Определение гонадотропгой активности гипофизов

Наиболее удачным тест-объектом для оценки гонадотропной активности рыб можно считать вьюна (ВЕ), различных видов лягушек (ЛЕ). В последнее время при тестировании гипофизов карповых, осетровых и судака используют самок ерша и окуня.

Представляет интерес метод Б.Ф. Гончарова, который заключается в следующем: в физиологический раствор (еще лучше раствор Рингера) с 0,1% раствором кристаллического альбумина помещают пробу икры, взятой у самок с помощью щупа. При добавлении определенного количества гипофиза у икринок растворяется ядро. Наименьшее количество гипофиза, вызвавшее растворение ядра, является показателем активности гипофиза. Раствор Рингера представляет собой смесь NaCl-6,5 г KCl-250 мг, CaCl-300 мг, и NaHCO –2 г на 1 л дистиллированной воды.

Гормональные препараты теплокровных животных и других веществ – заменители гипофизов рыб.

В связи с расширением масштабов рыбоводства все актуальнее становится задача обеспечения рыбоводов необходимым количеством нужных гипофизов рыб, которых заготавливать в современных условиях в больших количествах довольно сложно. Поэтому ведутся работы по замене таких гипофизов более доступными препаратами. Исследования, проведенные в конце 60-70-х годов XX века в лаборатории акклиматизации рыб ВНИИПРХ показали, что дефицитные сазаньи гипофизы, можно заменить:

1. гипофизами 3-х годовалых карпов, выращенных в южных районах, а также гипофизами 2-х летками, выращенными в садках, установленных в садках, установленных в водоемах-охладителях тепловых электростанций.

2. При воспроизводстве растительноядных рыб могут быть использованы гипофизы от крупных 2-х летков белого толстолобика массой 800 г и более с гонадами в II и III стадии зрелости (на стадии зрелости II-III активность гипофиза возрастает в 2-3 раза);

3. В лаборатории Н.Л. Гербильского был испытан хориальный гонадотропин – хориогонит (ХГ), который образуется в плаценте человека и некоторых обезьян и в больших количествах выделяется с мочой во время беременности. Этот гормон при его введении рыбам стимулирует секрецию эстрагенов яичника и овуляцию у самок, а у самцов – синтез андрогенов в семенниках.

В настоящее время ХГ получен в очищенном виде (представляет собой гликопротеид) и выпускается фармацевтической промышленностью, что облегчает его использование по сравнению с гипофизами рыб. Кроме того, активность хориогонина выражается в биологических единицах, поэтому при его использовании возможно точное дозирование (500 МЕХГ соответствует примерно 1 мг гипофиза сазана)

По реакции на введение хориогонина можно выделить рыб 3-х основных групп.

К первой группе относятся такие виды (судак, окунь вьюн), у которых введение ХГ вызывает созревание и овуляцию икры и вымет зрелой спермы. Опыты показали, что ХГ является надежной заменой ацетонированных гипофизов и вполне пригоден для перевода судака из IV в V стадию зрелости и получения от них зрелой икры. Эти результаты позволили рекомендовать применение ХГ в дозе 200-250МЕ при температуре 12-16 С для созревания ПК у судака. Замена ацетонированных гипофизов готовым фармакологическим препаратом значительно снижает трудоемкость работ при заводском воспроизводстве судака.

Ко второй группе по реакции ХГ относятся виды рыб, у которых его введение вызывает частичное созревание самок и которым необходимы повторные инъекции для получения овуляции. К этой группе относятся толстолобики. От самок белого и пестрого толстолобиков при введении от 1000 до 2500 МЕ на 1 кг массы путем 2-х инъекций (первоначальной и разрешающей) удается получить зрелые П.К, а затем личинок и мальков. Созревание самок при воздействии ХГ наступает на 4-6 часов позже, чем при обычной гипофизарной инъекции.

К третьей группе относятся рыбы, у которых применение хориогонина в различных вариантах гормонального воздействия не происходит созревания П,К. К этой группе относятся многие представители семейства карповых: сазан, лещ, рыбец, белый амур.

Отрицательные результаты получены на осетровых. В частности не удалось получить созревания П.К у русского осетра как при однократных инъекциях – от 3000-4500 до 6000 МЕ ХГ, а также при общих дозах от 8000 до 30000 МЕ вводимых многократно (7-9 раз).

Таким образом, полная замена хориогонином возможна у судака, белого и пестрого толстолобиков. Однако следует учитывать, что при применении ХГ наблюдаются имунные реакции особенно у «домашних» рыб, которые инъецируют многократно в течение нескольких лет (товарное рыбоводство).

Имеются положительные результаты, дающие возможность получать в искусственных условиях зрелые ПК у производителей угря при индуцировании полового созревания, начиная с ранних стадий развития гонад.

Применение гонадотропин – рилизинг гормонов (Г РГ) и их аналогов для стимуляции созревания ПК.

В последние годы интенсивно развивается направление связанное с применением гормонов и их синтетических аналогов, регулирующих синтез и секрецию ГТГ гипофиза.

Положительные результаты получены при использовании гипоталамического гормона – люлиберина (ЛГРГ) и его синтетических аналогов, стимулирующих выделение гипофизом гормона (лютеинизирующего), который вызывает секрецию эстрагенов яичника и овуляцию яйцеклеток у самок, а также стимулирует синтез андрогенов у самцов. Рассмотрим действие Г РГ на различные группы рыб.

Осетровые. Под воздействие люлибеоина получено созревание осетра, севрюги, стерляди. Созревание осетровых наступает в результате дробной инъекции суммарной дозой 10-40 мкг/кг для самок и 7-30 мкг/кг для самцов (мкг – микрограмм около 0,000001 г). Продолжительность созревания после введения в рыбу молиберина несколько больше, чем после инъекций препаратов гипофизов.

Выяснено, что осетровые рыбы обладают высокой чувствительностью к синтетическому аналогу люлиберина – ЛГРГ-А (сурфагону). Сравнение эффективности его действия с действие гипофизов осетровых рыб не выявило достаточных различий ни в проценте созревания самок после их инъецирования, ни в проценте оплодотворения, ни в качестве эмбрионов, предличинок и мальков. Получены положительные результаты при воздействии сурфагона на осетра, севрюгу, белугу, стерлядь. При применении синтетических аналогов гормонов Г РГ. Созревание в большинстве случаев наступает после однократного введения небольшой дозы препарата. Так, для севрюги оказалось достаточной дозировка 0,15-0,20; для белуги-0,6-1,1, а для стерляди значительно более высокие дозы – 100 мкг/кг.

Продолжительность созревания ПК при использовании синтетических аналогов люлиберина на 10-25% больше, чем у рыб, инъецированных препаратов гипофиза.

Карповые и другие виды с весенне-летним нерестом. Многие представители семейства карповых являются объектами рыбоводства. Для карповых основным способом получения зрелых ПК является метод гипофизарных инъекций (МГИ). Только в последнее время на карповых стали применять Г РГ и их синтетических аналогов.

Доказана высокая эффективность применения сурфагона (ЛГРТ-А) на лине. Наилучшие результаты (100% созревания самок) получены при однократном введении сравнительно высоких доз препарата – 100 мкг/кг.

У карпа долгое время не удавалось эффективно стимулировать созревание половых продуктов гонадотропин-рилизинг гормонами. Лишь при использовании комбинированных воздействий аналогов Г РГ и веществ, действующих на синтез котелхоламинов (гормонов хромаффинной системы)- например, пимозида-ПИМ, были получены стабильные положительные результаты и на самках карпа.

Дата добавления: 2015-08-31