Определение активности лизоцима в слюне

Методические указания

Метод основан на способности лизоцима слюны расщеплять полисахариды клеточной оболочки бактерий рода Micrococcus. Активность фермента определяют по изменению мутности суспензии микроорганизма.

Ход работы.

1. Подписать пробирки (1:100, 1:200 и т.д.).

2. Приготовить разведения слюны. Для этого сначала во все пробирки разлить по 1 мл физраствора. Затем в 1 пробирку (разведение 1:100) добавить 1 мл слюны, пробирку встряхнуть для перемешивания жидкости. Из 1 пробирки перенести 1 мл жидкости перенести во 2-ую пробирку (разведение 1:200), встряхнуть. Такие же манипуляции провести с остальными пробирками. Из последней 5-ой (разведение 1:1600) – 1 мл жидкости удалить для получения одинакового объема. В контрольную (6-ую пробирку) слюну не добавлять.

3. Приготовить суспензию микрококка. Для этого взять 7-8 мл физраствора и стерильной петлей внести культуру микроорганизма.

4. Во все пробирки (6 шт.) добавить по 1 мл суспензии микрококка.

5. Пробы инкубировать в термостате 30 минут при 37°С.

6. Учесть результаты: сравнить мутность исследуемых пробирок с контрольной и отметить «+» - рост микроорганизмов, «-» - отсутствие роста микроорганизма.

Контрольные вопросы

1. Какие механизмы противомикробной защиты выделяют в зависимости от специфичности?

2. Что такое неспецифическая и иммунологическая резистентность?

3. Какие факторы неспецифической защиты действуют в полости рта?

4. Какие факторы специфической резистентности действуют в полости рта?

5. Какими структурами в ротовой полости представлена иммунная система?

6. Перечислите гуморальные и клеточные факторы резистентности, действующие в слюне?

7. Концентрация какого иммуноглобулина в полости рта наибольшая?

8. Перечислите специфические и неспецифические клеточные факторы резистентности полости рта.

9. Как проявляются реакции гиперчувсвительности в полости рта?

Список литературы

Обязательная:

1. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2001. – 736 с.

2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов. – СПб.: СпецЛит, 2002. – 591 с.

3. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / Под ред. В.И. Покровского. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. – 768 с.

Дополнительная:

1. Ахременко Я.А. Микробиология полости рта: Учебное пособие для студентов стоматологических факультетов. – Якутск: Изд-во Якутского госуниверситета, 2008. – 107 с.

2. Зеленова Е.Г., Заславская М.И., Салина Е.В., Рассанов СП. Микрофлора полости рта: норма и патология: Учебное пособие. Нижний Новгород: Издательство НГМА, 2004. - 158с.

3. Микробиология, вирусология и иммунология: учеб. для студентов мед. вузов / под ред. В. Н. Царёва. — М.: Практическая медицина, 2009. — 581 с.: ил.

4. Практикум лабораторных работ с иллюстрированными ситуационными заданиями по микробиологии, иммунологии и вирусологии / под ред. А.А. Воробьева, В.Н. Царева. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2008. – 320 с.: ил.

Дата добавления: 2017-01-14