Алгоритм постановки

Реакция кольцепреципитации (ракция Асколи)

Виды реакции преципитации

1. Реакция кольцепреципитации (в пробирках)

2. Реакция преципитации в агаре (в чашках Петри)

Применяется для сероидентификации сибироязвенного, чумного и туляремийного антигена. Компоненты:

1. Приготовленный антиген

2. Преципитационная сыворотка (известные антитела)

3. Физ. раствор (для разведения антигена)

4. Четыре преципитационные пробирки, пастеровские пипетки, дез. раствор

Преципитиноген готовят путем экстракции кипячением исследуемого материала с обязательным фильтрованием полученного экстракта антигена до полной прозрачности жидкости.

1. Одеть защитные средства (резиновые перчатки перчатки)

2. Подготовить четыре преципитационных пробирки (одна опытная и три контрольных)

3. Пастеровской пипеткой в пробирки, стоящие строго вертикально, внести по 0,3 мл преципитирующей сыворотки (5 капель). Ни одна капля не должна попасть на стенки пробирки.

4. Наклонив пробирку, по стенке наслаиваем приготовленный прозрачный раствора антигена. Жидкости не должны перемешиваться.

5. Осторожно переводим пробирку в вертикальное положение

6. Учет результатов через 5-30 минут

При положительной реакции преципитации на границе жидкостей появляется преципитат — мутное белое кольцо. Наслаивать сыворотку на антиген нельзя, т. к. она тяжелее антигена. Реакция сопровождается тремя контрольными опытами:

1. Нормальная сыворотка + исследуемый антиген (-)

2. Преципитирующая сыворотка + физ. раствор (-)

3. Преципитирующая сыворотка + известный антиген (+)

Учет реакции преципитации всегда начинают с контрольных пробирок.

Дата добавления: 2013-12-13