Определение гемоглобина крови

Цель: знать разные методы определения гемоглобина в крови и уметь использовать полученную величину для диагностики анемий.

Принцип метода:гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин.

Образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемоглобинцианид, интенсивность которого пропорциональна количеству гемоглобина.

Ход работы:В 1-ю пробирку наливают 0,02 мл крови, во 2-ю 0,02 стандартного раствора с содержанием Нb -120 г/л, приливают по 5 мл ацетонциангидридного реактива (содержит ацетонцианингидрин и красную кровяную соль) и хорошо перемешивают. Через 20 мин на ФЭКе измеряют светопоглощение при 540 нм (зеленый светофильтр № 6); определяют экстинцию полученного раствора, фотометрируя против ацетонциангидридного реактива.

Содержание Нв в крови рассчитывают по формуле =

В норме: содержание гемоглобина у мужчин – 130 - 160 г/л;

у женщин – 120 – 140 г/л.

Диагностическое значение анализа: повышение уровня гемоглобина наблюдается при полицитемии, чрезмерной физической нагрузке, при подъеме на большие высоты. Снижается уровень гемоглобина при различных формах анемии.

Следующие опыты относятся ко 2-му занятию по биохимии крови, однако работа в первом опыте предполагает взятие пробы крови из пальца, то их целесообразно выполнять на этом занятии.

Дата добавления: 2015-07-02