Общая характеристика аналитических методов

АНАЛИТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОЖИДКОСТИ

Оценка надежности аналитических методов исследования

Качество результатов исследования зависит от используемого оборудования, качества реактивов, квалификации медицинского персонала и качества метода.

Для объективной оценки качества метода используют оценку аналитической возможности метода. В качестве критерия оценки аналитической возможности используют:

– воспроизводимость результатов исследования;

– правильность;

– специфичность метода исследований;

– чувствительность.

Воспроизводимость результатов исследования – соответствие результатов повторных определений какого-либо параметра в одном и том же материале. Не имеет числовой величины, а определяется степенью разброса результатов измерения. Иногда используют критерий разброс результата – величина, обратная воспроизводимости и определяется величиной случайной погрешности.

Воспроизводимость определяется на нормальном уровне и патологическом.

Правильность – соответствие среднего значения результатов повторения измерения одного и того же параметра в одном и том же материале. Не имеет числового значения, но существуют следующие способы ее определения:

1) способ добавки (введение в биожидкость известного количества анализируемого вещества и определение его с помощью исследуемого метода);

2) способ смешивания проб (биожидкость с низкой и высокой концентрацией вещества при различном соотношении биожидкости с повышенной концентрацией и пониженной концентрацией), метод используется для определения правильности исследования ферментов, так как нельзя использовать метод добавки;

3) самый простой – исследование контрольного материала с известным содержанием компонентов;

4) метод сравнения методов.

Специфичность метода – способность измерять лишь тот компонент или одновременно несколько компонент, для определения которых метод предназначен. Специальность метода определяют введением в анализируемую биопробу примеси с аналогичной химической структурой.

Чувствительность – способность метода выявить наименьшие различия между двумя концентрациями исследуемого вещества в биопробе.

Нижний предел чувствительности – концентрация вещества, которая соответствует наименьшему результату определения статически достоверной пробы вещества, отличающейся от холостой пробы.

Свойства биовещества очень разнообразны, отсюда и разнообразие методов их исследования. Общее число известных сегодня аналитических методов довольно велико – оно составляет несколько десятков тысяч. Описать все методы в одном пособии принципиально невозможно: постоянно рождаются новые методы и открываются свойства, которые могут привести к созданию новых методов. Однако очень важно определить фундаментальные принципы и основные закономерности, лежащие в основе тех или иных родственных методов. В связи с этим представляется целесообразным разбить основные известные в аналитической практике методы на три группы: физико-химические, химические и биологические. Рассмотрим краткую характеристику перечисленных трупп методов.

Физико-химические методы характеризуются огромным разнообразием измерительных эффектов, используя которые, удается определять большое число параметров вещества. В ряде случаев методические возможности этих методов подкрепляются весьма сложной теорией, излагать которую в учебном пособии не представляется возможным. Кроме того. данная группа методов хорошо описана в доступной технической литературе.

В основе методовхимической группы лежит использование различных химических реакций (химического взаимодействия молекул) типа S _Х + R = Р, где S _Х – исследуемый компонент, R – реагент; Р – продукт реакции. При этом для определения концентрации S _Х существует три возможности:

- измерение количества полученного продукта;

- измерение количества реагента R, израсходованного в процессе реакции:

- фиксирование изменений, происходящих с неизвестным компонентом S _Х в процессе взаимодействия с реагентом.

В основебиологических методов – методов биотестирования – лежит свойство живых организмов давать отклик на состав окружающей среды. Это связано с тем, что любые организмы для своей жизнедеятельности требуют среды строго определенного химического состава. Если его изменить, например исключив из питательной среды некоторый компонент или введя его дополнительно, то организмы через определенное время обязательно подадут соответствующий сигнал-отклик. Такой сигнал может быть выражен изменением характера их поведения, интенсивности роста, состава крови, а также нарушением функций пищеварения, дыхания, размножения и др. Чаще всего методы этой группы используются в целях биотестирования объектов окружающей среды для группового обнаружения некоторых вредных компонентов в очень малых концентрациях – ионов тяжелых металлов, пестицидов, БАВ и др. В роли организмов-биоиндикаторов могут выступать различные живые клетки организмов, микроорганизмы, плесневые грибы, насекомые, рыбы и другие представители биологического мира.

Дата добавления: 2017-02-01