Культуральные свойства. 1. Из материала делают мазок, окрашивают, микроскопируют и делают предварительный ответ

Vэтап

IVэтап

III этап

II этап

I этап

1. Из материала делают мазок, окрашивают, микроскопируют и делают предварительный ответ.

2. Материал засевают на среду Китта – Тароцци (среда накопления для анаэробов) и инкубируют при температуре 37⁰ С 8 – 24 часа.

1. При наличии признаков роста делают пересев из среды Китта – Тароцци на среду Цейсслера с целью получения изолированных колоний и инкубируют при температуре 37⁰ С 24 часа в анаэробных условиях.

1. Отбирают типичную для выделяемого вида микроорганизмов изолированную колонию, обводя её стеклографом со стороны дна чашки.

2. Из части ее делают мазок, окрашивают и микроскопируют (должны быть однородные клетки).

3. Оставшуюся часть этой колонии пересевают на среду Китта – Тароцци (для выделения и накопления чистой культуры) и инкубируют при температуре 37⁰ С 24 часа.

1. Проверяют однородность чистой культуры, т.е. делают мазок со среды Китта-Тароцци, окрашивают по Граму, микроскопируют.

2. Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса → в анаэробных условиях.

3. Биопроба и реакция нейтрализации столбнячного токсина антитоксической противостолбнячной сывороткой.

Алгоритм проведения биопробы (реакция нейтрализации на мышах) при диагностике столбняка. Цель постановки данной реакции для лабораторного диагноза столбняка.

1. Проводят учет ферментативных свойств культуры, тестов идентификации, пробы на чувствительность к антибиотикам.

2. Выдают окончательный ответ: «Выделены Clostridium tetani чувствительные к эритромицину и тетрациклину, промежуточные к гентамицину, устойчивые к пенициллину и стрептомицину».

Таксономия. Возбудителями газовой анаэробной инфекции являются несколько видов веретенообразных анаэробных токсигенных бактерий, относящихся к роду Clostridium, семейство Bacillaceae. Основные четыре вида:Cl. perfingens, Cl. novyi, Cl. septicum, Cl. histolyticum. Реже газовую гангрену вызывают Cl. sordelii, Cl. difficile, Cl. fallax, Cl. ramosum, Cl. bifermentas, Cl.sporogenes.

Полимикробный характер инфекции. Газовая гангрена – полиэтиологическая раневая инфекция. Проявляется она массивным омертвением мышечных тканей, интенсивным отеком и газообразованием в них, выраженной токсемией и высокой температурой. Чаще всего газовой гангреной осложняются рвано – ушибленные осколочные ранения нижних конечностей, загрязненные почвой, содержащей споры токсигенных клостридий, которые попадают в нее с испражнениями животных и человека. Споры способствуют ее развитию быстрая некротизация мощных пластов мышечной ткани вследствие нарушения в ней кровотока и большой кровопотери, резко снижающих реактивность организма, на фоне которой активируются гноеродные аэробы, ускоряющие процесс некроза тканей и понижающие в них окислительно – восстановительный потенциал. При этом среди сопутствующих микробов – индикаторов газовой гангрены в ране чаще всего обнаруживаются стафилококк, стрептококки, синегнойная палочка, вульгарный протей, Cl.sporogenes.

Морфология. Cl.perfingens – крупные полиморфные палочки, не имеет жгутиков, образует в организме человека и животных капсулу. Споры овальной формы, располагающиеся субтерминально или центрально. Грамположительны.

Возбудитель газовой анаэробной инфекции – облигатный анаэроб, растет при температуре 37⁰С и рН среды 7,2 –7,4.

Среда Вильсон-Блера (столбиком) – черные колонии с почернением среды и газ (пузырьки или разрывы среды).

Среда Китта-Тароцци – равномерное помутнение и обильное газообразование.

Молоко по Тукаеву – характерное свертывание молока в виде сгустков.

Высокие столбики сахарного агара – колонии в глубине столбика имеют вид дисков и чечевицы (S-формы) или комочков ваты (R-форма).

Среда Цейсслера (кровяной сахарный агар) – серо-зеленые колонии с зоной гемолиза.

Ферментативные свойства. Cl. perfingens ферментирует лактозу, глюкозу, мальтозу, сахарозу до кислоты и газа, не ферментирует маннит, образует, не образует индол и образует сероводород, створаживает молоко, желатин разжижают.

Дата добавления: 2014-01-04