Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Дослід № 3. Визначення циркулюючих імунних комплексів




Дослід № 2. Визначення вмісту вільного гепарину в крові за методом сірмаї.

Принцип методу. Метод базується на здатності толуїдинового синього зв’язувати вільний гепарин крові, що призводить до скорочення тромбінового часу.

Матеріальне забезпечення: плазма, 0,1 % розчин толуїдинового синього, розчин тромбіну (25 мг тромбіну на 1 мл 0,85 % розчину натрію хлориду), ізотонічний розчин натрію хлориду, водяна баня, секундомір, відалівські пробірки.

Хід роботи: У відалівську пробірку (контроль) відмірюють 0,05 мл ізотонічного розчину натрію хлориду і 0,1 мл досліджуваної плазми. Пробірку ставлять у водяну баню за температури 37 °С. Через 30 с додають 0,1 мл тромбіну і фіксують час згортання крові. В іншу відалівську пробірку (дослід) відмірюють 0,05 мл толуїдинового синього і також ставлять на водяну баню за температури 37°С. Через 30 с додають 0,1 мл тромбіну і фіксують час згортання крові. Різниця в часі згортання плазми в першій і другій пробірках свідчить про кількість вільного гепарину.

Зробити висновок.

Клініко-діагностичне значення. Не зважаючи на те, що гепарин синтезується та відкладається про запас в опасистих клітинах, він завжди тісно пов’язаний із кровоносними судинами та виконує низку важливих функцій. Високий негативний заряд гепарину забезпечує його специфічне зв’язування з факторами згортання крові ІХ та ХІ, проте важливішим для його антикоагулянтних властивостей є здатність взаємодіяти з a2-глікопротеїном плазми – антитромбіном ІІІ, що значно посилює інактивуючу дію антитромбіну ІІІ на серинові протеїнази, а саме на тромбін. Нагромадження в крові білків гострої фази, імунних комплексів призводить до порушення комплексоутворення антитромбін ІІІ-гепарин, тоді як зв’язування гепарину з адреналіном, норадреналіном, серотоніном і гістаміном викликає інактивацію фізіологічних функцій останніх.

гепарин також може специфічно зв’язуватися з ліпопротеїнліпазою, присутньою в стінках капілярів, і викликати вивільнення цього ензиму в кров. Аналогічний процес відбувається з печінковою ліпазою.

У нормі величина вільного гепарину коливається в межах 16 – 20 с. Зменшення кількості гепарину спостерігають при інфаркті міокарда, порушеннях функцій печінки, псоріазі тощо.

 

Принцип методу. Метод ґрунтується на преципітації велико глобулярних імунних комплексів, які циркулюють у крові, високомолекулярним полі етиленгліколем (ПЕГ) з наступним обліком результатів прямим спектрофотометруванням при довжині хвилі 450 нм.

Матеріальне забезпечення: сироватка хворого, 0,1 М боратний буфер (рН 8,4), 4 % розчин поліетиленгліколю-6 000, спектрофотометр, пробірки.

Хід роботи: Уконтрольну пробірку вносять 2,7 мл 0,1 М боратного буферу (рН 8,4) і 0,3 мл розведеної в три рази боратним буфером сироватки хворого; у дослідну – 0,3 мл розведеної сироватки та 2,7 мл 4 % розчину поліетиленгліколю-6 000 (ПЕГ). Обидві пробірки витримують 1 год при кімнатній температурі, вимірюють екстинкцію на спектрофотометрі при довжині хвилі 450 нм. Отриманий показник екстинкції множать на тисячу і виражають в умовних одиницях.

Зробити висновок.

Клініко-діагностичне значення. Визначення циркулюючих імунних комплексів є важливим тестом для визначення тяжкості та активності патологічного процесу. У нормі їх рівень коливається в межах 30 – 100 ум.од. Розміри ЦІК впливають на їх імунобіологічну активність і роль в патогенезі захворювань. ЦІК великих і середніх розмірів є найбільш патогенними, тобто можуть взаємодіяти з системою комплементу, згортаючою, калікреїнкініновою й іншими регуляторними системами організму і здійснювати цитопатогенний вплив на клітинні мембрани.




Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2015-05-24; Просмотров: 676; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.012 сек.