Не серологическая РГА

Реакция гемагглютинации (РГА)

Реакции гемагглютинации (РГА, РТГА, РНГА)

Алгоритм постановки пробы на токсикогенность

1. В чашку тонким слоем наливают расплавленный и охлажденный агар Мартена (на нем лучше продуцируется экзотоксин)

2. Готовят полоски фильтровальной бумаги (1,5 х 8 см), стерилизуют в автоклаве (1 атмосфера 20 минут)

3. Разводят антитоксическую сыворотку и смачивают в ней полоску стерильной фильтровальной бумаги (активность сыворотки — 125 АЕ)

4. Полоску с сывороткой накладывают на поверхность агара

5. Бак. петлей делают посев исследуемой и контрольной культур бляшками на расстоянии 0,7 см от края бумаги. Бляшки контрольной (токсигенной) культуры засевают между исследуемой культурой

6. Учет результатов через 24-48 часов

Исследуемую культуру считают токсигенной, если дуги преципитации над ней четкие и сливаются с дугами токсигенной культуры. Исследуемую культуру считают нетоксикогенной, если над ней дуги отсутствуют или перекрещиваются.

Знать:

1. Суть реакций гемагглютинации

2. Виды реакций гемагглютинации

3. Применение реакций гемагглютинации

4. Алгоритмы постановки реакций гемагглютинации

Уметь:

1. Приготовить взвесь эритроцитов

2. Подготовить к работе эритроцитарный диагностикум

3. Поставить и учесть РНГА

Гемагглютинация — это склеивание эритроцитов. Из всех микроорганизмов только вирусы вызывают склеивание эритроцитов в результате прямого воздействия на эритроците (без образования комплекса АГ+АТ).

Различают:

1. Прямая гемагглютинация — склеивание эритроцитов под действием вирусов (не серологическая реакция).

2. Непрямая (пассивная) гемагглютинация — адсорбция на поверхности эритроцитов микробных антигенов и склеивание эритроцитов в результате образования комплекса антигена с соответствующим антителом (серологическая реакция).

Для выявления прямой гемагглютинации используют взвесь эритроцитов. Для выявления не прямой гемагглютинации — эритроцитарный диагностикум.

Эритроцитарный диагностикум — это приготовленная заводским путем взвесь эритроцитов с нанесенными (адсорбированными) на них известными убитыми микроорганизмами (антигенами).

«Пуговка» - красный плотный осадок не склеенных эритроцитов.

«Зонтик» - красный рыхлый осадок в виде перевернутого зонтика склеенных эритроцитов.

Бывает двух направлений: серологическая (используется при определении группы крови) и не серологическая (сыворотка в ней не участвует). Она применяется в вирусологии для определения вирусов в исследуемом материале. Гемагглютинация — это склеивание эритроцитов под влиянием сыворотки или других веществ.

Склеивание эритроцитов вызывают не антитела, а особые вещества, образуемые вирусами. Например, вирус гриппа агглютинирует эритроциты кур и морских свинок.

Дата добавления: 2013-12-13