Исследуемый материал и реактивы

Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости)

В клинико-диагностических лабораториях широко используют методы, при которых простыми коллоидными реакциями косвенно обнаруживаются изменения в составе белков сыворотки крови (диспротеинемические тесты). Все эти методы основываются на изменениях, наступающих в коллоидной устойчивости сыворотки, поэтому получили известность под названием проб коллоидной устойчивости (или проб на лабильность белков сыворотки). Поскольку нарушение коллоидной устойчивости сыворотки под действием какого-либо реактива выражается сначала коагуляцией (склеиванием), а затем флокуляцией (осаждением), коллоидно-устойчивые пробы именуются нередко коагуляционными или флокуляционными (коллоидно-осадочными).

Лабильность сывороточных белков во многом зависит от соотношения между альбуминами (гидрофильными, защитными коллоидами) и глобулинами. Установлено, что положительный результат коллоидно-химических проб чаще всего вызывается количественными изменениями в глобулиновых фракциях (a, b, g), или изменением соотношения альбумины/глобулины, т.е. он связан с увеличением содержания глобулинов. Либо с уменьшением уровня альбуминов.

Тимоловая проба более пригодна для функционального исследования печени, чем другие коллоидно-устойчивые пробы. Считают, что она положительна в 90-100% случаев болезни Боткина (уже в преджелтушной ее стадии и при безжелтушной форме) и при токсическом гепатите. Реакция положительна при послегепатитном и постнекротическом, особенно желтушном циррозе. В отличие от других форм циррозов, при коллагеновых заболеваниях, малярии и вирусных инфекциях. При механической желтухе она (в 75% случаев) отрицательна, что имеет дифференциально-диагностическое значение.

Принцип метода. Сывороточные β-глобулины, γ-глобулины и липопротеиды осаждаются при рН=7,55 тимоловым реактивом. В зависимости от количества и взаимного соотношения отдельных белковых фракций при реакции возникает помутнение, интенсивность которого измеряют турбодинамически.

Считают, что причиной помутнения тимоловой пробы является взаимодействие коллоидных частиц тимола и некоторых крупнодисперсных белков: g - глобулинов и b - липопротеидов. По представлению Маклагана, который предложил эту пробу в 1944 году, эта реакция связана с образованием глобулин-тимол-липидного комплекса (содержащего 40% глобулинов, 32% тимола, 18% холестерина и 10 % фосфолипидов).

1. Сыворотка крови. 2. Тимоловый реактив. 3. Физиологический раствор натрия хлористого. 4. Раствор сравнения 1: серная кислота 0,01 моль/л. 5. Раствор сравнения 2: барий хлористый 0,3 ммоль/л, серная кислота 0,097 моль/л.

Дата добавления: 2017-02-01