Получение и применение рибофлавина

Продуценты рибофлавина

Продуцентами рибофлавина в природе являются высшие растения, дрожжи, мицелиальные грибы и бактерии. Большинство микроорганизмов образует свободный рибофлавин и две его коферментные формы - ФМН и ФАД. Из многих бактерий и плесневых грибов выделены аналоги РФ и их коферментные формы. Основной формой флавинов, выделяемых микроорганизмами в среду, является РФ.

Среди прокариот флавиногенной группой считают микобактерии и ацетонобутиловые бактерии. Из актиномицетов значительные количества РФ синтезируют Nocardia eritropolis. Среди плесневых грибов наиболее активные продуценты рибофлавина - грибы рода Aspergillus и вид A. niger. Использование мицелия грибов как препарата флавинов экономично: мицелий является отходом антибиотической промышленности. Активные продуценты рибофлавина Eremothecium ashbyii, Ashbyii gossupii, образующие игольчатые аскоспоры, дрожжеподобные грибы, входящие в класс Ascomycetes, порядок Endomycetales, семейства Spermophtoraceae. Описан ряд способов получения кормовых и кристаллических препаратов РФ с использованием указанных микроорганизмов.

Кормовой концентрат РФ получают с помощью гриба Eremothecium ashbyii. Недостаток культуры Е. ashbyii - ее нестабильность: при хранении на твердых средах при комнатной, низкой температуре и даже в процессе лиофилизации гриб легко теряет способность к сверхсинтезу РФ. Для сохранения штамма Е. ashbyii в активном состоянии в течение длительного времени (8 - 10 месяцев) рекомендуется производить систематический рассев на твердые питательные среды и отбирать наиболее интенсивно окрашенные в оранжевый цвет колонии. Яркая окраска колоний коррелирует с высокой рибофлавин-синтетической способностью. При подготовке инокулята гриб пересевают последовательно по схеме:

посев на скошенную агаризованную среду в пробирке → в жидкую среду → в колбы → в бутыли → в инокулятор.

Среда для пробирок содержит соевую муку, свекловичный сахар, агар, рН 6,8 (1-й вариант) или дрожжевой экстракт, пептон, глюкозу, агар, рН 6,8 (2-й вариант). Время выращивания 5-7 суток.

Культивирование в ферментере ведут до начала лизиса клеток и появления спор (определяют микроскопически). Температура культивирования 28-30°С, давление воздуха в ферментере (1-2)10⁴ Па, расход воздуха 1,5-2,0 л в минуту на 1 л культуральной жидкости. Выход РФ - около 1200 мкг/мл. Для получения кормового препарата РФ культуральную жидкость упаривают под вакуумом до содержания 39 – 40 % сухих веществ.

Получение витамина D₂

Эргостерин - эргоста-5,7,22-триен-ЗВ-ол- исходный продукт производства жирорастворимого витамина D₂ и кормовых препаратов, обогащенных витаминов D₂. В основе структуры эргостерина и витамина D лежат четыре углеродных цикла (А, В, С, D). В случае витамина D кольцо В разомкнуто. Углеводородная структура эргостерина и витамина D₂ определяет их липофильные свойства.

Рисунок 37 - Технологическая схема получения кормового концентрата рибофлавина с помощью Е. ashbyii: 1 - компрессор воздуха; 2 – маслоотделитель; 3 – ресивер; 4 - фильтр головной; 5 – инокулятор; 6 – смеситель; 7 – ферментер; 8 – инокулятор; 9 - сборник культуральной жидкости; 10 - выпарной аппарат; 11 - распылительная сушилка; 12 – дробилка.  

Дата добавления: 2014-01-04