Розчин налити в кювети з товщиною шару 5 мм

На основі отриманих результатів роблять висновок про відповідність масової частки білка в продукті вимогам стандарту.

РОБОТА 3. ВИЗНАЧЕННЯ МАСОВОЇ ЧАСТКИ БІЛКОВИХ РЕЧОВИН В ХАРЧОВИХ ПРОДУКТАХ НЕФЕЛОМЕТРИЧНИМ МЕТОДОМ

Метод ґрунтується на вимірюванні інтенсивності світлового потоку, розсіяного твердими або колоїдними частинками, що знаходяться в розчині в підвішеному стані. За інтенсивністю світлорозсіювання, що визначається нефелометром, судять про концентрацію досліджуваної речовини.

В даний час знаходять широке використання фотоелектричні нефелометри.

Розчини високомолекулярних сполук, наприклад розчини білків, здатні за певних умов в присутності деяких хімічних реагентів опалесценціювати. Одним з таких реагентів є сульфосаліцилова кислота. Концентрація білка в цьому випадку може бути визначена за інтенсивністю опалесценції.

Продукти гідролізу білка – пептони, амінокислоти та інші азотовмісні речовини – не опалесценціюють.

Експериментальною перевіркою встановлено, що нефелометричний метод з використанням сульфосаліцилової кислоти відрізняється швидкістю, високою точністю, простотою та стійкою кореляцією з методом К’єльдаля.

Прилади, обладнання, матеріали: зразок продукту, аналітичні ваги, конічна колба місткістю 250…300 см³, пробка, бюретка, 0,05 моль/дм³ розчин гідроксиду натрію, механічний струшувач, центрифуга, піпетка, мірна колба місткістю 50 см³, сульфосаліцилова кислота, кювети з товщиною шару 5 мм, фотоелектричний нефелометр, прилад Чижової.

Схема визначення масової частки білків нефелометричним методом:

0,5 г продукту зважити з точністю до 0,001 г в конічну колбу на 250 см³

додати з бюретки 50 см³ 0,05 моль/дм³ розчину гідроксиду натрію

закрити колбу пробкою

15 хв струшувати на механічному струшувачі

10 хв центрифугувати (частота обертання 6000 хв^-1)

5 см³ центрифугату піпеткою перенести в мірну колбу на 50 см³

довести вміст колби до мітки сульфосаліциловою кислотою

колбу швидко перевернути 2…3 рази

виміряти на приладі оптичну густину (довжина хвилі 550 нм)

Отримання правильних результатів під час нефелометричного аналізу в значній мірі залежить від методики отримання суспензії, зокрема від порядку змішування розчинів, швидкості змішування.

Виміри треба проводити одразу після додавання кислоти, оскільки частинки білка швидко агрегують.

Масову частку білка визначають за калібрувальною кривою (рис. 3.3). Побудову її ведуть так само, як і в біуретовому методі.

Дані спостережень та розрахунків записують у таблицю, яку оформляють аналогічно табл. 3.1. Середнє значення одержаних результатів порівнюють з очікуваним вмістом білка, встановлюють причини та величину відхилення.  

Дата добавления: 2015-05-24