Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот

Лабораторная работа №11

Биохимия нуклеиновых кислот

Указания к оформлению лабораторной работы

Ход работы

Исследуемый материал и реактивы

1 Слюны в разведении 1:5. 2. Раствор крахмала (1%). 3. Раствор йода. 4.Вода. 5. Раствор NаС1 (1%). 6. Раствор СuSО₄ (1%).

В три пробирки налить по 1 мл разведенной слюны. В первую пробирку налить 2 капли воды, во вторую - 2 капли 1% NаС1, в третью - 1% СuSО₄. Во все пробирки добавить по 5 капель 1% крахмала и оставить стоять при комнатной температуре 2 минуты. Далее во все пробирки добавить по 1 капле раствора КJ и по 2 мл воды, перемешать и отметить наличие или отсутствие синей окраски.

В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, зарисуйте полученные результаты (окраска растворов) и сделайте выводы – какое вещество является активатором, а какое ингибитором для α-амилазы слюны.

Контрольные вопросы

1. Какие вещества называют активаторами и ингибиторами?

2. Какое вещество активирует, а какое тормозит реакцию гидролиза крахмала под Действием α-амилазы слюны?

Нуклеиновые кислоты – ДНК и РНК – представляют собой линейные биологические полимеры, построенные из мононуклеотидов, соединенных 3΄5΄-фосфодиэфирными связями. Последние состоят из гидрофобных циклических структур - азотистых оснований (пуриновых и пиримидиновых), гидрофильной части, представленной пентозами (рибозой или дезоксирибозой) и остатками фосфорной кислоты. Остатки фосфорной кислоты соединяют два смежных мононуклеотида при помощи 3΄5΄-фосфодиэфирной связи.

Нуклеиновые кислоты находятся в клетке в составе нуклеопротеинов.

Биологическая роль нуклеиновых кислот огромна. Они принимают участие в передаче наследственной информации и в биосинтезе белка, являясь структурными элементами ядра и цитоплазмы.

Нуклеиновые кислоты являются небелковой частью нуклеопротеинов. Нуклеопротеины – это сложные белки, белковой частью которых являются в основном протамины или гистоны, которые обладают щелочными свойствами, за счет большого количества входящих в них диаминокарбоновых кислот (аргинин, лизин и гистидин).

Нуклеопротеины могут быть легко выделены из тканей, содержащих большое количество ядер, например из зобной, панкреатической железы, селезенки, печени, почек и др. Особенно богаты нуклеопротеинами дрожжи, бактерии, простейшие, грибы, одноклеточные водоросли. Вирусы почти полностью построены из нуклеопротеинов.

Биологическая роль нуклеиновых кислот огромна. Они принимают участие в передаче наследственной информации и в биосинтезе белка, являясь структурными элементами ядра и протоплазмы. Производные моно- (АТФ, ГТФ, УТФ, ЦТФ, ДТФ, ФМН, КоА и др.) и динуклеотидов (НАД⁺, НАДФ⁺, ФАД и др.) также выполняют в организме важные функции.

Принцип метода. Определить состав нуклеиновых кислот удается с помощью кислотного гидролиза нуклеопротеинов клеток, например, дрожжей, в присутствии серной кислоты. При кислотном гидролизе нуклеопротеины вначале распадаются на белок и нуклеиновые кислоты, а затем при продолжительном гидролизе наступаетих полный распад на полипептиды, пуриновые и пиримидиновые основания, рибозу, дезоксирибозу и фосфорную кислоту, которые могут быть обнаружены специфическими реакциями.

Дата добавления: 2017-02-01