Постановка пробы на токсикогенность

Алгоритм постановки реакции преципитации методом двойной диффузии по Оухтерлони

Реакция преципитации в агаре (в геле)

Основана на способности антигенов и антител диффундировать в толще агара. При встрече антигена с соответствующим антителом в агаре образуется преципитат в виде дуг преципитата. По способу внесения в агар антигена и антител различают:

1. Метод простой диффузии — сыворотку вносят в расплавленный и охлажденный агар, а антиген — в лунки агара (делают металлическими цилиндрами — матриксами)

2. Метод двойной диффузии по Оухтерлони — сыворотки и антитела вносят в лунки агара или на агар накладывают бумажные диски пропитанные сывороткой и антигеном.

3. Определение токсикогенности бактерий — антитоксическую сыворотку наносят на бумажную полоску, а в качестве антигенов используют выделенную культуру для выявления экзотоксина.

В чашке с агаром матриксом делают лунки, заливают вторым слоем агара и в лунки добавляют:

1. Первая лунка — преципитирующую сыворотку (опыт)

2. Вторая лунка — нормальную сыворотку (контроль)

3. Третья лунка — известный антиген (контроль)

4. Четвертая лунка — исследуемый антиген

Учет через 24-48 — дуги преципитации между 1,3 и 1,4 лунками.

Основана на диффузии экзотоксина (антигена) бактерий и антитоксической сыворотки (антитела) в агаре с образованием комплекса антиген+антитело в виде дуг преципитации.

Позволяет выявить образование экзотоксина бактериями (дифтерийная палочка). Компоненты реакции преципитации:

1. Выделенная культура (для определения наличия экзотоксина)

2. Токсигенная культура (контрольная) — известный антиген

3. Антитоксическая сыворотка к контрольной культуре — известные антитела.

Дата добавления: 2013-12-13