Турбидиметрический метод определения уровня серогликоидов в сыворотке крови

Принцип метода. При добавлении к сыворотке крови раствора хлорной кислоты белки выпадают в осадок, а серогликоиды оста­ются растворенными в реактиве, из которого могут быть выделе­ны путем осаждения фосфорновольфрамовой кислотой. По сте­пени помутнения раствора судят о содержании серогликоидов в исследуемом материале.

Реактивы: раствор хлористого натрия, 8,5 г/л.; раствор хлорной кислоты (НОСlO₄), 1,8 моль/л.

Ход работы. 0,5 мл сыворотки смешивают с 4,5 мл раство­ра хлорида натрия (реактив I)и добавляют по каплям 2,5 мл рас­твора хлорной кислоты. Содержимое пробирки тщательно пере­мешивают стеклянной палочкой, оставляют на 10 мин при ком­натной температуре, центрифугируют 15 мин при 2000—2500 об/мин на общеклинической центрифуге (типа ОПН-3). Отбира­ют 5,0 мл центрифугата, к которому добавляют 1,0 мл фосфорно­вольфрамовой кислоты и через 15 мин определяют оптическую плотность смеси при красном светофильтре ФЭКа (или другого фотометрического прибора) в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Результаты сравнивают с показателями контрольной пробы, которую готовят смешиванием 3,3 мл раствора хлорида натрия с 1,7 мл раствора хлорной кислоты и с 1,0 мл раствора фосфорно­вольфрамовой кислоты. Разница в их значениях (единицы абсорб­ции, учтенные до третьего знака после запятой) отражает содер­жание серогликоидов в сыворотке крови.

Уровень серогликоидов в сыворотке крови практически здо­ровых взрослых людей составляет 0,130—0,200 усл. ед. (ед. абсорб­ции).

Клинико-диагностическое значение. Общее содержание серогликоидов (наиболее лабильной фрак­ции гликопротеинов) увеличивается при воспалительных и некробиотических процессах, в том числе при желтушном синдро­ме (особенно на почве новообразования), злокачественных опу­холях, обострении хронического холецистита, деструктивной форме туберкулеза легких, ревматизме, инфаркте миокарда, ин­сульте (мозговом).

Уровень серогликоидов снижается при нарушении протео-синтетической функции печени — инфекционном гепатите, ге-патоцеллюлярной дистрофии, а также при рассеянном склерозе. Для резкого нарушения функции печени характерно снижение содержания преалъбумина; в связи с этим фракционирование се­рогликоидов (методом электрофореза на агарозе, полиакрил-амидном геле) считается целесообразным для выявления воспа­лительного процесса у больных хроническим гепатитом и цирро­зом печени.

Контрольные вопросы

1. Химические структурные компоненты основного вещества соединительной ткани (СТ), их соотношение.

1. 2. Биологические функции СТ.

2. 3. Назовите белки волокнистых структур СТ.

3. 4. Особенности первичной структуры коллагена.

4. 5. Написать формулы маркерных аминокислот коллагена.

5. 6. Какова вторичная структура коллагена?

6. 7. Особенности синтеза проколлагена.

7. 8. Строение тропоколлагена.

9. Образование и особенности строения коллагеновых волокон.

10. Виды коллагена и коллагенозов.

11.Строение эластина, его биологическая функция.

12. Назовите субстраты, необходимые для синтеза углеводных компонентов основного вещества СТ.

13. Принципы построения мономеров кислых гликозаминогликанов?

14. Назвать сульфатированные гликозоаминогликаны. Каковы их строение и биологическая роль?

15. Сиаловые кислоты. Их строение и роль в формировании структур СТ.

16. Диагностическое значение определения сиаловых кислот в сыворотке крови.

17. Назовите витамины, принимающие участие в реакциях метаболизма СТ.

Дата добавления: 2015-07-02