Определение видовой принадлежности крови

Доказательные методы

Спектральный метод – основан на способности гемоглобина и его дериватов поглощать волны света определенной длины, т.е. образовывать спектры поглощения (темные полосы), вертикально расположенные на фоне видимого спектра.

Микрокристаллические реакции. Реакция получения кристаллов гидрохлорида гемина (кр. Тейхмана). Ниточку из ткани с пятномили часть соскоба помещают на предметное стекло, прибавляют к ним 2-3 мелких кристалла хлорида натрия, затем добавляют 2-3 капли ледяной уксусной кислоты. Препарат накрывают покровным стеклом, подогревают над пламенем горелки до начала кипения. Красящее вещество крови в результате такого воздействия переходит в гидрохлорид гемина, который при остывании препарата превращается в кристаллы в виде косых параллелограммов коричневого цвета. Такие кристаллы обладают двоякопреломляемостью, что может быть проверено при помощи поляризационного микроскопа.

Реакция получения кристаллов гемохромогена. Для приготовления реактива Такаямы берут 10% р-р гидроксида натрия, пиридин и насыщенный водный р-р глюкозы. На кусочек исследуемого пятна, соскоба на предметном стекле помещают несколько капель реактива Такаямы, препаратпокрывают покровным стеклом. Образующийся при этом гемохромоген выпадает в виде полиморфных, красного цвета кристаллов. Кристаллы имеют формы игл, ромба, располагаются группами в виде звезд, снопов и длинных пучков.

Метод хроматографии – на бумагу или стеклянную пластинку со слоем сорбента помещают вещество, подлежащее исследованию. Место нанесения его называется линией старта. По мере продвижения жидкости происходит разделение веществ, входящих в состав исследуемого объекта. Границу продвижения жидкости (линию фронта) отмечают. Бумагу или пластину высушивают и проявляют реактивом, окрашивающим искомые вещества.

Во многих случаях наличие крови в пятнах еще не решает вопрос об отношении этих кровяных следов к преступлению. Нередко лица, у которых на одежде обнаружены следы крови, ссылаются на происхождение их от крови животных. Попытки найти способ определения принадлежности крови человеку или животному предпринимались давно. Измеряли величину эритроцитов, изучали форму кристаллов гемоглобина, пытались использовать разницу в скорости щелочной денатурации крови и т.д., однако, все эти методы были не надежными и не вошли в практику. Только с открытием в 1899г Ф.Я. Чистовичем видовой специфичности антител судебная медицина получила точную и сравнительно не сложную методику определения видовой принадлежности крови – реакцию преципитации Чистовича – Уленгута).

Имея сыворотку, преципитирующую белок человека и белки животных, можно установить человеку или какому именно животному принадлежит кровь, правда специфичность реакции преципитации относительна, родственные виды животных могут давать сходную реакцию. Однако, это обстоятельство не имеет большого значения, т.к. существуют специальные методики, позволяющие дифференцировать кровь филогенетически близких видов животных – сравнительная реакция преципитации в агаре, реакция торможения преципитации в агаре и иммуноэлектрофорез.

Один из вариантов реакции преципитации в жидкой среде – кольцепреципитация. При этом вытяжка из пятна крови (антиген) и преципитируящая сыворотка (антитело) наслаиваются друг на друга, и на границе между ними появляется кольцо преципитации. Нередко применяют реакцию преципитации в агаре, т.к. она обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать мутные вытяжки и загрязненные пятна, дают возможность объективно регистрировать результаты. К ее недостаткам относятся несколько меньшая чувствительность и длительный срок наблюдений результатов. Эти недостатки преодолеваются применением методики встречного иммуноэлектрофореза (электропреципитации), сущность которой заключается в движении антигенов и антител навстречу друг другу в агаре под воздействием постоянного электрического тока. Эта методика сочетает все преимущества реакции преципитации в агаре с большой чувствительностью, ее проведения занимает 20-60 минут.

Для определения видовой принадлежности крови предлагаются также другие реакции иммунитета (связывание комплемента, пассивной агглютинации, анафилаксии и т.д.), но в практической работе их обычно не применяют.

Дата добавления: 2015-04-24