Студопедия

КАТЕГОРИИ:


Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)

Расчетные показатели на основе ПВ

Для снижения влияния интерферирующих факторов рекомендуется одновременно определять ПВ исследуемой пробы и референтной нормальной пулированной плазмы, а оценку результата проводить в виде индексов ПВ.

Протромбиновый индекс (ПИ) в %:

ПИ = (ПВ нормальной плазмы / ПВ пациента) ´ 100 %.

Протромбиновое отношение (ПО):

ПО = ПВ пациента / ПВ нормальной плазмы.

Показатель ПО, в отличие от аналогичного ему протромбинового индекса, имеет прямую логическую связь с изменениями ПВ плазмы пациента (удлинение ПВ влечет за собой увеличение ПО). Прием антикоагулянтов непрямого действия приводит к удлинению протромбинового времени, однако измеренная степень его удлинения существенно колеблется в зависимости от используемого тромбопластинового реагента. В связи с этим Комитетом по стандартизации в гематологии ВОЗ в 1983 году был принят стандартизованный показатель – международное нормализованное отношение (MHO), который рассчитывается при контроле лечения непрямыми антикоагулянтами (когда недопустимы колебания показателей протромбинового теста в зависимости от применяе­мых реагентов). МНО вычисляют исходя из протромбинового отношения и международного индекса чувствительности (МИЧ) используемого тромбопластина к нехватке факторов протромбинового комплекса:

МНО = ПОМИЧ.

МИЧ для каждой серии реагента обозначается на его упаковке и обычно составляет от 1,0 до 1,6 (более низкое значение предпочтительнее).

Референтные пределы: ПВ = 10–20 с (зависит от типа реагента и условий определения). Процент протромбина по Квику = 60–130 % (зависит от препарата тромбопластина); некоторые производители указывают только нижнюю границу нормы (например, «более 70%»), подчеркивая тем самым, что укорочение ПВ и повышение процента протромбина клинического значения не имеют.

ПО = 0,85–1,2.

Обеспечение и контроль качества. В тесте Квика калибровочный график должен строиться для каждой новой серии исследований (на одни сутки) и каждой новой серии тромбопластинового реагента. Для оценки воспроизводимости и сходимости могут использоваться свежеразведенная лиофилизированная нормальная пулированная плазма (РНП-плазма), срок их годности – 2-4 ч после разведения лиофилизированного препарата.

Клиническое применение результатов исследования. Опреде­ление ПВ используется для контроля лече­ния антикоагулянтами непрямого действия, для выявления изменений количества и активности факторов протромбинового комплекса (VII, X, V и II) и для оценки белково-синтетической функции печени. Значительное возрастание ПВ (МНО) часто связано с риском кровотечений.

 

Таблица ХХ

Интерпретация результатов тестов АЧТВ и ПВ при кровоточивости у пациента
(Liu MC, Kessler CM, 2002).

АЧТВ ПВ (ПО, МНО) Наиболее часто встречающаяся патология
врожденная Приобретенная
Удлинение Норма Дефицит ф.VIII, IX или XI Ингибитор ф.VIII
Норма Удлинение Дефицит ф. VII Патология печени (дефицит ф.V и ф.VII) Гиповитаминоз K (дефицит только ф.VII)
Удлинение Удлинение Дефицит фибриногена (<1 г/л) Дефицит протромбина, ф.V, ф.X ДВС крови Патология печени Приобретенная недостаточность факторов (амилоидоз) Волчаночный антикоагулянт (кровоточивости нет)
Норма Норма Умеренная недостаточность факторов Болезнь Виллебранда (умеренной степени) Недостаточность ф.XIII Тромбоцитопения Качественные нарушения тромбоцитов Приобретенная болезнь Виллебранда

 

4. Наименование исследования. Тромбиновое время (ТВ).

Роль аналита в физиологических процессах. Под воздействием тромбина от фибриногена отщепляются фибринопептиды А и В, и активированные молекулы фибриногена (мономеры) быстро полимеризуются, образуя сгусток фибрина.

Характеристика теста. Определяется время образования фибринового сгустка при добавлении стандартного раствора тромбина к исследуемой цитратной плазме при 37 °C.

Аналитические технологии, методика исследования. К исследуемой бедной тромбоцитами плазме при 37 °C добавляют раствор тромбина и определяют время образования фибринового сгустка (автоматически - на коагулометре, или вручную – путем покачивания пробирки в водяной бане). Параллельно тестируют нормальную плазму.

Референтные пределы: 14–17 с (зависит от активности тромбина).

Обеспечение и контроль качества. Для контроля качества используется РНП-плазма.

Клиническое применение результатов исследования. Опреде­ление ТВ – один из базовых методов исследования коагуляционных параметров плазмы. Тест проводится для выявления нарушений на этапе превращения фибриногена в фиб­рин, зависящем в основном от количества фибриногена и ингибиторов фибринообразования - гепа­рина, ПДФ и др. Значительное удлинение ТВ свидетельствует о риске развития кровотечений.

6. Наименование исследования. Фибриноген (концентрация).

Роль аналита в физиологических процессах. Фибриноген – основа для образования фибриновых сгустков – синтезируется в печени и постоянно присутствует в плазме. От его молекул под действием тромбина отщепляются фибринопептиды и образуются фибрин-мономеры, которые затем самопроизвольно полимеризуются и перекрестно «сшиваются». Сформированный фибриновый сгусток изолирует поврежденное место сосудистой стенки или чужеродные частицы.

Характеристика теста. Хронометрический метод (по A.Clauss, 1957) предполагает определение времени образования фибринового сгустка при добавлении избытка высокоактивного тромбина к разведенной в 10 раз плазме (для снижения влияния антитромбиновых компонентов) при 37 °С. В этих условиях время реакции зависит в основном от концентрации фибриногена, которая определяется по калибровочному графику.

 

 

Референтные пределы. При определении хронометрическим методом 1,8–4,0 г/л (у новорожденных – 1,2–3,0 г/л).

Интерпретация результатов. Фибриноген синтезируется в печени и относится к группе белков острой фазы. Повышение его концентрации в плазме и в цельной крови возможно при любой острофазовой реакции (воспаление, инфекции, ожоги, травмы, послеоперационный период, острый инфаркт миокарда), а также при болезнях почек, системных заболеваниях соединительной ткани, злокачественных новообразованиях и др. У здоровых женщин уровень фибриногена возрастает при беременности, при введении эстрогенных препаратов и во время месячных.

Основные причины снижения содержания фибриногена – гиперпотребление при образовании большого количества микросгустков (ДВС, травмы, ожоги, шок, тяжелый токсикоз), распад в результате действия фибринолитических препаратов (стрептокиназы и т.п.), или нарушение синтеза при тяжелой патологии печени (цирроз, острая дистрофия), а также значительная гемодилюция. Необходимо учитывать, что тяжелые гнойно-воспалительные процессы, приводящие к развитию синдрома ДВС, могут способствовать повышению уровня фибриногена как острофазного белка, и тем самым маскировать его усиленное потребление.

7. Наименование исследования. Фактор V (активность / количество).

Роль аналита в физиологических процессах. Плазменный ф.V (проакцелерин) синтезируется в печени и в неактивном виде циркулирует в крови, а также содержится в тромбоцитах. После протеолитической активации ф.Vа выступает в качестве основного кофактора ф.Xа, повышая его активность на несколько порядков.

Количественное определение проводится ИФА-методом с использованием моноклональных антител к тяжелой цепи ф.V и конъюгата пероксидазы с поликлональными антителами к ф.V. Метод дает представление о количестве, но не о реактивности фактора.

Референтные пределы. 50–150 % от уровня нормальной пулированной плазмы.

Клиническое применение результатов исследования. Исследование проводится для дифференциации причин удлинения ПВ на фоне нормального АЧТВ. Минимальный гемостатический уровень активности фактора V в крови составляет 5-15 %, для выполнения операций – 25 %.

8. Наименование исследования. Антитромбин (активность/количество антитромбина III).

АТ – основной естественный ингибитор свертывания крови, первичный антикоагулянт. В присутствии гепарина АТ связывает и инактивирует тромбин и большинство других активных плазменных факторов – сериновых протеаз (ф.Ха, ф.IXa, ф.XIa, ф.XIIa,плазмин и др.), предотвращая неконтролируемую коагуляцию.

Характеристика теста. Активность АТ в исследуемой плазме определяют по его способности инактивировать вносимый извне тромбин.

Возможно количественное определение количества антитромбина (антигена) иммунохимическими методами – ИФА, ИХЛ и др.

Референтные пределы. 70–130 % от уровня нормальной плазмы.

Клиническое применение результатов исследования. Контроль актив­ности антикоагулянтной системы плазмы в целом и АТ в частности необходим при тромбозах, тромбофилических состояниях, ДВС крови и ряде лекарственных воздействий. При выраженном снижении уровня AT значительно увеличивается риск развития тромбозов; срочная коррекция этого состояния осуществляется путем инфузии препаратов АТ или свежезамороженной плазмы.

9. Наименование исследования. Протеин C (PC, активность / количество).

Протеин C – важнейший ферментный фактор антикоагулянтной системы. Он синтезируется печенью (зависимо от витамина К) и постоянно циркулирует в крови в неактивном виде. После активации комплексом тромбин-тромбомодулин на поверхности неповрежденных эндотелиальных клеток и тромбоцитов PC в присутствии своего кофактора – протеина S – частично разрушает неферментные плазменные факторы Vа и VIIIа, тем самым сдерживая активность коагуляционных процессов.

Характеристика теста. Протеин C (PC), содержащийся в исследуемой плазме, переходит в активное состояние после добавления специфического неферментного активатора из змеиного яда.

Возможно количественное определение антигена протеина C иммунохимическими методами – твердофазным ИФА (ELISA), иммунохемилюминесцентным и др.

Референтные пределы. 70-140 % от уровня нормальной плазмы.

Клиническое применение результатов исследования. Мониторинг активности PC следует проводить при рекуррентных тромбозах, тромбоэмболиях, ДВС крови. Врожденная недостаточность PC является тромбофилическим состоянием и требует профилактических мер для предупреждения тромбозов. Снижение активности протеина С до 50 % от нормы и ниже на фоне терапии антикоагулянтами непрямого действия может приводить к развитию кожных некрозов (варфариновые некрозы), которые встречаются нечасто, но протекают тяжело. В связи с этим использование непрямых антикоагулянтов у пациентов с дефицитом PC должно проводиться с особой осторожностью под контролем активности протеина С; при необходимости – с восполнением его дефицита свежезамороженной плазмой или препаратом рекомбинантного PC.

10. Наименование исследования. Протеин S (количество / активность).

Протеин S – витамин К-зависимый неферментный кофактор протеина C – синтезируется в печени и циркулирует в кровотоке. Около 60% ПрS в плазме связано с C4b-переносящим белком, около 40% составляет свободная активная форма. При отсутствии или недостаточной концентрации ПрS активность протеина С существенно снижается, что ведет к нарушению функции антикоагулянтного звена.

Иммунохимическими методами (ELISA, RIA) определяется количество протеина S, но не его функциональная активность. Прямое определение общего ПрS (свободного + связанного) основано на использовании поликлональных антител, свободного ПрS – моноклональных антител, высокоспецифичных к эпитопам свободной формы аналита.

Референтные пределы. Общий протеин S – 65-140 % от уровня РНП-плазмы, или 0,67-1,25 ЕД/мл; свободный протеин S – 57-120 %, или 0,23-0,49 ЕД/мл.

Интерференции. На результаты ИФА-теста влияет липемия сыворотки / плазмы и присутствие ревматоидного фактора. Снижение уровня ПрS может быть связано с приемом пероральных контрацептивов.

Клиническое применение результатов исследования. Выявление снижения содержания / активности протеина S важно для выявления причин тромбофилии с эпизодами венозных тромбозов и тромбоэмболии как в молодом, так и в зрелом возрасте. Наличие дефицита протеина S может влиять на тактику ведения больных с тромбозами и использования гормональных препаратов у женщин.

11. Наименование исследования. ХПа-калликреин-зависимый фибринолиз (ХПа-зависимый лизис эуглобулинов).

Роль аналита в физиологических процессах. Активация фибринолиза протекает одновременно с запуском внутреннего пути гемостаза, поскольку инициируется одними и теми же факторами - ф.XII и компонентами калликреин-кининовой системы; фактор XII даже более значим для фибринолиза, чем для гемостатических функций. Образующийся активный плазмин постепенно разрушает фибриновые сгустки и способствует восстановлению кровотока в сосуде.

Характеристика теста. Из цитратной бедной тромбоцитами плазмы в слабокислой среде после добавления каолина выделяют эуглобулиновую фракцию, содержащую фибриноген, плазминоген и активированные факторы внутреннего пути свертывания (в т.ч. ф.XII, калликреин и плазмин). После отделения эуглобулинов, их растворения в буфере и рекальцификации образуется фибриновый сгусток, который растворяется плазмином (определяют время лизиса сгустка).

Референтные пределы. ХПа-зависимый лизис эуглобулинов – 4-12 мин

Интерференции. На результаты исследования существенно влияют концентрация фибриногена в исследуемой плазме, введение лекарственных препаратов, стимулирующих протеолитические процессы (фибринолитики), а также ингибиторов протеолиза (контрикал, трасилол и др.).

Обеспечение и контроль качества. Четкая процедура контроля в настоящее время не определена.

Клиническое применение результатов исследования. Исследование лизиса эуглобулинов проводят для оценки состояния системы фибринолиза у пациентов.

21. Наименование исследования. Плазминоген (количество /максимальная активность).

Роль аналита в физиологических процессах. Плазминоген – главный компонент фибринолитической системы – синтезируется в печени и почках и постоянно находится в крови. Образующийся из плазминогена под действием активаторов плазмин постепенно разрушает фибриновые сгустки и способствует восстановлению кровотока.

Характеристика теста. После максимальной активации стрептокиназой плазминогена в исследуемой плазме определяется скорость расщепления пептидного хромогенного субстрата (по нарастанию окраски реакционной среды, метод фиксированного времени). Количество образующегося при этом окрашенного вещества прямо пропорционально количеству активности плазминогена. Для определения количества плазминогена может использоваться и метод ИФА.

Референтные пределы. при определении ИФА-методом – около 200 мкг/мл.

Клиническое применение результатов исследования. Тест используется для оценки состояния фибринолиза и резерва плазминогена у пациентов.

12. Наименование исследования. D-димер.

Роль аналита в физиологических процессах. D-димер – продукт распада фибринового сгустка – представляет собой молекулярные фрагменты поперечно сшитого фибрина, образующиеся при его протеолитической деградации активным плазмином.В структуре D-димера имеются D-D-связи («поперечные сшивки»), которые отсутствуют в фибриногене, фибрин-мономере и рыхлом фибрин-полимере, образуются в результате действия ф.XIIIa, уплотняют фибриновый сгусток и не разрушаются плазмином. В целом для анализа D-димера предпочтительны количественные методы, позволяющие вести временной мониторинг аналита.

Референтные пределы. В количественных тестах – 110–300 нг/мл, или <0,5 мг/л; в качественных тестах D-димер у здоровых людей не выявляется.

Клиническое применение результатов исследования. В целом D-димер - один из наиболее надежных ранних маркеров тромбообразования и фибринолиза (распада фибрина, но не фибриногена) in vivo. Основная цель исследования D-димера – исключение наличия тромбов в сосудистом русле (при дифференциальной диагностике тромбоза глубоких вен нижних конечностей, тромбоэмболии легочной артерии и др.). Он может применяться как тест первой линии, то есть у всех больных с подозрением на венозный тромбоэмболизм. Кроме того, тест может использоваться в диагностике ДВС и при определении эффективности антитромботической терапии.

13. Наименование исследования. РФМК-тест (растворимые фибрин-мономерные комплексы, орто -фенантролиновая проба).

Роль аналита в физиологических процессах. Образование фибрин-мономеров (ФМ) – начальная реакция формирования сгустка; количество ФМ зависит от степени тромбинемии. В процессе физиологической активации фибринолиза продукты деградации фибрина и фибриногена образуют комплексы с фибрин-мономерами – РФМК.

Характеристика теста. Метод основан на регистрации времени появления хлопьев или зерен паракоагулята при добавлении к исследуемой бедной тромбоцитами плазме раствора о -фенантролина; при этом скорость образования хлопьев зависит от концентрации РФМК.

Референтные пределы. Хлопья не должны образовываться в первые 70-120 с наблюдения (отрицательный результат пробы, концентрация РФМК < 35-40 мг/л).

Клиническое применение результатов исследования. РФМК-тест позволяет судить об активности свертывания крови, а динамическая оценка уровня РФМК – о развитии процесса и эффективности терапевтических мероприятий. Применение тестов этой группы нецелесообразно при доступности более современных и стандартизованных методик оценки активации свертывания и фибринолиза (D-димер, фрагменты протромбина, комплекс тромбин-антитромбин, фибринопептид А, продукты деградации фибрина и фибриногена и т.д.).

14. Наименование исследования. Волчаночный антикоагулянт (ВА).

Роль аналита в физиологических процессах. Волчаночный антикоагулянт представляет собой гетерогенную группу антител против отрицательно заряженных анионных фосфолипидов и их комплексов со специфическими белками. Антикоагулянты волчаночного типа связываются с фосфолипидными мембранами и «экранируют» их; при этом тормозится активация коагуляционных ферментных комплексов и замедляется свертывание крови in vitro.

 

Таблица ХХ

<== предыдущая лекция | следующая лекция ==>
Методы исследования коагуляционного гемостаза | Сущность и функции налогов
Поделиться с друзьями:


Дата добавления: 2014-01-03; Просмотров: 1631; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы!


Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет



studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав! Последнее добавление




Генерация страницы за: 0.053 сек.