Сделать вывод. Работа № 2. Цветные реакции на соединения, относящиеся к обмену аминокислот

Принцип метода.

Название реакции.

ТЕРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ.

Работа № 2. Цветные реакции на соединения, относящиеся к обмену аминокислот. Открытие индикана и фенилпировиноградной кислоты в моче.

Индикан (индоксил серная кислота) является метаболитом триптофана: в толстом кишечнике под воздействием ферментов микрофлоры триптофан превращается в токсичное соединение - индоксил, который поступает по воротной вене в печень, где соединяется с серной кислотой. Индоксил серная кислота (индикан) выделяется через почки с мочой. В моче здорового человека индикан содержится в незначительных количествах. Индиканурия наблюдается при: использовании диеты с высоким содержанием белка, усиленном росте бактерий в ЖКТ, длительных запорах, колите, перитоните, разрушении бактериями тканевого белка и гнойных экссудатах (гангрена, гнойные процессы в легких и т.д.). Определение индикана в моче проводится по специальному требованию врача.

Фенилпировиноградная кислота (ФПК) образуется в результате дезаминирования фенилаланина. Наследственное нарушение превращения фенилаланина в тирозин (фенилкетонурия, ФКУ) сопровождается образованием больших количеств ФПК. Причина ФКУ - врожденная недостаточность фермента – фенилаланингидроксилазы, которая катализирует реакцию гидроксилирования фенилаланина. Экспресс-диагностика ФКУ у новорожденных детей имеет важное значение для начала своевременного лечения с целью предупреждения развития умственной отсталости.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ.

Провести цветные реакции на индикан и ФПК, оформить протокол:

3. Результаты записать в таблицу:

№ п/п	Исследуемый материал	Название реакции	Что открывают	Реактивы и условия	Наблюдаемый результат

· Открытие индикана в моче. Реакция Обермейера.

Принцип метода. При воздействии HCl индикан превращается в индоксил, который окисляется в синее индиго в реакции с хлоридом железа. Ход работы. Работа выполняется в вытяжном шкафу! В пробирку помещают 2 мл мочи, добавляют: 2 мл раствора ТХУ, 7 капель тимола, 3 мл Реактива Обермейера (0,4 г FeCl₃ x 6H₂O в 100 мл конц. HCl), 1 мл хлороформа. Пробирку тщательно закрывают заранее подобранной пробкой, после чего содержимое интенсивно встряхивают. При наличии индикана хлороформ в нижней части пробирки окрашивается в фиолетовый цвет.

· Проба с хлорным железом на фенилпировиноградную кислоту (ФПК).

Принцип метода. При взаимодействии ФПК с хлорным железом наблюдается зеленое окрашивание. Ход работы. Приготовить две полоски фильтровальной бумаги: одну смочить нормальной мочой, а другую – патологической. Обе полоски подсушить на воздухе. Нанести по 1 капле 1% раствора FeCl₃. Наблюдают развитие сине-зеленое окрашивание только в патологической моче.

Учебная литература

1. Ермолаев. М.В., Ильичева Л.П. Биологическая химия: Учебник. – М.: Медицина, 1989. Стр. 242-244.

2. Кухта В.К и соав. Основы биохимии: Учебник. – М.: Медицина, 1999. Стр. 350-352.

3. Пустовалова Л.М. Практические работы по биохимии/ Серия «Среднее профессиональное образование». – Ростов н/Д: Феникс, 2004. Стр. 29-37.

Дата добавления: 2015-05-10