Тыс./мкл

Лимфоциты	Подгруппа животных	Неревакциниро-ванные	Ревакцинированные БЦЖ
		М±т	М±т
Т-лимфоциты (базис)	I II Р	0,42 ± 0,03 1,24 ±0,20 0,001	0,41 ± 0,04 1,19±0,14 0,001
В-лимфоциты	I II Р	1,39 ±0,29 2,46 ±1,25 0,08	0,57 ± 0,24 1,75 ±0,50 0,05
Т-киллеры	I II Р	1,48 ±0,38 2,25 ±0,31 0,15	0,62 ±0,25 1,73 ±0,53 0,09
Антиген-реактивные	I II Р	0,20 ± 0,06 1,05 ±0,18 0,001	0,33 ±0,11 0,75 ±0,61 0,13
Нейтрофилы	I II Р	1,93 ±0,38 2,42 ±0,39 0,43	1,09 ±0,17 1,89 ±0,24 0,11

Дискретно-динамический анализ показателей иммунологических параметров у животных опытных групп позволил выявить, в боль­шинстве случаев с высокой степенью достоверности, положительные взаимосвязи.

На рис. 2 показаны различия значений Т-киллеров и В-лимфоцитов в группах с крайними значениями базисного параметра (Т-лимфоциты). Для стандартизации измерения рассматривали соотношение максимального значения варьируемого параметра и минимального (в процентах).

Рис. 2.Определение различия значений Т-киллеров и В-лимфоцитов (варьируемые параметры) в группах с минимальными (I) и максимальными (II)значениями Т-лимфоцитов (базисный параметр) у ревакцинированных БЦЖ животных. А - Т-киллеры: I. 0,62 ± 0,25 (100%); II. 1,73 ± 0,53 (279%), Р < 0,10; Б - В-лимфоциты: I. 0,57 ± 0,24 (100%); П. 1,75 ± 0,50 (307%), Р < 0,05.

Взаимосвязь иммунологических показателей по величине и на­правленности показана на рис. 3.

Величина каждого столбика соответствует разнице между уров­нями вариабельного параметра в группах с максимальными и мини­мальными значениями базисного параметра. В соответствии с величиной и направлением взаимосвязи сочетание параметров у ревакци­нированных БЦЖ животных (при базисе - Т-лимфоциты) расположи­ли в ранжированный ряд. У неревакцинированных животных - в той же последовательности.

а б

Е-рок ЕТ-рок ЕАС-рок Еа-рок Нейтр. Е-рок ЕТ-рок ЕАС-рок Еа-рок Нейтр.

Рис. 3.Иммунологический профиль у молодняка крупного рогатого скота, привитого в раннем возрасте БЦЖ, представленный в виде взаимосвязей параметров, выявленных дискретно-динамическим анализом (базис -Т-лимфоциты): а - неревакцинированный; б- ревакцинированный БЦЖ; по оси ординат - разность между значениями варьируемого параметра в подгруппах (% к минимальному значению)

Результаты исследований иммунной системы у животных опыт­ных групп с использованием дискретно-динамического анализа по­казали, что у телят, привитых БЦЖ в раннем возрасте, к 8-месячному возрасту еще сохраняется иммунитет. Ревакцинация животных БЦЖ через 8 месяцев не вызывает усиления противотуберкулезного иммунитета.

С целью автоматизации дискретно-динамического анализа, а также исключения субъективизма в нем, был разработан пакет программ для ПК, включающий разделение исследуемых животных на подгруппы с минимальным и максимальным значениями параметров с установкой стабильности границ базиса. После этого с помощью программы про­водилась статистическая обработка цифрового материала в подгруппах, отбор значимых сочетаний параметров по t-критерию Стьюдента и по­строение дифференциально-прогностических таблиц. Таблицы позво­ляют оценить участие отдельных иммунокомпетентных клеток в про­тивотуберкулезном иммунитете или пригодность тех или других мето­дов для определения клеточного иммунитета.

В табл. 7 представлено 19 значимых сочетаний параметров у неревакцинированных животных. Например, В-лимфоциты в качест­ве базисного параметра с высокой степенью достоверности осущест­вляет свою функцию с лейкоцитами, Т-лимфоцитами, Т-киллерами и антиген-реактивными лимфоцитами и в качестве вариабельного па­раметра взаимосвязаны с лейкоцитами, Т-лимфоцитами, Т-киллера­ми, антиген-реактивными лимфоцитами и нейтрофилами.

Таблица 7

Дифференциально-прогностическая таблица по оценке иммунитета у неревакцинированных телок, тыс./м*

№ п/п	Сочетание, вариабельный параметр (базис)	n	t-критерий по Стьюденту	Вариа- бель- ный	Базис
	Лейкоциты (В-лимфоциты)		5,66	≥ 11,72	≥ 2,30
	Лейкоциты (Т-лимфоциты)	5,21	≥ 12,00	≥ 0,92
	Антиген-реактивные лимфоциты (Т-лимфоциты)	5,18	≥ 1,18	≥ 0,92
	Лейкоциты (антиген-реактивные лимфоциты)	4,47	≥ 11,60	≥ 0,77
	Лейкоциты (Т-киллеры)	4,36	≥ 10,88	≥ 2,16
	В-лимфоциты (Т-киллеры)	3,97	≥ 2,79	≥ 2,16
	В-лимфоциты (лейкоциты)	3,88	≥ 2,01	≥ 10,5
	Т-лимфоциты (антиген-реактивные Лимфоциты)	3,75	≥ 1,37	≥ 0,77
	Т-киллеры (В-лимфоциты)	3,63	≥ 2,60	≥ 2,30
	Антиген-реактивные лимфоциты (лейкоциты)	3,55	≥ 1,04	≥ 10,5
	В-лимфоциты (Т-лимфоциты)		3,00	≥ 2,72	≥ 0, 92
	Антиген-реактивные лимфоциты (В-лимфоциты)	2,91	≥ 0,85	≥ 2,30
	Т-киллеры (лейкоциты)	2,87	≥ 2,52	≥ 10,5
	Т-лимфоциты (лейкоциты)	2,81	≥ 1,29	≥ 10,5
	Т-лимфоциты (В-лимфоциты)	2,43	≥ 1,16	≥ 2,30
	В-лимфоциты (нейтрофилы)	2,42	≥ 2,15	≥ 2,38
	Антиген-реактивные лимфоциты (Т-киллеры)	2,39	≥ 0,79	≥ 2,16
	В-лимфоциты (антиген-реактивные лимфоциты)	2,33	≥ 2,49	≥ 0,77
	Нейтрофилы (Т-киллеры)	2,28	≥ 2,85	≥ 2,16
Количество иммунных животных		40%

У животных, ревакцинированных БЦЖ (табл. 8), установлено 13 значимых сочетаний параметров, 10 из которых совпадают с соче­таниями у неревакцинированных. Установлено 3 вновь выявленных сочетания (Т-киллеры в качестве базисного параметра осуществляют с высокой степенью достоверности свою функцию с Т-лимфоцитами и в качестве вариабельного взаимосвязаны с Т-лимфоцитами и анти­ген-реактивными лимфоцитами).

Таблица 8

Дифференциально-прогностическая таблица по оценке иммунитета

№ п/п	Сочетание, вариабельный параметр (базис)	п	t-критерий, по Стьюденту	Вариа-бель- ный	Базис
	В-лимфоциты (Т-киллеры)		3,59	≤ 0,20	≤ 0,18
	Т-киллеры (В-лимфоциты)		3,22	≤ 0,14	≤ 0,20
	Антиген-реактивные лимфоциты (В-лимфоциты)		3,01	≤ 0,22	≤ 0,20
	В-лимфоциты (антиген-реактивные лимфоциты)		2,95	≤ 0,56	≤ 0,22
	Антиген-реактивные лимфоциты (Т-киллеры)		2,91	≤ 0,28	≤ 0,18
	В-лимфоциты (Т-лимфоциты)		2,73	≤ 0,54	≤ 0,53
	Антиген-реактивные лимфоциты (лейкоциты)		2,61	≤ 0,41	≤ 6,70
	Лейкоциты (В-лимфоциты)		2,59	≤ 5,67	≤ 0,20
	Т-киллеры (антиген-реактивные лимфоциты)		2,58	≤ 0,46	≤ 0,22
	Лейкоциты (антиген-реактивные лимфоциты)		2,58	≤ 5,92	≤ 0,22
	Т-лимфоциты (Т-киллеры)		2,57	≤ 0,60	≤ 0,18
	Т-киллеры (Т-лимфоциты)		2,35	≤ 0,55	≤ 0,53
	Т-лимфоциты (лейкоциты)		2,28	≤ 0,52	≤ 6,70
Количество иммунных животных		45%

В дальнейшем, используя значения базисного и вариабельного параметров табл. 7-8, оценивали каждого животного исследуе­мой группы по всем значимым сочетаниям параметров. Если показа­тели числа иммунокомпетентных клеток животного соответствуют хотя бы одному из сочетаний (базисному, вариабельному) таблицы, у такого животного признается высокая активность иммунокомпетент­ных клеток. В этом случае животное может противостоять естественному заражению туберкулезом в условиях неблагополучной фермы. Например, по табл. 8 (группа ревакцинированных БЦЖ животных) находят сочетание параметров: базис - Т-киллеры (ЕА-рок) - ≤ 0,18 и вариабельный - В-лимфоциты (ЕАС-рок) - ≤ 0,20. Далее по этому сочетанию находят животных из табл. 2 (таких животных четыре: № 301, № 134, № 130, № 66). Аналогичным способом проводят от­бор животных по всем сочетаниям параметров и определяют 9 жи­вотных (45%), способных противостоять заболеванию в условиях неблагополучной по туберкулезу крупного рогатого скота фермы.

Проводя подобный анализ неревакцинированных животных по дифференциально-прогностической таблице по оценке иммунитета, их было установлено 40% - с высокой активностью иммунокомпетентных клеток.

По результатам исследований можно заключить, что ревакцина­ция через 8 месяцев неэффективна. Защитные функции иммунной системы не были усилены, а у отдельных животных, ревакциниро­ванных БЦЖ, произошло снижение активности иммунных реакций, т. е. иммунитет, созданный первой вакцинацией, оставался еще дос­таточно напряженным и после повторного введения препаратов ревакцинаторного эффекта не произошло.

Дата добавления: 2015-07-13