СИСТЕМА АВо

ПЕРЕЛИВАНИЕ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ

В 1990 году австрийский ученый К. Ландштейнер впервые выявил наличие белковых соединений на эритроцитах, названых им «изогемагглютиногенами» и белковых веществ в плазме - «изогемагглютининов». Мы оговариваем условие более простого названия: на эритроцитах - антиген, в плазме - антитело. Т.к. при контакте сходных по структуре антигенов и антител происходит реакция агглютинации, связывания эритроцитов, названная К. Ландштейнером «изогемагглютинацией». Это научное открытие определило развитие гемотрансфузиологии и К. Ландштейнер был удостоен Нобелевской премии в 1930 году за изучение групповой принадлежности крови. Самим К. Ландштейнером, его соратниками и учениками (Ф.Левиным, А.Винером), а также другими учеными было выявлено большое количество форм антигенов. По своим свойствам они объединены в системы групповой принадлежности крови. Разработка этой тематики продолжается, до сих пор не изучена полностью, т.к. выявлены не только эритроцитарные системы крови, но и лейкоцитарные и тромбоцитарные системы. Мы их разбирать не будем, т.к. это крайне сложный вопрос будущего и еще не изученный. Предлагаем освоить практическое значение эритроцитарных систем крови.

В настоящее время открыто и изучено 14 эритроцитарных систем крови (и это не предел): АВо, резус, Mm, Nn, Pp, Ss, Кел-Челлано, Даффи, Кидд, Льюис, Лютеран, Диего и другие. Практически, на земном шаре, по теории вероятности, нет ни одного человека с одинаковой совместимостью крови, т.е. проводя гемотрансфузию мы во всех случаях переливаем разногруппную и несовместимую кровь. Это вызывает огромное количество осложнений, которое увеличивается с каждым годом на 4-7 процентов. В 1986 году в Москве состоялся Всесоюзный симпозиум с участием специалистов западных стран «Актуальные вопросы патогенеза и лечения острой кровопотери», на которой большинство практикующих врачей и ученых четко высказало мнение: «В настоящее время, переливание крови несет больше вреда, чем пользы. Применение цельной крови потеряло свою актуальность и оправдано при явной гемической недостаточности (т.е. при грубом нарушении основной функции крови - перенос кислорода и обеспечение газообмена в тканях). В связи с этим, показания к переливанию цельной крови и эритромассы резко ограничены. Единственным показанием является острая или хроническая анемия со снижением гемоглобина до 80 г/л (в западных странах показания еще жестче - снижение гемоглобина до 60 г/л).

Система АВо является единственной врожденной, т.к. антитела формируются в перинатальном (внутриутробном) периоде развития плода. Другие системы образуют антитела в процессе жизнедеятельности при переливании несовместимой крови или при несовместимости крови матери и плода (конфликт), поэтому они называются приобретенными. Система АВо включает в себя наличие на эритроцитах антигенов «А» и «В», а в плазме крови антител альфа и бета. Антиген «А» связывается антителом альфа, а «В» антителом бета. Чтобы не было их одновременного присутствия в крови, можно предположить только 4 комбинации, что и определяет групповую принадлежность крови по системе АВо.

1) Отсутствие на эритроцитах антигенов, но наличие в плазме антител альфа и бета - это первая группа крови, по международной классификации обозначается знаком О(1), паспорта на флаконах маркируются белой полосой, нанесенной по диагонали. Изогемагглютинирующие сыворотки не окрашиваются. У людей эта группа наиболее распространенная.

2) На эритроцитах имеется антиген «А», а в плазме антитело бета - это вторая группа крови, по международной классификации обозначается знаком А(11), паспорт на флаконе маркируется синей полосой, сыворотки окрашиваются в синий цвет.

3) На эритроцитах имеется антиген «В»,а в плазме антитело альфа - это третья группа крови, которая обозначается знаком В(111), паспорт на флаконе маркируется красным цветом и сыворотка окрашивается в красный цвет.

4) На эритроцитах имеются оба антигена «А» и «В», а в плазме антител нет - это четвертая группа крови, которая обозначается знаком АВ(1У), паспорт маркируется желтой полосой, сыворотка не окрашивается.

Определение групповой принадлежности крови проводится двумя методиками. Все оборудование для определения группы крови должно быть сухим и чистым. Для реакции с помощью изогемагглютинирующих сывороток необходимы: маркированные по группам крови специальная эмалированная или фарфоровая тарелка, 4 стеклянные палочки, флакон с физраствором, 8 пипеток - одна для физраствора и 7 для изогемагглютинирующих сывороток, обязательно маркированных по группам крови на резиновой части, чтобы при многократном использовании не перепутать, т.к. реакции будут неверными. Для определения группы с помощью реагентов «ЦОЛИКЛОН» необходима тарелка (фарфоровая, эмалированная, стеклянная), две маркированные пипетки, две стеклянные палочки. Методика определения групповой принадлежности крови с помощью изогемагглютинирующих сывороток заключается в следующем. Готовятся и проверяются на годность сыворотки. Они должны быть двух разных серий для первых трех групп крови и одной серии для четвертой группы крови (она должна быть обязательно!). Сыворотки должны быть плотно укупорены, иметь разные серии, соответствовать сроку годности, соответствовать цветной маркировке по окраске раствора, быть прозрачными или слегка опалесцирующими, не содержать мути, осколков стекла и других инородных предметов. Если сыворотки не удовлетворяют этим условиям, они непригодны к применению. Если они пригодны, флаконы вскрывают, вводят маркированные пипетки. Сыворотки должны храниться в холодильнике при + 4 градусах. При замораживании годность их сохраняется, но при условии размораживания при комнатной температуре. Срок годности 4 месяца со дня заготовки. По большой капле сыворотки наносятся на тарелку в соответствии с группой, разными концами стеклянных палочек в них вносят исследуемую кровь, перемешивают и выдерживают до третьей минуты. Через 3 минуты в каждую реакцию вносят по капле физраствора, перемешивают покачиванием тарелки и оставляют до пяти минут. РЕЗУЛЬТАТ ДЕЙСТВИТЕЛЕН ТОЛЬКО ЧЕРЕЗ 5 МИНУТ! Оценку начинают производить с реакции четвертой группы - в ней никогда не должно быть агглютинации (если она есть - это указывает или на непригодность сывороток и оборудования, или на наличие пан агглютинации, или псевдоагглютинации, что требует полной смены всего оборудования и перехода в помещение с температурой воздуха от 18 до 24 градусов). Если агглютинации в реакции с четвертой группой нет, оценивают результат по агглютинации в реакциях первых трех групп крови. Принадлежность к первой группе определяется полным отсутствием агглютинации во всех реакциях. При наличии агглютинации в О(1) и В(111) сериях результат оценивается как принадлежность крови к А(11) группе. При агглютинации в О(1) и А(11) сериях и отсутствии в В(111), принадлежность крови относится к третьей группе. Для группы АВ(1У) характерно наличие агглютинации во всех сериях, кроме четвертой группы. Реакция довольно сложная и дает ошибки в определении групповой принадлежности. Особенно часто при получении результата А(11), т.к. антиген «А-2» часто дает замедленную до 10 минут реакцию агглютинации.

Методика определения групповой принадлежности крови с помощью реагентов «ЦОЛИКЛОН» проще и точнее, т.к. это высококонцентрированные и очищенные от белковых примесей антитела альфа и бета. Они поступают в виде сухого порошка или раствора двух цветов: «ЦОЛИКЛОН» анти-А, определяющий наличие в исследуемой крови антигена «А», окрашен в красный цвет, «ЦОЛИКЛОН» анти-В, определяющий в крови наличие антигена «В» окрашен в синий цвет. На тарелку наносят по капле реагентов анти-А и анти-В (только маркированными пипетками!), вносят в реактивы разными стеклянными палочками исследуемую кровь, перемешивают. Результат оценивают через 3 минуты. Группа крови О(1) определяется отсутствием агглютинации в обеих реакциях, т.к. в исследуемой крови нет антигенов «А» и «В». При наличии агглютинации в реагенте анти-А и отсутствии в реагенте анти-В принадлежность крови - А(11), т.к. на эритроцитах этой группы имеются антигены «А». Наоборот, агглютинация в капле реактива анти-В и при отсутствии в реактиве анти-А, указывает на наличие в исследуемой крови антигена «В»,что определяет ее принадлежность к В(111) группе. Если реакция имеется в обеих каплях реагента - это АВ(1У) группа.

3.1.2. СИСТЕМА «РЕЗУС»

Система «резус», как и другие приобретенные системы, может формировать только 2 группы крови. При наличии антигенов на эритроцитах - положительная, при отсутствии их отрицательная. Особенностью всех приобретенных систем является то, что при наличии антигена блокируется выработка антител, при отсутствии антигена происходит их производство в случаях переливания несовместимой крови или при наличии конфликта крови «мать-ребенок». Система «резус» по выработке антител является самой активной, но в последнее десятилетие отмечается активизация и других приобретенных систем крови. Поэтому, во всех странах перешли на шестисистемное определение групповой принадлежности крови. Но сыворотки для определения групповой принадлежности крови по приобретенным системам крайне дороги (кроме «резус»), поэтому в Российской Федерации из-за экономических трудностей переход определения принадлежности крови по многосистемной схеме пока задерживается.

Чтобы понять сущность этих систем разберем ситуации «резус конфликта» матери и ребенка. Могут возникнуть два вида.

1) Мать - с резус-положительной, а ребенок - резус -отрицательный принадлежностью крови. При ее смешивании через плацентарный барьер у матери не формируются резус- антитела, т.к. их выработка блокирована. Но у ребенка накапливается большое их количество и он рождается с гемолтической болезнью новорожденного: желтушный, нежизнеспособный, с тяжелой гепаторенальной недостаточностью. Таким детям немедленно начинают проводить обменное переливание крови от отца, т.к. группа крови наследуется по рецессивному типу и параллельным аллелям.

2) У матери резус-отрицательная кровь, а у ребенка резус-положительная. В этой ситуации у ребенка не формируются антитела, но у матери их накапливается большое количество. В результате происходят преждевременные роды, ранние выкидыш или она вообще не беременеет. Мы разобрали только резус конфликт, но и другие системы, по мере активизации выработки антител, формируют такие же конфликты, что, видимо, и определяет бесплодность почти 30 % семейных пар.

Определение групповой принадлежности крови по системе «резус» проводится при комнатной температуре с помощью универсального реагента антирезус (До), в конической пробирке. Это плазма с высоким титром резус антител, которая при наличии антигена дает реакцию агглютинации. Другие методики определения резус принадлежности крови используются только специалистами станций переливания крови. Методика заключается в следующем. На стенку пробирки наносят каплю реагента и каплю исследуемой крови. Вращая пробирку в горизонтальном положении смешивают реагенты (реакция в этих случаях протекает ярче). Оставляют пробирку на 3 минуты, после чего шприцом по стенке вливают 4 мл физраствора и перемешивают переворачиванием пробирки 2-3 раза. Результат определяется осмотром раствора. Признаками резус-положительной крови являются проявления агглютинации: наличие явных хлопьев, мути, осадка на дне пробирке. Резус-отрицательная кровь гемолизируется с образованием прозрачного, розового, с перламутровым отливом, раствора.

Групповая принадлежность крови по другим приобретенным системам производится по такой же методике, только в микропробирках.

Единой международной номенклатуры обозначения резуспринадлежности крови нет. Применяется номенклатура Винера (1940 г) с обозначением первых шести видов резусантигенов символами: Rho, rh', rh», Hro, hr', hr». Номенклатура Фишера Рейса предполагает обозначение антигенов резус буквами: D, C, E, d, c, e. Но в клинической практике наиболее широкое применение нашла номенклатура Р. Роузенфилда, т.к. система «резус» у человека сложнее, чем у животных и насчитывает 35 видов резус антигенов, поэтому им предложено резус принадлежность крови обозначать значком «Rh» и полным написанием «положительная» или «отрицательная» обозначать принадлежность крови. Определение же вида антигена в клинической практике, как правило, не применяется, при необходимости, вид проставляется цифрой.

Дата добавления: 2014-01-03