Вопрос 58. Палочка инфлюэнцы

вости организма к инфекции могут вызвать менингит (особенно у ослабленных детей), острые воспаления дыхательных путей:

• пневмонию;

• брОНХИТ;

• ларингит;

• конъюнктивит;

• острый и хронический отит и др.

2. Морфология: маленькая палочка почти кокковидной формы.
Очень полиморфны, могут образовывать нити. Неподвижны,
спор не образуют, грамотрицательны. Бактерии медленно ок­
рашиваются анилиновыми красками; окраску мазка карболо­
вым фуксином, разведенным в 10 раз, нужно производить в
течение 5—15 мин.

Биология, кулыпуральные свойства: большую роль при выращи­вании на питательных средах играют ростовые витамины — кровь различных животных или водный раствор хлористого гематина и дрожжевой экстракт.

Антигенное строение: серотипы - капсулы отдельных штаммов отличаются по антигенным свойствам в связи с присутствием в них 6 различных полисахаридов.

По капсульным антигенам бактерии инфлюэнцы разделяются на 6 типов: а, b, с, d, e, f. У людей чаще выделяется тип b. С помощью капсульных антигенов можно получить специфи­ческие антисыворотки с высоким титром, применение которых дает возможность быстро и точно определить серологические типы палочки инфлюэнцы.

3. При воспалении дыхательных путей и среднего уха берут слизь
и гной с помощью тампона, при пневмонии собирают мокроту
в чашку Петри; при эмпиеме плевры исследуют экссудат, а
при менингите — спинномозговую жидкость.

Микроскопия и бактериоскопическое исследование: посев делают на кровяной (шоколадный) агар Левинталя и одновременно на свежий кровяной агар с 10% крови кролика или лошади. Па­лочка инфлюэнцы очень неустойчива во внешней среде, быст­ро погибает при высыхании слизи, мокроты, гноя, поэтому по­сев необходимо делать немедленно после взятия материала.

На среде Левинталя колонии бактерий вырастают довольно больших размеров, слепки беловатые с гладкой поверхностью,

ровные, круглые (у капсульных бактерий). У некапсульных штаммов колонии меньше с неровными краями и выпуклым центром. С колоний делают мазки на предметном стекле, ок­рашивают фуксином Циля и микроскопируют. Типичные бактерии подвергают серологическому исследова­нию и пересевают на жидкие среды для дальнейшего исследо­вания. При пересеве с колоний на жидкие кровяные среды {бульон Левинталя) палочка инфлюэнцы дает гомогенный рост с небольшим осадком на дне. Коккообразные формы дают равномерную слизь. Нитевидные формы дают хлопья. Для ди­агностики применяют реакцию преципитации с различными жидкостями, полученными от больного.

Вопрос 59. Возбудители кокковых пневмоний и их лабораторная диагностика

1. Возбудителями пневмонии могут быть различные микроорганиз­мы, проникающие в дыхательные пути человека из окружающей среды, — кокковые (пневмококки, стрептококки, стафилокок­ки) и бациллярные (диплобациллы Флидлендера, палочки Пфейффера). Одним из наиболее частых возбудителей пнев­монии, особенно крупозной, является пневмококк. В последнее время часты стафилококковые пневмонии.

2. Материалом для исследования служат: мокрота, слизь, взятая стерильным тампоном из носоглотки больного, гной, различ­ные выпоты, пунктаты, кровь. Исследованию подвергают пре­имущественно мокроту или носоглоточную слизь.

Микроскопическое исследование: делают мазки на 2 предметных стеклах; один из мазков окрашивают по Граму, а другой — раз­веденным карболовым фуксином {краска Пфейффера). При на­хождении в мазках ланцетовидных диплококков, окруженных светлой зоной неокрасившейся капсулы, ориентировочно ус­танавливают пневмококковую этиологию. Обнаружение распо­ложенных цепочкой грамположительных кокков позволяет по­давить предварительный диагноз стрептококковой инфекции.

Характерная морфология расположения группами в виде гроз­дей винограда и положительной окраски по Граму позволяет установить наличие стрептококков. Обнаружение в мазках мелких грамотрицательных палочек, часто образующих гнезд-ные скопления и нередко полярно окрашенных, указывает на палочку Пфейффера. Грамотрицательные диплобациллы различ­ной величины, окруженные капсулой в виде светлого ореола, говорят о наличии диплобациллы Фридлендера. Микроскопиче­ский диагноз ориентировочный и предварительный.

3. Точное представление о микробном пейзаже дает:

• изучение посевов на кровяном агаре и других средах;

• выделение чистых культур из изолированных колоний;

• идентификация их.

Пневмококковые пневмонии: для бактериологического иссле­дования материал засевают на чашки Петри, содержащие агар с добавлением 5—7% дефибринированой кроличьей крови. По­севы на кровяном агаре исследуют через 1 —2 суток содержания в термостате при 37 °С.

Одновременно с изучением внешнего вида колоний произво­дят отсев их в жидкие среды и микроскопирование. Колонии пневмококков на кровяном агаре имеют вид мелких полупро­зрачных образований зеленовато-серого цвета, особенно за­метного в тонком слое агара, в центре имеют небольшой плот­ный бугорок и более светлую периферию. Нередко колонии окружены как бы отсвечивающим ореолом. В жидких средах пневмококки вызывают равномерное помутнение без образо­вания пленок и осадка.

Микроскопирование обнаруживает грамположительные парные кокки несколько удлиненной формы с заостренными наруж­ными концами, напоминающими ланцет — ланцетовидные ди­плококки. Размеры их колеблются в пределах 0,5 х 0,75 до 1 х 1,5 мкм, располагаются одиночно, но могут образовывать ко­роткие цепочки по 3—4 пары кокков. Пневмококки образуют капсулу, которая светлым ободком окружает оба кокка вместе, так как обычными методами окраски капсула не прокрашива­ется. Пневмококки легко лизируются в присутствии бычьей желчи и желчнокислых солей. Обнаруженные при исследова­нии культуры пневмококка подвергают дополнительному ис-

следованию — определяют тип пневмококка, вирулентность для белых мышей и устойчивость к действию антибиотиков, а также производят серологические исследования (реакции агг­лютинации и преципитации — берется материал от больного и типовые пневмококковые сыворотки). Одновременно с посе­вом на агар исследуемый материал вводят внутрибрюшинно 2 белым мышам весом 18—20 г по 0,5 мл, т. е. ставят биологи­ческую пробу.

4. Стафилококковая пневмония. Бактериологическое исследование

проводится с использованием молочно-солевого и кровяного агара. Для обнаружения стафилококков пользуются материа­лом (пунктат, выпоты, гной, экссудат), взятым непосредствен­но из очага болезни (плевральные и легочные полости), а также посевами крови, производимыми в строго стерильных условиях.

Исследования слизи из зева и носа имеют второстепенное значе­ние и лишь дополняют общую картину. 2—3 капли исследуемо­го материала помещают на поверхность чашки, содержащей молочно-солевой агар, посевы помещают в термостат при 37 "С. Посевы крови сохраняют в термостате до появления роста (помутнении). Если в течение 4—5 дней роста микробов не обнаруживается, считают отрицательными и уничтожают. Через сутки роста посевы извлекают из термостата и выросшие культуры подвергают изучению.

Колонии стафилококков на твердых средах представляют собой правильные диски с ровными краями, блестящей, умеренно выпуклой поверхностью, размером от 2 до 4 мм в диаметре. Колонии легко снимаются с агара, немного тягучи, непрозрач­ны, окрашены в золотисто-оранжевый, лимонно-желтый или белый цвет. На кровяном агаре патогенные штаммы стафило­кокков, как правило, окружены зоной более или менее выра­женного гемолиза. В жидких средах стафилококки вызывают сильное диффузное помутнение, некоторые штаммы с образо­ванием пленки. При стоянии пробирки на дне образуется оса­док. Стафилококки грамположительны.

Под микроскопом стафилококки представляют собой довольно правильные сферические кокки с диаметром 0,6 до 0,9 мкм. Располагаются одиночно, попарно и даже короткими цепочка­ми по 2—4 кокка, но основной формой являются неправиль­ные скопления, напоминающие гроздья винограда.

Патогенные штаммы выгладят, как правило, лиловыми, а не­патогенные — интенсивно синими. Выделенные из одной ко­лонии штаммы культур стафилококка исследуют на патоген­ные свойства и чувствительность к антибиотикам. Из посевов крови ежедневно делают высевы на гемоагар и выделенные культуры подвергают тем же исследованиям.

Понятие о патогенности стафилококковой культуры складыва­ется из комплекса свойств изучаемого штамма:

• способности вырабатывать пигмент;

• вызывать гемолиз эритроцитов;

• коагулировать плазму крови;

• вырабатывать экзотоксин;

• лизироваться типовыми фагами.

Косвенным показателем патогенных стафилококков является их способность лизироваться типовыми стафилококковыми фагами, так как известно, что непатогенные штаммы не лизи-руются.

Серологическое исследование — наибольшее распространение получило определение уровня стафилококкового антитоксина в сыворотке больных в динамике, т. е. в начале и в конце бо­лезни. Принцип титрования основан на нейтрализации гемоли­тических свойств стафилококкового токсина антитоксином, содержащимся в сыворотке больного. Обычно при наличии стафилококкового заболевания уровень антитоксина в крови больных нарастает в течецие болезни, что подтверждает этио­логическую роль стафилококка в данном заболевании. У резко ослабленных субъектов нарастание титра антитоксина может и не наблюдаться.

1. Острый антропонозный трансмиссивный протозооноз. Возбу­дители малярии — одноклеточные животные (простейшие), от­носятся к классу спорозоа, подклассу кокцидиа, семейству

Вопрос 60. Возбудитель малярии

плазмодий, роду плазмодиум. У человека известно 4 вида воз­будителей малярии:

• плазмодии вивакс (p. vivax) — возбудитель трехдневной малярии;

• плазмодии малярии (p. malariae) — возбудитель четырехдневной малярии;

• плазмодии фальсипарум (p. falciparum) — возбудитель тропиче­ской малярии;

• плазмодии овале (p. ovale) — возбудитель особой формы трех­дневной малярии.

Последний вид в естественных условиях встречается в Африке, Палестине, Южной Америке, на Филиппинах. В России суще­ствование овале не установлено. Человек в естественных усло­виях может заразиться через комаров возбудителем малярии обезьян.

2. Цикл развития малярийных возбудителей осуществляется со
сменой хозяев:

• половое развитие (спорогония) протекает в организме оконча­тельного хозяина — самки комара рода анофелес;

• бесполое развитие (шизогония) — в организме промежуточного хозяина — человека).

3. Спорогония — попавшие в желудок комара с кровью человека
мужские и женские половые клетки плазмодиев (микро- и мак-
рогаметоциты) превращаются в зрелые микро- и макрогаметы,
которые после оплодотворения проходят ряд последовательных
этаггов развития (от зиготы до спороцисты) инвазионных форм
спорозоитов, накапливающихся в слюнных железах насекомого.

Продолжительность спорогонии определяется видом плазмо­диев и температурой окружающего воздуха. При оптимальной температуре воздуха (25 °С) спорогония продолжается 10 дней у плазмодиев вивакс, 12 дней — у фальсипарум и 16 дней — у малярие и овале. При температуре воздуха ниже 15 °С споро-зоиты не развиваются. Дальнейшее развитие спорозоиты полу­чают в организме позвоночного хозяина, в который они про­никают при кровососании комара.

4. В организме человека малярийные паразиты проходят бесполое
размножение, или шизогонию:

• в тканевых клетках — тканевая шизогония;

• в эритроцитах — эритроцитарная шизогония.

Тело малярийного паразита состоит из цитоплазмы и ядра. Не­которые стадии паразитов содержат пигмент, который окраски не воспринимает, а имеет свой естественный цвет: темно-бурый, золотисто-желтый, коричневый, почти черный (разный у разных видов паразитов).

Заражение человека происходит в результате укуса зараженного комара рода анофелес. Со слюной такого комара в организм человека попадают спорозоиты. Тканевая шизогония протекает в клетках печени. Спорозоиты внедряются в них, округляются, растут, достигая в поперечнике 40-50 мкм и более. В них мно­гократно делится ядро, а затем сегментируется цитоплазма. В ре­зультате образуются тканевые мерозоиты. Часть мерозоитов проникает в эритроциты и дает начало эритроцитарному циклу развития паразитов. Другие мерозоиты проникают вновь в клетки печени, в которых продолжается развитие тканевых форм. Стадии паразитов, развивающиеся в клетках печени, на­зывают тканевыми, или экзоэритроцитарными, формами. Раз­личают также формы преэритроцитарные, развитие которых в тканевых клетках проходит параллельно развитию эритроци-тарных форм. Минимальная продолжительность экзоэритрици-тарной шизогонии составляет 8 суток у пл. вивакс, 6 суток у пл. факсипарум, 9 суток у пл. овале и 19—16 суток у пл. малярие. Вследствие политипичности спорозоитов пл. вивакс и пл. ова­ле часть из них (до 8—13 мес после инокуляции) обеспечивает развитие болезни после продолжительной инкубации или воз­никновение истинных или отдаленных рецидивов болезни. Эритроцитарная шизогония пл. вивакс, пл. малярие и овале протекает в периферической крови. Возбудитель пл. фальсипа-рум в периферической крови обычно встречаются только ши-зонты, кольца.

Остальные стадии шизогонии вплоть до разделения паразита на мерозоиты и развития половых форм (гамоитов) протекают во внутренних органах. Только в случаях тяжелой коматозной малярии в периферической крови могут наблюдаться и другие стадии цикла шизогонии.

У некоторых штаммов пл. фальсипарум все стадии шизогонии можно обнаружить в периферической крови у значительной час­ти больных и при относительно легком течении болезни.

5. Размножение паразитов в эритроцитах протекает в виде регу­лярно сменяющихся циклов. От проникновения мерозоита в эритроцит до завершения развития паразита, заканчивающего­ся образованием новых мерозоитов, у пл. вивакс, пл. фальси-парум и пл. овале проходит 48 ч, у пл. малярие — 72 ч. Часть мерозоитов, проникающих в эритроциты, превращаются в мужские и женские половые клетки — гамонты (мужские — микрогамонты, женские — макрогамонты).

Женские гамонты достигают стадии полной зрелости — стадии гаметы в крови человека, мужские гаметы дозревают в организ­ме переносчика. По завершении процесса созревания в желуд­ке комара наблюдается процесс выбрасывания мужским гаме-тоцитом 4—8 мужских гамет, которые после отшнуровывания активно двигаются в содержимом желудка, способны прони­кать в женскую гамету и ее оплодотворять (половой процесс). При пл. фальсипарум гаметоциты сначала принимают округ­лую форму и лишь затем образуются микрогаметы.

Оплодотворенные женские гаметы (зиготы) проникают сквозь эпителий средней кишки (желудка) комара и под наружной ее оболочкой образуют ооцисты. Ооцисты растут, в них формиру­ется большое число спорозоитов — одноядерных веретеновид-ных образований (длина 11—15 мкм, ширина 1—1,5 мкм).

Цисты разрываются, и из них выходят спорозоиты, которые, распространяясь с гемолимфой по тканям комара, попадают в его слюнные железы, после чего комар становится способным передавать малярию человеку. Заражение малярией может на­ступит не только через укус комара, но при переливании крови от донора, у которого в крови имеются паразиты, даже в весь­ма малом количестве.

1. Паразитологический диагноз малярии основан на обнаружении паразитов в окрашенных препаратах (толстая капля и мазок)

Вопрос 61. Лабораторная диагностика малярии

крови. Паразиты могут присутствовать в крови не только во время лихорадочных приступов и промежутков между присту­пами, следующими один за другим, но и в течение длительных периодов, на протяжении которых не наблюдается повышения температуры.

Наличие паразитов в крови при отсутствии лихорадочных при­ступов называется паразитоносительством. Такие люди зараз­ны для комаров. При массовых обследованиях следует брать кровь вне зависимости от наличия приступов.

Техника приготовления и окраски мазка — мазок готовят как обычно. После того как мазок высохнет, его фиксируют в 96%-ном этиловом спирте 15 мин или в метиловом спирте в течение 3 мин. Высушенные после фиксации мазки окраши­вают краской Романовского, разведенной дистиллированной водой. Окрашивают в течение 30—50 мин, в зависимости от качества краски. После окрашивания препарат споласкивают водой и высушивают на воздухе.

Техника приготовления и окраски толстой капли. На стекле при­готовляют мазок, а потом на еще влажный мазок дают упасть капле крови. Капля равномерно растекается, образуя круг. По­сле того как капля высохнет, на мазке простым карандашом делают соответствующую отметку. Препарат без фиксации ок­рашивают. Затем осторожно (чтобы не смыть каплю) препарат споласкивают водопроводной водой и высушивают. Мазки и толстые капли микроскопируют имммерсионной системой.

2. Морфология малярийных паразитов в мазке крови. Мерозоит, внедрившись в эритроцит, превращается в молодой шизонт, имеющий вид кольца. Затем паразит, увеличиваясь, принимает амебовидную форму, при этом сохраняется просвет (вакуоль) между ядром паразита и основной частью его цитоплазмы. В цитоплазме паразита появляются зерна пигмента. Амебовид­ный шизонт заполняет значительную часть эритроцита, затем начинает округляться, вакуоль исчезает (стадия подготовки к делению), пигмент начинает собираться в отдельные пучки.

Для плазмодия малярии шизонты — лентовидные формы. Ядро паразита начинает делиться, а затем цитоплазма паразита де­лится так, что к каждому дочернему ядру прилегает отдельный комочек цитоплазмы (меруляция). В результате получается кучка мерозоитов — морула. Пигмент на стадии морулы собран в одну компактную кучу.

У пл. фальсипарум скучивание пигмента наступает еще до пол­ного формирования морулы. Мерозоиты расходятся, попадают в плазму крови, часть из них погибает, часть внедряется в но­вые эритроциты.

Гамонты. Форма гамонтов у всех малярийных паразитов, за исключением тропической малярии, круглая или слегка оваль­ная. При тропической малярии плазмодий имеет вытянутые гамонты с закругленными концами. Мужские и женские гамон­ты различаются между собой по величине и структуре ядра (интенсивности окраски цитоплазмы). Женские гамонты — яд­ро небольшое, компактное; цитоплазма красится в интенсив­ный голубой цвет. Мужские гамонты — ядро большое, цито­плазма красится бледно, часто зона вокруг ядра принимает фиолетовый оттенок.

Морфология малярийных паразитов в толстой капле. В толстой капле, поскольку ее окрашивают в нефиксированном виде, эритроциты выщелачиваются, а малярийные паразиты претер­певают значительную деформацию. При четырехдневной и тропической малярии пораженные эритроциты в толстой капле выщелачиваются полностью, так же как и нормальные. При трехдневной малярии в толстой капле строма эритроцитов со­храняется и диагностика малярийного паразита по толстой ка­пле облегчается. Кольца в толстой капле обычно смяты, вытя­нуты в виде восклицательного знака, иногда разорваны в виде запятой. Амебовидные шизонты часто бывают уплотненными, лентовидные шизонты четырехдневной малярии в толстой ка­пле округляются и неотличимы от амебовидных шизонтов. Морулы распознаются в толстой капле легко.

Цитоплазма паразитов в результате воздействия химиотерапев-тических препаратов окрашивается слабее, приобретает стекло­видный оттенок, становится вакуолизированной, распадается на отдельные комочки, ядро становится рыхлым или, наоборот, более компактным. Иногда пигмент собирается в кучки, вы­талкивает из паразита. В толстых каплях распознавание таких подвергшихся деформации паразитов становится более труд­ным, а иногда и невозможным.

Серологическая диагностика малярии включает иммунофер-ментную агглютинацию, реакцию непрямой гемагглютинации и др., которые имеют наибольшее значение в неэндемичных районах.

3. В мазках крови и толстых каплях малярийные паразиты могут
быть приняты за мерозоит, скопление бляшек может симули­
ровать морулу. В препаратах, окрашенных по Романовскому,
бляшки отличаются от мерозоитов по следующим признакам:

мерозоит состоит из красного ядра и голубой цитоплазмы. Фон бляшки в мазке иногда окрашивается в бледно-голубой цвет, однако ее зернистость принимает красный цвет более светлого оттенка, чем у ядер мерозоитов.

В препаратах могут быть обнаружены также посторонние мик­роорганизмы, по форме напоминающие малярийных паразитов:

грибки, одноклеточные водоросли, свободноживущие простей­шие. Некоторые одноклеточные формы с компактным ядром в центре, окрашивающимся по Романовскому в ярко-красный цвет, симулируют гамонты тропической малярии. Их легко от­личить по отсутствию пигмента. Свободноживущие простей­шие с одним или несколькими жгутами могут быть приняты за стадию образования мужских гамет малярийного паразита.

4. Комаров вскрывают и определяют наличие ооцист на желудке и
спорозоитов в слюнных железах. Ооцисты видны в нативных
препаратах.

Незрелые ооцисты выглядят в таких препаратах как круглые гомогенные образования с пигментом, состоящим из несколь­ких глыбок.

В зрелых ооцистах видны хорошо сформировавшиеся споро-зоиты, тесно прилегающие друг к другу. Ряды спорозоитов в виде частокола располагаются по отношению друг к другу под разными углами, в результате чего ооциста приобретает моза­ичный вид, при надавливании покровного стекла из ооцист выходят спорозоиты.

В слюнных железах спорозоиты расположены рядами перпен­дикулярно к протоку слюнных желез, а также в виде конгло­мератов. В секрете слюнных желез спорозоиты попадают в ок­ружающую жидкость, в которой хорошо заметны вследствие их подвижности.

Вопрос 62.Возбудитель эпидемического

1. Эпидемический сыпной тиф. Возбудителем сыпного тифа явля­
ется риккетсия Провачека, представляющая собой мелкие
(длина 0,5-1 мкм), неподвижные микроорганизмы, не обра­
зующие спор и капсул. Они полиморфны, кокковидные, чаще
в виде гантелей, палочковидные, нитевидные, ультраформные.
Грамотрицательны. Хорошо окрашиваются по Романовскому-
Гимзе, методом Здродовского и серебрением по Морозову с кон­
центрацией краски по полосам. Являясь облигатными внутри­
клеточными паразитами, рикетсии Провачека не растут на
тканевых средах.

Большие количества их удается получить в лабораторных усло­виях в легких мышей при интраназальном заражении (легоч­ные культуры), в куриных эмбрионах (яичные культуры), что имеет значение при изготовлении сыпнотифозных вакцин. В организме больных они паразитируют в цитоплазме эндоте-лиальных клеток сосудов и серозных оболочек. Риккетсии об­ладают гемолитическими и токсичными свойствами. Последние связаны с образованием термолабильных токсических субстан­ций белковой природы, неотделимых от тела микроорганизмов (видоспецифический антиген). Антигенная структура риккет­сии Провачека отличается от других риккетсии (Ку-лихорадки, цуцугамунии, клещевой пятнистой лихорадки) и сходна с рик-кетсиями Музера благодаря наличию общего термостабильного антигена. Риккетсии Провачека малоустойчивы к нагреванию и действию дезинфицирующих веществ в обычных концентраци­ях. Значительно большую устойчивость они обнаруживают к действию низких температур и высушиванию. Так, в сухих фе­калиях зараженных вшей они сохраняют жизнеспособность при комнатной температуре до 4 мес, а в леднике — до года.

2. Лабораторная диагностика сыпного тифа — бактериологиче­
ский метод не применяется в связи с его трудностями. Веду­
щая роль принадлежит серологическим методам исследования.

Чувствительными серологическими реакциями со специфическим риккетсиозным антигеном являются:

• реакция агглютинации риккетсий (РАР);

• реакция связывания комплемента (РСК);

• реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

В связи с тем что у некоторых больных бывает положительной лишь одна из серологических проб, необходимо параллельно изучать ряд серологических тестов, обычно РСК и РНГА. Ди­агностические титры РСК 1: 640 и 1: 1280 на 12—20-й день болезни.

У реконвалесцентов сыпного тифа комплементсвязывающие ан­титела сохраняются в течение многих лет, что делает РСК при­годной для ретроспективной диагностики болезни (в титре 1: 10). Наибольшую ценность для серодиагностики сыпного тифа имеет РНГА, позволяющая выявить не только суммарный титр антител, но и принадлежность их к классам иммуногло­булинов. При сыпном тифе с 5—7-го дня болезни выявляются антитела, принадлежащие к классу М (IgM), в диагностиче­ском титре 1: 1000 и более.

Максимальный титр антител определяется с 15—20-го дня болез­ни (1: 12 800 и более), при этом с 3—4-й недели болезни в сыво­ротке крови преобладают антитела класса Джи (IgG). У больных болезнью Брила с первых дней болезни и в более высоких цифрах (РСК 1: 10 240 и более, РНГА 1: 64 000 и более) выяв­ляются антитела, принадлежащие классу IgG.

Кожная аллергическая проба с антигеном риккетсий Провачека — чувствительный и специфический иммунологический тест для выявления сенсибилизации организма человека после перене­сенного заболевания. Эта реакция является ценным и простым методом определения иммунологической структуры населения в отношении сыпного тифа.

1. Ку-лихорадка — природно-очаговая инфекция с разнообразными ме­ханизмами заражения, вызываемая риккетсией Coxiella burnetii с

Вопрос 63. Возбудитель ку-лихорадки

резервуарами возбудителей в природных очагах (гамазовые и аргазовые клещи). Это мелкие, кокковидные, палочковидные формы размером 0,25—1 мкм. Мельчайшие формы возбудителя проходят через ультрафильтрацию.

Отличаются полиморфизмом, способны образовывать эль-формы (L-формы).

Риккетсии Coxiella burnetii являются внутриклеточными пара­зитами. Культивируются в желточных мешках развивающихся куриных эмбрионов, на культурах тканей, на сывороточном агаре. В отличие от других риккетсии возбудитель Ку-лихорадки не имеет общих антигенов ни с одним из видов протея, обла­дают фазовой изменчивостью (в РСК антигены I фазы обна­руживаются в период реконвалесценции, а II фазы — в ранний период болезни).

Из лабораторных животных наиболее чувствительны к риккет-сиям Coxiella burnetti морские свинки. После заражения у них развивается генерализованная инфекция с поражением внут­ренних органов.

Риккетсии Coxiella burnetti отличаются относительно высокой устойчивостью к ультрафиолетовым лучам. В водопроводной воде они остаются жизнеспособными до 160 дней, в молоке — 125 дней, масле — 40 дней, мясе - 30 дней. В сухих фекалиях инфицированных клещей риккетсии сохраняют жизнеспособ­ность до 1,5 лет, в сухих фекалиях и моче пораженных живот­ных — до нескольких недель, в шерсти животных — до 9—12 мес. Погибают при кипячении более 10 мин. Риккетсии устойчивы к ультрафиолетовому облучению, к воздействию формалина, фенола, хлорной извести и других дезинфекторов в обычных рабочих концентрациях.

2. Бактериологический метод основан на выделении культуры воз­будителя из крови, мокроты, ликвора, грудного молока или мочи больных с использованием тканевых сред. Для постановки биоло­гической пробы используют морских свинок, белых мышей и крыс. У морских свинок через 7 дней после заражения разви­вается лихорадка.

Риккетсии Coxiella burnetti в большом количестве накапливают­ся в печени, селезенке и других органах. Иногда у морских свинок после заражения бывает бессимптомное течение ин­фекции, что заставляет прибегать к постановке серологических

реакций с целью окончательной диагностики. Специфичность инфекции удается доказать иногда только через нескольких пассажей. Чистые культуры выделяют путем введения в жел­точный мешок куриных эмбрионов исследуемого материала.

3. Серологическая диагностика — наиболее проста, доступна и не менее надежна. Обычно применяют реакцию связывания ком­племента и реакцию агглютинации. В РСК с антигеном диаг­ностический титр 1:8—1:16 выявляется с 10—12-го дня бо­лезни (с антигеном II фазы) и достигает максимального значения на 3-4-й неделе болезни (с антигеном I фазы). Комплемент-связывающие антитела в низких титрах выявляются у рекон-валесцентов в течение ряда лет.

Надежным методом диагностики является иммунолюминис-центный метод исследования.

Для непосредственной и ретроспективной диагностики Ку-лихорадки предложена внутрикожная проба. Трудности приго­товления стандартного антигена лишают ее практической цен­ности, хотя при эпидемиологических и эпизоотологических обследованиях эта проба могла бы быть полезной.

Для выявления природных очагов Ку-лихорадки важны массо­вые исследования клещей и диких животных на возбудителя. Методом флюоресцирующих антител исследуются гемолимфа и кишечник клещей, препараты-отпечатки внутренних органов животных на зараженность риккетсиями Coxiella burnetti.

Дата добавления: 2014-01-07