Культивирование

ВОЗБУДИТЕЛЬ СТОЛБНЯКА (Clostridium tetani)

Столбняк — острая раневая инфекция, при которой происходит поражение нервной системы экзотоксином возбудителя столбняка. В естественных условиях заболевание возникает при загрязнении ран почвой, содержащей споры бацилл столбняка. Клостридии столбняка были открыты в 1884 г. А. Николайером из от­деляемого ран. Чистая культу­ра была выделена С. Китазато в 1889 г.

Морфология. Клостридии столбняка — крупные палочки, длина 4—10, толщина 0,3— 0,5. На жидких питательных средах молодые культуры не­редко образуют длинные нити. Возбудитель столбняка обра­зует круглые споры, располо­женные на конце, придающие бациллам вид барабанной па­лочки

Клостридии столбняка: 1 — в чистой культуре; 2 —колонии; справа — больной столбняком.

Они подвиж­ны, имеют длинные жгутики (перитрих), капсул не образуют, грамположительны, окрашивают­ся всеми анилиновыми красками.

§ Возбудитель столбняка — строгий анаэроб.

§ На кровяном или сахарном агаре при 37°, рН 7,0—7,9, образуют коло­нии с компактным центром и нитевидными отростками по пери­ферии.

§ Иногда появляются отдельные колонии с зоной гемолиза.

§ В глубине агара столбнячные палочки образуют колонии, напоми­нающие «комки ваты».

§ В результате расщепления белков в среде Китта-Тароцци происходит диффузное помутнение с выде­лением газа своеобразного запаха.

§ Клостридии столбняка нередко вызывают почернение висмут-сульфит агара.

Ферментативные свойства. Возбудитель столбняка не расщеп­ляет углеводов, не образует индола, медленно разжижает желати­ну, восстанавливает нитраты в нитриты, свертывает молоко мед­ленно, с образованием мелких хлопьев.

Токсины и ферменты патогенности. Возбудитель столбняка вы­рабатывает экзотоксин, являющийся сильным биологическим ядом, который по ядовитости уступает только ботулиническому токсину. Он состоит из 2 компонентов:

1)- тетаноспазмина, повреждающего клетки нервной ткани и вызывающего спазматическое сокращение мышц

2)- тетанолизина, вызывающего лизис эритроцитов. Токсин не оказывает ядовитого действия при введении его в желудочно-кишеч­ный тракт при условии целости слизистой оболочки. Он чрезвы­чайно ядовит при парентеральном введении (разведение в 30 000— 50 000 раз вызывает гибель белых мышей). Возбудитель столбняка способен вырабатывать ферменты патогенности: протеазы, фибринолизин и желатиназу.

Антигенная структура. Возбудитель столбняка имеет 10 сероло­гических типов, вырабатывающих однородный экзотоксин, кото­рый нейтрализуется антитоксической сывороткой каждого серотита. Подвижные штаммы имеют О- и Н-антигены, неподвижные только О-антигены. Типовой специфичностью обладает Н-антиген, групповой — О-антиген.

Патогенез. Столбняк у человека возникает при различных трав­мах, связанных с сельским хозяйством или бытовыми ранениями, особенно нижних конечностей, гвоздем или лопатой во время по­левой работы. Чаще болеют дети, особенно дошкольного возраста. Источником инфекции являются люди и животные. Столбнячные палочки находятся а их испражнениях и инфицируют почву. Спо-рообразующие формы бацилл обнаруживаются в почве в 40—90% проб. Споры больше содержатся в унавоженной почве.

Инфекция развивается в результате загрязнения ран почвой, обрывками одежды, содержащими споры возбудителя столбняка. Обычно бациллы столбняка развиваются в ткани на месте их внед­рения, а выделяемый ими экзотоксин всасывается в кровь и по­ражает клетки передних рогов спинного мозга, следовательно, экзотоксину принадлежит ведущая роль в патогенезе болезни.

Клиника. Ин­кубационный период при столбняке длится от 3 до 30 суток. Болезнь начинается с судорожных сокращений жевательных мышц (тризм), мимических мышц лица, затылочной мускулатуры, в дальнейшем вовлекается мускулатура спины и конечностей. В результате рез­кого сокращения мышц живота и разгибательных мышц спины те­ло больного принимает вид дуги. Летальность составляет в сред­нем 40% и смерть наступает от паралича дыхательных мышц.

Иммунитет при столбняке в основном антитоксический, недоста­точно напряженный, возможно повторное заболевание.

Лабораторная диагностика. При столбняке развива­ются типичные клинические симптомы, поэтому нет особой необхо­димости проводить микробиологические исследования. Однако для контроля качества стерилизации хирургического материала можно использовать методы микробиологических исследований.

Материал для исследования: кусочки ткани из раны, гной, обрывки одежды, перевязочный материал и тампоны.

Микроскопический метод. Наличие в мазках грамположительных с круглыми терминальными спорами бактерий дает основание подозревать столбняк. Бактериологический метод. Для обнаружения клост­ридии столбняка один флакон или пробирку с исследуемым мате­риалом прогревают в водяной бане при 80°- 20 минут с целью по­давления роста посторонней неспоровой микрофлоры. Затем сеют в накопительную среду Китт-Тароцци, помещают в термостат при 35°. Через 2-3-4 суток делают мазки из посева. При поло­жительном результате в препаратах обнаруживаются клостридии столбняка, с которыми проводят биологическую пробу.

Биологический метод еще более эффективен для обнаружения токсина клостридии столбняка. Экстракт исследуемого материала пропускают через бумажный фильтр. Двум белым мы­шам вводят его внутримышечно в бедро задней ноги по 0,5 мл, а двум другим (контрольным) вводят те же дозы фильтрата с 0,5 мл разведенной противостолбнячной сывороткой (в 1 мл должно со­держаться 400 АЕ). При наличии токсина в исследуемом материа­ле у мышей развиваются характерные для столбняка признаки. Часто уже на вторые сутки они погибают, а контрольные остаются живыми.

Лечение. При раннем введении (в первые часы ранения) анти­токсической противостолбнячной сыворотки в количестве 2000— 3000 АЕ можно ожидать благоприятные исходы. Однако при раз­вившемся и тяжело протекающем заболевании противостолбнячная сыворотка даже в больших дозах (200 000—300 000, АЕ) малоэф­фективна, и токсин не поддается нейтрализации иммунной сыворот­кой. Кроме того, назначают бензилпенициллин (натриевая и калие­вая соли), противосудорожные препараты и др.

Специфическая профилактика. Для активной иммунизации де­тей применяют ассоциированную коклюшно-дифтерийно-столбнячную вакцину(АКДС), ассо-циированный дифтерийно-столбнячный анаток­син или столбнячный адсор-бированный анатоксин. В организме образуется достаточное количество антитоксина, и иммунитет со­храняется 2—3 года. Более длителмгьтй иммунитет создают дву­кратным введением токсина через 30—40 дней, ревакцинацией через 10—12 месяцев и через 5—10 лет.

Дата добавления: 2013-12-13