КАТЕГОРИИ: Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748) |
Бактериологическое исследование
Реакция нейтрализации токсина. Лабораторная диагностика. Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет не создается. Возможны случаи повторного ботулизма. Цель лабораторной диагностики при ботулизме – обнаружение ботулинического токсина или возбудителя ботулизма в материалах, взятых от больных: рвотные массы, кровь, промывные воды желудка, испражнения, моча, остатки пищевых продуктов, вода, напитки, секционный материал. Методы диагностики: 1. Биопроба и реакция нейтрализации токсина – основной; 2. Бактериологический; 3. Микроскопический; Часть пробы выдерживают 1-1,5 часа при комнатной температуре, затем фильтруют через ватно-марлевый фильтр или центрифугируют при 2500-3000 об/мин. 15-20 мин. Из каждой пробы в 2 пробирки наливают равное количество (1,5-2,4 мл) фильтрата или надосадочной жидкости. В одну пробирку добавляют 0,6 мл ИХН, в другую 0,6 смеси типоспецифических антитоксических сывороток типа А, В, С, Е, F. Содержимое пробирок выдерживают при комнатной температуре 30 мин, после чего вводят содержимое из каждой пробирки в объеме 0,7-1 мл двум белым мышам в/в или в/брюшинно (массой тела по 18-20г.). Наблюдение за животными проводят в течение 4 суток. В случае гибели мышей, которым был введен фильтрат без сыворотки, сразу же ставят развернутую РН для определения типа токсина. В 6 пробирок наливают фильтрат по 2-4 мл в каждую, затем в 5 из них добавляют по 0,6 мл одной из типовых сывороток, а в 6-ю – 0,6 мл ИХН. Смесь выдерживают 30 мин. при комнатной температуре и вводят по 1 мл из каждой пробирки двум белым мышам. Фильтраты опыта учитывают через 4-6 час., 24 ч. и далее на протяжении 4 дней. Выживают 2 мыши у которых токсин был нейтрализован сывороткой соответствующего типа, остальные мыши гибнут. Для обнаружения возбудителей ботулизма производят посев в жидкие среды: казеиново-грибную или козеиново-кислую, бульон Хаттингера или среды типа Тароцци (Китта-Тароцци). Среды разливают во флаконы(70-150 мл), залиты слоем вазелинового масла толщиной 0,5 см. Перед посевом среды нагревают в кипящей водяной бане, быстро охлаждают, добавляют 0,5% глюкозы и производят посев по 3-5 мл предварительного подготовленного материала в 4 флакона. Один из флаконов прогревают после посева при 60°С 15 мин, другой при 80°С 20 мин. Два флакона не прогревают. Флакон, прогретый при 60°С, и один не прогретый, термостатируют при 28°С(для обнаружения Clostridium botulinum типов E и F), другой непрогретый флакон и флакон, прогретый при 80°С, инкубируют при 37°С(для выявления возбудителей типов А, В, С). Посевы просматривают через 2-4-6-10 суток. При наличии роста готовят мазки с окраской по Граму, микроскопируют. С культуральной жидкостью ставят рН токсина. При обнаружении в посеве палочек, типичных по морфологии, и при наличии токсина выделение чистой культуры не является обязательным.
Дата добавления: 2014-01-04; Просмотров: 659; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы! Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет |