Моноклональные и поликлональные антитела. Гибридомная технология получения моноклональных антител

Антитела могут быть моноклональными и поликлональными. Клон - это совокупность продуцирующих антитела клеток, которые имеют одну клетку-предшественницу. В норме в организме антитела продуцируются несколькими или даже множеством клонов. Поэтому из сыворотки иммунизированного животного получают препараты поликлональных антител. Они представляют собой смесь иммуноглобулинов, различающихся в первую очередь по специфичности, а также и по другим характеристикам.

Специфичность антител - это показатель того, насколько избирательно они взаимодействуют с антигенными молекулами определенного типа. Специфичность поликлональных антител определяется совокупностью специфического взаимодействия с многочисленными антигенными детерминантами, которые могут быть или не быть уникальными, то есть присущими только молекулам определенного вещества.

Искусственное слияние опухолевой клетки (В-лимфоцита) и одной специально отобранной антителопродуцирующей клетки иммунизированного животного (мыши) позволило получить так называемую гибридому, которая обладает беспредельной потенцией к делению и способностью продуцировать антитела строго определенной специфичности. Получаемые по данной технологии молекулы иммуноглобулинов идентичны друг другу как по строению, так и по специфичности. Такая одинаковость обусловлена тем, что антитела вырабатываются клетками, у которых один общий предшественник.

Кроме стандартизации препаратов антител моноклональная технология позволила получать антитела целенаправленно к определенным участкам молекулы антигена. При этом предпочтение отдают не только наиболее иммуногенным детерминантам, но в первую очередь диагностически значимым структурам, среди которых выбирают консервативные, то есть не изменяющиеся или изменяющиеся незначительно в процессе филогенеза последовательностям аминокислот. Такой подход при производстве препаратов антител обеспечивает высокую чувствительность и специфичность иммуноферментного анализа в целом.

Моноклональные антитела специфичны к одной антигенной детерминанте. Вероятность перекрестных реакций с другими антигенами у моноклональных антител значительно ниже, чем у поликлональных. Она минимизируется в результате подбора наиболее уникальной, неповторимой антигенной детерминанты, моноклональные антитела к которой затем производятся.

Таким образом, моноклональные антитела имеют следующие основные преимущества перед поликлональными:

- полная стандартизация препарата антител;

- высокая специфичность;

- свободный выбор антигенных детерминант, к которым образуются антитела.

Вместе с тем в некоторых схемах иммуноферментного анализа применение поликлональных антител (в комбинации с моноклональными) позволяет достичь лучших результатов. Это обусловлено способностью поликлональных антител связывать не одну, а практически все имеющиеся на молекуле определяемого вещества антигенные детерминанты.

В диагностических тест-системах в качестве узнающих и ловушечных применяются антитела класса IgG. Причинами тому служат следующие обстоятельства:

- содержание IgG в сыворотке значительно больше, чем других

классов, что немаловажно при получении поликлональных антител;

- молекула IgG представлена мономером, который обладает

большей мобильностью, чем ди- или пентамер;

- F_c-фрагмент молекулы IgG может быть в свою очередь связан,

например, с белком А, что используется в некоторых схемах ИФА.

Дата добавления: 2014-01-15