Механизм окраски по Грамуокончательно не выяснен. Считают, что в основе механизма окраски по Граму лежат особенности химического состава и строение клеточной стенки

Метахроматичность (греч. meta - изменение, chroma - цвет) способность окрашиваться в другой цвет, чем цвет основного красителя. Диагностическое значение имеет метахроматичность зерен волютина у коринебактерий дифтерии. При окраске метиленовым синим, толуидиновым синим гранулы волютина окрашиваются в фиолетово-красный, вишневый цвет. Обычно для выявления зерен волютина окраски проводят щелочным метиленовым синим, при этом волютин окрашивается в темно-синий, а тело клетки - в голубой цвет.

Отношение к окраске по Граму. В 1884 г. Х. Грам предложил метод окраски для выявления некоторых бактерий в тканях животных. В дальнейшем этот метод окраски распространился в микробиологии, и на отношении к окраске за Граммом основанное разделение подавляющего большинства бактерий на грациликуты ( грамнегативные ) и фирмикуты ( грампозитивные ).

Окраска по Граму заключается в том, что сначала препарат окрашивают генцианвиолетом ( кристалвиолетом, метилвиолетом и др.), потом обрабатывают водным раствором йода (в виде раствора Люголя) и дифференцируют этиловым спиртом. Одни бактерии, грампозитивные, сохраняют при этом темно-фиолетовую окраску, другие, грамнегативные, обесцвечиваются спиртом и затем окрашиваются раствором фуксину в контрастный красный цвет.

Клеточная стена грампозитивных бактерий характеризуется высоким содержанием пептидогликана (муреина), который образует толстый многослойный мешок, наличием частых поперечных пептидных связей между нитями гликана, присутствием в муреиновом слое тейхоевых кислот, малым содержанием липидов. В результате обработки спиртом происходит разбухание муреинового слоя и уменьшение диаметра пор клеточной стенки, которая приводит к снижению ее проницаемости. Поэтому комплексное соединение генцианвиолета с веществом цитоплазмы и йодом у грампозитивных бактерий хоть и растворяется в спирте, но не может выйти через клеточную стенку, и клетка сохраняет первичную окраску.

Клеточная стена грамнегативных бактерий имеет тонкий крупноячеистый слой муреина с редкими поперечными связями и содержит много липидов, которые растворяются и вымываются при обработке спиртом. Поэтому проницаемость клеточной стены, и так более высокая, чем у грампозитивных бактерий, увеличивается еще больше, и краситель легко вымывается спиртом, наступает обесцвечение грамнегативных бактерий.

Доказательством того, что в окраске по Граму основную роль играет клеточная стенка, является тот факт, что при нарушении целостности клеточной стены после обработки лизоцимом, под действием пенициллина или в результате дегенерации бактерий при старении культуры грамположительных бактерии окрашиваются грамотрицательно.

Технику различных методов окраски бактерий студенты подробно изучают на практических занятиях.

РЕКОМЕНДОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Протченко П.З. Загальна мікробіологія, вірусологія та імунологія. Вибрані лекції: Навч. посібник. – Одеса: Одес. Держ. мед. ун-т, 2002. – 298 с.

2. Пяткін К. Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія. - К: Высшая школа, 1992. - 432 с.

Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. - М: Медицина, 1983. - 312 с.

3. Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред. Борисова Л.Б. – Г.: Медицина, 1993. – 232 с.

4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник под ред. А.А.Воробьева. – М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 691 с.

5. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /ред. Л.Б. Борисов, А.М. Смирнова. - М: Медицина, 1994. - 528 c.

Лекция 3. ФИЗИОЛОГИЯ бактерий

1. ВСТУПЛЕНИЕ

Изучение нашего предмета мы начинаем с физиологии микроорганизмов. Однако, на этой лекции речь будет идти только о бактериях, особенности физиологии других групп микроорганизмов грибов, простейших, микоплазм, хламидий, риккетсий, вирусов) мы будем рассматривать при изучении специальной медицинской микробиологии. При этом свойства остальных групп микроорганизмов мы будем рассматривать в сравнении со свойствами бактерий, что будет способствовать лучшему усвоению материала.

Дата добавления: 2014-01-04