Выделение и характеристика возбудителей УПИ

Микробные заболевания неэпидемической природы называют также оппортунистическими (ОИ), или условно-патогенными инфекциями (УПИ); или гнойно-воспалительными заболеваниями (ГВЗ). К ним относят: менингиты, отиты, пиодермию, сепсис, мастит, пневмонию, флегмоны, остеомиелит, нефриты, абсцессы, холециститы, эндометрит, перитонит и пр. Всего более 100 наименований. Их вызывают условно-патогенные микробы, относящиеся к бактериям, вирусам, грибам, простейшим. Перечень их видов велик. Лучше всего изучены бактерии и грибы. Наиболее значимую роль в патологии человека играют: Staphylococcus, E.coli, Ps.aeruginosa, Enterobacter, Klebsiella, Salmonella ssp., Proteus; грибы рода Candida, Penicillium, Aspergillus, а также вирусы - герпесвирус, РС-вирус и другие.

Указанные условно-патогенные микробы (УПМ) в большинстве своем составляют нормальную микрофлору тела человека. Они обитают на коже, слизистых оболочках. Кроме того, они населяют объекты окружающей человека среды, в том числе больничной.

Для развития инфекции, относящейся к УПИ, важным условием является наличие иммунодефицита у больного, проникновение в организм большого количества условно-патогенных микробов через поврежденные ткани. При этом у УПМ обычно отсутствуют выраженные факторы патогенности, такие как, экзотоксин, инвазивность, подавление фагоцитоза. Однако, они вырабатывают различные ферменты патогенности, способные вызвать поражение клеток организма, на которых адгезировался микроб, которые также действуют своими эндотоксинами.

Важной биологической характеристикой возбудителей НМЗ является их изменчивость под влиянием различных факторов, особенно антибиотиков, антисептиков, лучевой терапии, гормонов, антидепрессантов, используемых для лечения больных. Эти средства параллельно с терапевтическим эффектом могут вызвать иммунодефицитную реакцию, а также резистентность возбудителя. Это следует учитывать при лечении больных с условно-патогенными инфекциями.

Особо следует учитывать формирование антибиотикоустойчивости у возбудителей внутрибольничных и условно-патогенных инфекций, что существенно затрудняет их профилактику и лечение.

Критерии этиологической значимости возбудителя

Так как микроб - возбудитель неэпидемических микробных заболеваний является нередко представителем нормальной (естественной) микрофлоры больного человека, то перед врачами стоит важная задача - решить вопрос об этиологической (причинной) значимости выделенного микроорганизма при развившейся оппортунистической инфекции. Именно от этого зависит выбор эффективных средств лечения, в случае возникновения внутрибольничных УПИ - развертывание мероприятий по ограничению их распространения.

Следует также учитывать, что во многих случаях выделяется не один микроб, а ассоциация микроорганизмов. В этих условиях решить вопрос, какой из выделенных микробов является возбудителем, особенно важно. Вот почему разработаны критерии этиологической значимости выделенных при УПИ микроорганизмов. Для правильной интерпретации результатов исследований, учитывают следующие критерии:

1. При стерильности исследуемого материала в норме (кровь, ликвор, экссудат) все выделенные микроорганизмы могут считаться возбудителями, независимо от количества выделенного микроба.

2. Количественная обсемененность материала микробом. Возбудителем заболевания является микроб, высеянный в количестве, равном 10³-10⁷ КОЕ/мл-г. Особенно необходимо учитывать этот показатель при высеве микробных ассоциантов.

3. Повторность выделения одного и того же вида микроба из одного и того же материала.

4. Обнаружение у возбудителя, выделенного из первичного и повторно взятого материала, сходных маркеров, определяющих их серовар, биовар, фаговар, антибиотиковар. Особенно важна подобная информация при вспышках внутрибольничных заболеваний.

5. Имеет значение сопоставление динамики количественной контаминации микробом исследуемого материала с динамикой клинических проявлений, эффективности антибиотикотерапии.

6. Может иметь значение изучение динамики образования специфических антител.

Основные признаки условно-патогенных инфекций

Основными признаками НМЗ (УПИ) являются:

1. Полиэтиологичность - то есть одну и ту же клиническую форму заболевания (циститы или плевриты, или бронхиты, или пневмонии, или холециститы и другие гнойно-воспалительные заболевания) могут вызвать различные условно-патогенные микробы.

2. Нередко УПИ протекают по типу смешанных инфекций, т.е. их вызывают ассоциации микробов, или они развиваются по типу вторичных инфекций, когда больной человек дополнительно заражается дополнительным (другим) микроорганизмом.

3. Регистрируется смена возбудителя в течение инфекции, что вызывает обострение процесса.

4. Неэпидемические микробные заболевания не имеют специфичности и выраженной органной локализации, так как один и тот микроб может вызвать поражение различных органов и тканей. Эти инфекции склонны к хроническому течению и генерализации процесса.

5. Антимикробная терапия при УПИ - слабоэффективна, в связи с полирезистентностью возбудителя, его слабой элиминацией из организма на фоне развивающегося иммунодефицита.

В связи с отмеченными особенностями, ведущую роль в

постановке диагноза УПИ, играют микробиологические исследования, основой которых является своевременное и правильное взятие, доставка, хранение и обработка исследуемого материала.

Общие правила взятия исследуемого материала

1. От больного могут быть взяты кровь, моча, ликвор, мокрота, лаважная жидкость, отделяемое из носа и зева, отделяемое половых органов, содержимое желудочно-кишечного тракта, в частности - фекалии, рвотные массы, отделяемое из ран, выпоты, отделяемое из глаз, ушей, полости рта, операционный материал, гной, смыв с кожи и др. Вид взятого на исследование материала определяется клинической картиной заболевания, патогенетической стадией его развития, локализацией патологического процесса.

2. При взятии материала соблюдают правила асептики для исключения его контаминации неспецифической микрофлорой окружающей среды. Сам же материал не должен служить объектом инфицирования лабораторных работников, в связи чем в лаборатории должны соблюдаться правила техники безопасности при производстве микробиологических исследований. При этом лабораторным работникам следует учитывать, что исследуемый ими материал может быть обсеменен не только условно-патогенными и сапрофитными микробами, но и патогенными возбудителями инфекционных болезней.

3. Материал по возможности берут в ранней стадии болезни до лечения больного антимикробными средствами. Важно повторное исследование материала.

4. Материал берут в достаточном количестве в стерильную посуду, не содержащую дезинфектантов, антибиотиков, антисептиков.

5. Взятый материал быстро доставляют в лабораторию и не позднее 1-2 часов с момента взятия подвергают исследованию. В крайнем случае невозможности своевременного исследования, материал помещают в холодильник (+4^оС) или добавляют в него консервант и исследуют позднее. Кроме того, существуют методы исследования материала (например -крови) и пересылки в отдаленные лаборатории.

6. Материал, доставленный в лабораторию, должен иметь направление, в котором указано название лечебного учреждения, фамилия, имя, отчество, возраст, адрес больного, дата, час взятия материала; вид материала; предполагаемый диагноз, дата заболевания, подпись врача.

7. После исследования, остатки неиспользованного материала обеззараживают сжиганием, автоклавированием или раствором дезинфенктанта повышенной концентрации при длительной экспозиции.

Использование адекватных информативных методов

микробиологических исследований

Поступивший в лабораторию материал проходит специальную обработку, характер которой зависит от вида исследуемого материала, предполагаемого диагноза у больного, предполагаемого вида возбудителя, особенностей материальной оснащенности лаборатории и пр. Методов лабораторных микробиологических исследований много. Основные из них - микроскопические, бактериологические, серологические, экспериментальные, аллергологические.

Так как условно-патогенные инфекции не имеют специфических клинических проявлений, могут быть вызваны различными видами УПМ или их ассоциациями, то выявление возбудителя - главный метод диагностики. Для того, чтобы решить вопрос о возбудителе, посев материала на специально подобранные питательные среды, должен быть количественным. Именно количественный бактериологический метод позволяет определить, является ли выделенный микроб возбудителем болезни или относится к сопутствующей микрофлоре.

При микроскопическом исследовании ориентировочно (предположительно) можно определить возбудителя в таких материалах, как, гной, экссудат, мокрота, спинномозговая жидкость, лаважная жидкость. Однако этот метод слабо информативен, он вовсе не информативен при исследовании, например, крови, где даже в случае сепсиса, микробов мало и поэтому их сложно обнаружить в капле материала. Однако, при микроскопии, например, ликвора микроскопия позволяет во многих случаях быстро поставить предположительный диагноз менингита, а затем подтвердить его другими более информативными методами.

Второй метод - бактериологический (вирусологический, микологический) дает возможность установить диагноз заболевания на основе выделения возбудителя. При этом с помощью бактериологического метода удается не только полностью подтвердить клинический диагноз болезни, но и помочь эпидемиологическому расследованию в поиске источника, путей и факторов передачи инфекции.

Методы иммунодиагностики многочисленны. Они основаны на способности организма больного в ответ на внедрение возбудителя (антиген) отвечать выработкой специфических защитных белков (антитела) и формированием специфически реагирующих клеточных клонов. Для поиска специфических ответов организма, используют различные иммунологические (серологические) реакции - агглютинации, преципитации, иммуноферментный анализ, полимеразную цепную реакцию и др. С помощью этих же реакций в организме можно производить поиск антигена, устанавливать его титр. Однако использование методов иммунодиагностики для верификации диагноза инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами, существенно ограничивается из=за слабого иммунного ответа организма самих больных, в связи с наличием у них иммунодефицитных состояний.

Вопросы для самоподготовки:

1. Что такое "Клиническая микробиология" (определение, назначение)

2. Основные задачи клинической микробиологии

3. Перечислить заболевания, при которых возбудителями являются условно-патогенные микроорганизмы

4. Перечислить условно-патогенные микроорганизмы, играющие ведущую роль в развитии условно-патогенных, гнойно-воспалительных инфекций.

5. Что такое критерии этиологической значимости микроба (возбудителя). Медицинская значимость установления этиологической роли микроорганизма.

6. Перечислить критерии этиологической значимости условно-патогенных микроорганизмов. Дать примеры.

7. Разобрать клиническое значение количественной микробной обсемененности патологического материала, взятого у больного на исследование (кровь, моча, фекалии, гной).

8. Роль повторных микробиологических обследований больных в динамике УПИ (ГВЗ) для верификации клинического диагноза и эффективного лечения больного

9. Значение лабораторного определения антибиотикочувствительности возбудителей УПИ. Методы определения.

10. Основные механизмы формирования антибиотикоустойчивости возбудителей.

11. Значение полиантибиотикорезистентности клинически значимых УПМ.

12. Роль изменчивости биологических признаков возбудителей в возникновении, развитии УПМ и эффективности лечения больных.

13. Основные факторы, способствующие возникновению и развитию УПИ.

14. Перечислить основные признаки УПИ (полиэтиологичность, ассоциативность возбудителей и пр.).

15. Что способствует генерализации и хронизации условно-патогенных инфекций

16. Основные причины слабой эффективности антимикробной терапии при УПИ

17. Перечислить материалы, которые можно взять от больного для проведения микробиологических исследований.

Вопросы по теме занятия

1. Основные части микроскопа

2. Значение оптической части микроскопа и порядок использования в процессе микроскопии

3. Иммерсионная система микроскопа

4. Основные ошибки при микроскопических исследованиях

5. Значение и возможности микроскопических исследований

Правила работы в лабораториях кафедры

Дата добавления: 2014-01-04