Протокол исследования колонии. Методические указания

Методические указания

1. Установить, соответствует ли внешний вид выросшей куль­туры внешнему виду колонии, из которой был сделан посев (поверхность, пигмент, прозрачность, консистенция культуры). Приготовить из выросшей культуры препарат-мазок, окрасить его фуксином Пфейффера и, установив форму бактерий и характер их взаимоположения. отметить, правильно ли был сделан пересев культуры.

2. Описать внешний вид колоний одного из двух видов бактерий, выросших на пластинках МПА. Приготовить препараты-мазки из описанных колоний, окрасить их фуксином Пфейффера и определить морфологию бактерии для каждого вида колоний. Одну из колоний пересеять на косячок для получения чистой культуры.

1.Размер колонии_______________________________________

2.Форма колонии_______________________________________

3. Поверхность колонии_________________________________

4. Края колонии________________________________________

5.Прозрачность колоний_________________________________

6.Пигмент_____________________________________________

7.Консистенция________________________________________

8.Форма бактерий______________________________________

9. Взаиморасположение бактерий_________________________

10.Латинское морфологическое название бактерий___________________________

3. Объяснить принципы конструирования сред "пестрого ряда"; а также характерные изменения последних, наступающие в результате ферментативной деятельности бактерии. Произвести посев на среды "пестрого ряда" культур кишечной палочки и фекального шелочеобразователя.

Помимо общепринятых сред, в состав "пестрого ряда" нередко включаются среды с другими углеводами, а также среда для определения уреазы - фермента, расщепляющего мочевину. Среда представляет собой мясопептонный бульон с добавлением 1-2% мочевины и индикатора фе­нолового красного. При разложении мочевины образуется аммиак, вызы­вающий изменение рН среды и соответственно желтой окраски индикатора, на красную.

4. Разобрать типы дыхания, их сущность и разницу, группы бактерий по типу дыхания. Перечислить и раскрыть сущность механических, физических, химических и биологических методов культивирования анаэробов.

Приготовить взвесь почвы в физиологическом растворе. С помощью пастеровской пипетки засеять 1-2 капли взвеси на среду Кита-Тароцци.

Сделать посев почвенной взвеси на среду Вильсон-Блера в трубки Вейон-Виньяля. Для этого исходная взвесь почвы последовательно разводится в трех пробирках с 10 мл физиологического раствора[1]*. Несколько капель из последней пробирки засеять в расплавленную и остуженную до 42°-45° среду Вильсон-Блера. Среда с засеянным материалом переме­шивается и насасывается в трубки Вейон-Виньяля, которые после застывания среды запаивают и помещают в термостат.

Латинское морфологическое название выделенной культуры   окраска по Граму	Латинское морфологическое название бактерий из колонии   окраска по Граму	Метод выращивания анаэробов по Фортнеру

5. Записать состав среды Плоскирева и Эндо и характер их изменений при росте различных бактерий. Произвести посев культур кишечной палочки, фекального щелочеобразователя и стафилококка на среды Плоскирева, Эндо и МПА. Для этого чашка с каждой средой де­лится на три сектора и на каждый сектор с помощью петли засевается одинаковое количество культуры одного из микробов (культура рассеивается по всей поверхности сектора в виде газона). При посеве на разные среды и разных микробов следует стремиться засеять одинаковое количество бактерий и одинаковым способом для того, чтобы на следующем занятии можно было сравнить интенсивность роста.

Рецепт среды Эндо:____________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Рецепт среды Плоскирева:______________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Контрольные вопросы

Какие методы определения чистоты выросшей культуры Вы знаете?

Как можно по внешнему виду культуры определить ее чистоту?

В чем заключается микроскопический метод проверки чистоты вы­деленной культуры бактерий?

Для чего добавляется индикатор в углеводные среды "пестрого ряда"?

Какие различия между бактериоскопическим и бактериологическим анализами?

Какие углеводы чаше всего включаются в среды "пестрого ряда"?

Какой цвет имеет углеводная среда с индикатором Андреде в случае ферментации углевода?

Какого цвета углеводная среда с индикатором ВР, если бактерии потребляют углевод? Почему?

Как определяется способность бактерий ферментировать углеводы с образованием газа?

Как определяется индол в среде?

Как определяется уреазная активность бактерий?

Как определить способность бактерий образовывать H₂S?

Что такое анаэробиоз?

Кто открыл анаэробные бактерии?

Какие методы применяются для удаления кислорода из атмосферы роста и питательных сред для анаэробов?

В чем заключается метод выращивания анаэробов, предложенный Фортнером?

Какой состав имеет среда Вильсон-Блера?

Чём отличаются облигатные анаэробы от факультативных?

Что такое регенерация питательной среды и как она производится?

Какие изменения вызывают анаэробы на среде Тароцци?

Почему происходит почернение среды Вильсон-Блера при росте анаэробов?

Как выделяют чистые культуры анаэробных бактерий?

Какой состав имеют среды Эндо, Левина, Плоскирева?

Почему среда Плоскирева обладает бактериостатическим действие?

Для чего в среды Плоскирева, Эндо, Левина добавляется молочный сахар (лактоза)?

Почему колонии кишечной палочки на средах Эндо, Левина и Плоскирева окрашены?

Какие бактерии на средах Эндо, Левина, Плоскирева вырастают в виде бесцветных колоний?

Приложение к ЗАНЯТИЮ 5.

Дата добавления: 2015-03-29