое для проведения анализа в зависимости от чувствительности обнаружения и конкретных задач анализа составляет в большинстве случаев 1 – 500 мкг, причем при необходимости это количество вещества можно “вернуть”.

Простота техники ТСХ

Для освоения техники проведения анализа достаточно проведения 5 – 6 анализов (менее 1 рабочего дня) под руководством специалиста.

Наглядность и информативность

За исключением бумажной хроматографии ни один другой вид хроматографии не может конкурировать с ТСХ по этому параметру. Обработка хроматограммы различными реактивами не только позволяет установить расположение пятен (при анализе неокрашенных соединений), но может дать ценную информацию о химической природе обнаруживаемых веществ по специфической окраске пятен до и после применения того или иного реактива. В арсенале ТСХ имеется сотни различных реактивов на многие классы органических веществ. При использовании определенной техники работы одну и ту же хроматограмму можно обрабатывать последовательно несколькими реактивами на разные функциональные группы, что позволяет надежно дифференцировать даже близкие по структуре вещества одного класса.

Простота протоколирования результатов

Часто сама хроматограмма после опрыскивания специальным акрилатным клеем (можно заменить “простым” лаком для волос – без витаминных и прочих добавок – из личного опыта автора) может храниться несколько лет в качестве “живого свидетеля” анализа. При получении окрашенных пятен можно применить фотокопирование (“снять ксерокс”), сканирование или фотографирование хроматограммы (если пятна отдельных веществ неокрашены, а видны под ультрафиолетом, то эти пятна предварительно обводят карандашом в УФ-свете, после чего применяют методы копирования). Раньше применяли перерисовку хроматограммы на кальку.

Простота оборудования

Минимальный комплект оборудования для ТСХ состоит из пластинки (в продаже имеются готовые пластинки для ТСХ), ножниц, набора стеклянных капиллиров (могут быть с легкостью изготовлены самостоятельно), микропипеток, стеклянной камеры с крышкой, мягкого карандаша (исключительно графитовый – “простой карандаш”!, в старых руководствах рекомендуют “мягкий свинцовый карандаш), линейки (с милиметровыми делениями), пинцета, фильтровальной бумаги, источника УФ-света (как правило – со светофильтрами в 254 и 365 нм) и нескольких пульверизаторов для опрыскивания хроматограммы растворами реактивов.

Стоимость

ТСХ является самым дешевым методом анализа органических веществ. Общая стоимость указанного комплекта оборудования (если использовать в качестве источника УФ-света маломощные бытовые малогабаритные УФ-лампы) и приспособлений может уложиться в 500 – 1000 грн (для сравнения – самый дешевый жидкостный хроматограф стоит около 10 тыс долларов США). Несмотря на то, что для ТСХ необходимы чистые растворители, их стоимость не может сравниться со стоимостью растворителей для ВЭЖХ. Зачастую достаточной является обычная перегонка продажного растворителя марки “ч” (“чистый”). Таким образом, в самом дорогом варианте ТСХ-анализ обходится в сумму, не превышающей 5 – 10 грн, причем львиную долю этой суммы “съедает” собственно сама пластинка.

Дата добавления: 2014-12-27