Культивирование

Морфолоигические и биологические свойства

Возбудитель болезни: Haemophilus parasuis -Мелкая, длиной от 0,2 до 0,5 мкм, неподвижная, Грам отрицательная палочка, окруженная капсулой, спор не образует. По типу дыхания - факультативный анаэроб. В мазках из патологического материала возбудитель имеет вид коротких цепочек, диплобактерий и нитей.

Возбудители гемофилёзов включены в 5 группу (факультативно-анаэробные грамотрицательные палочки) в семейство Pasteurellaceae род Haemophilus. Род имеет 16 видов, среди которых имеются патогенные для человека и животных.

Для роста и развития на искусственных питательных средах нуждается в ростовых факторах, содержащихся в крови и продуктах обмена некоторых бактерий.

Для этого готовят кровяной МПА (рН 7,2), содержащий 5% крови овцы; шоколадный агар (к расплавленному 2%-ному МПА при температуре 90ºС добавляют 10% по объему стерильной дефибринированной крови барана или лошади). Готовят также специальные среды: плотные и жидкие Левенталя и Файдля. Посев и пересев производят на подсушенную среду, выдерживают в термостате крышкой вверх в течение 30 мин, затем бактериологической петлёй захватывают культуру негемолитического штамма кишечной палочки или белого стафилококка и делают крестообразный посев штрихом по диаметру чашки ("баккормилка").

Гемофильные бактерии дают рост в зоне 1–2 см от штриха.

Это обусловлено тем, что при росте кишечная палочка или стафилококк продуцируют в агаровую среду ростовые факторы, стимулирующие рост гемофилёзных бактерий.

Посевы инкубируют в термостате при температуре 37–38ºС в течение 24-48 ч.

Диагностика и дифференциальная диагностика

Не позднее 4–6 ч с момента гибели животного для бактериологического исследования берут экссудат из перитональной, плевральной и перикардиальной полостей, а также соскобы с поражённых серозных оболочек в стерильные флаконы, при наличии клинической картины в центральной нервной системе берут мозг и содержимое мозговых желудочков. Патологический материал помещают в термос со льдом и отправляют нарочным в лабораторию.

Лабораторные исследования включают микроскопию мазков из патологического материала, окраску проводят по Граму и Гинсу, посевы на кровяном мясо-пептонном и шоколадном агаре; выделение и идентификацию культуры возбудителя, определение его патогенности на лабораторных животных (морских свинках).

Колонии, выросшие на шоколадном агаре, суспендируют в стерильном физиологическом растворе до 20 Ед. мутности. Суспензию в дозе 1 мл вводят внутрибрюшинно трём морским свинкам. Наблюдение ведут в течение 5 дней. Культуру признают вирулентной в случае гибели 1 или более морской свинки и выделения от них исходной культуры.

Для дифференциации серогрупп ставят РСК.

Во всех случаях диагноз устанавливается на основании бактериальных исследований.

Гемофилёзный полисерозит необходимо отличать от серозитов другой этиологии. Микоплазменные полисерозиты протекают с ограниченным охватом поголовья (5–6%), менее остро, без повышения температуры тела. При подостром и хроническом течении стрептококкоза наблюдают не только серозиты и артриты, но и периодические поносы, изъязвления суставных поверхностей.

Дата добавления: 2015-05-10