Электрофореграмма результатов по определению генетической стабильности пыльцы с использованием специфических праймеров

На рисунках представлены результаты аллельспецифичной полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами для выявления генетической стабильности пыльцы сортов абрикоса Краснощекий и Шалах.

Рис. 2. Расположение образцов молекул ДНК в геле.

1 – 4 дорожки с праймером OPH-07 (1-Краснощекий/контрольный; 2- Краснощекий/крио; 3-Шалах/контрольный; 4-Шалах /крио);

5 дорожка – маркер -125, 150, 200, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 3000

6 – 9 дорожки с праймером OPF-08 (6-Краснощекий/контрольный; 7- Краснощекий/крио; 8-Шалах/контрольный; 9-Шалах /крио);

10 – 13 дорожки с праймером OPA-17 (10-Краснощекий/контрольный; 11- Красношекий/крио; 12-Шалах/контрольный; 13-Шалах /крио);

Рис.3. Расположение образцов молекул ДНК в геле.

1 – 4 дорожки с праймером OPA-19 (1-Краснощекий/контрольный; 2- Краснощекий/крио; 3-Шалах/контрольный; 4-Шалах /крио);

5 дорожка – маркер- 125, 150, 200, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 3000

6 – 9 дорожки с праймером OPА-20 (6-Краснощекий/контрольный; 7- Краснощекий/крио; 8-Шалах/контрольный; 9-Шалах /крио).

Анализ полученных данных указывает на достаточно высокую стабильность генетического материала, после воздействия сверхнизких температур (-196°С), сорта Краснощекий при использовании таких праймеров как OPА-17, OPА-19 и OPА-20, поскольку продукты их амплификации имеют соответствующие размеры, что и продукты амплификации генетического материала не подвергшийся сверхнизким температурам. При анализе данных продуктов амплификации ДНК пыльцы сорта Шалах, подвергшихся сверхнизким температурам (-196°С), наибольшую генетическую стабильность показали образцы с праймерами OPA-19 и OPA-20,

На основании проведенной работы можно сделать следующие выводы.

1. Был произведен сбор пыльцы с двух сортов абрикоса сорта Краснощекий и Шалах и их замораживание в жидком азоте (- 196°С) методом витрификации в течении двух суток. Затем пыльцу разморозили и опылили ими изолированные цветки абрикоса.

2. Далее пыльцы, подвергшаяся воздействию сверхнизких температур, была исследована на жизнеспособность в питательной среде. Проверка жизнеспособности показала, что пыльца сорта Краснощекий оказывается наиболее жизнеспособной в питательной среде с концентрацией 5%. Жизнеспособность при этом составляла 50%. Пыльца сорта Шалах наиболее жизнеспособной оказалась на среде с концентрацией 10%. Жизнеспособность в этом случае составляла 47,2%.

3. Проведенный молекулярно-генетический анализ, направленный на определение генетической стабильности пыльцы после криоконсервации показал, что изучаемые образцы пыльцы абрикоса сорта Краснощекий и Шалах сохраняют достаточно высокую генетическую стабильность.

Впервые в республике опробован метод прямого замораживания пыльцы абрикоса. После проверки жизнеспособности произведено опыление цветков пыльцой, полученной после криоконсервации. Полученные результаты позволяют рекомендовать метод для создания коллекции пыльцы сортов абрикоса, которые могут быть вовлечены в селекционный процесс.

Спасибо за внимание!!!

Дата добавления: 2015-07-13