Хроматографы жидкостные

		Хроматографы жидкостные отличаются от газовых состоянием подвижной фазы (элюента), в качестве которой используются жидкости (органические растворители, вода, водные растворы). Хроматограф жидкостныйпредназначен для разделения анализируемой смеси на компоненты, их детектирования, идентификации и количественного анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЖЭХ). Высокоэффективный хроматограф жидкостный сегодня непременный атрибут лабораторий экологического контроля, пищевой и химической промышленности, в нефтехимии, медицине, фармакологии и т.д. Для так называемых рутинных анализов хроматограф жидкостныйможет быть доукомплектован автосамплерами, насосами с функциями автоматической промывки колонок и т.д.
		Практические преимущества жидкостных хроматографов Как следует из самого названия, жидкостный хроматограф отличается от газового агрегатным состоянием подвижной фазы (растворителя) – здесь это жидкость. Причем она выполняет две задачи: переносит удаленные с поверхности адсорбента молекулы адсорбируемого вещества по разделительной колонке, и регулирует определенное соотношение между концентрациями исходного вещества и продуктами разделения (константу равновесия). Вообще, жидкостные хроматографы позволяют разделять значительно более широкий ряд веществ, чем газовые – тут дело и в нелетучести большинства химических соединений, и неустойчивости их к высоким температурам. Это еще одно преимущество жидкостных хроматографов: разделение происходит при комнатной температуре. Методов жидкостной хроматографии несколько. В одних разделение вещества происходит за счет различной адсорбируемости (жидкостно-адсорбционный метод), в других – за счет различной растворимости в подвижной фазе и жидкости (неподвижной фазе), обволакивающей твердый адсорбент (жидкостно-жидкостный метод). В третьих – за счет различной способности веществ обмениваться ионами с ионообменниками. Ну и несколько слов об эксклюзивной и аффинной жидкостных хроматографиях. В первой разделение веществ происходит по молекулярной массе (т.е. по различной способности проникать в поры сорбента), во второй – по принципу молекулярного распознавания. Типа свой-чужой. Это происходит за счет способности биологически активных веществ вступать в специфическое биохимическое взаимодействие с лигандом: ионами или молекулами акцептора, связанного с инертным носителем.
		Принцип работы жидкостного хроматографа: от классики до ВЭЖХ Принципиальная схема жидкостного хроматографа состоит из трех основных частей: блока источника потока подвижной фазы (резервуар, насос, фильтр), блока разделения (устройство ввода проб, колонки) и блок детектирования. Блок разделения может также содержать форматор градиента подвижной фазы, дегазатор и устройство для сглаживания пульсаций давления – ведь высокоэффективная жидкостная хроматография оперирует давлениями порядка 120 бар. Вкратце, принцип работы жидкостного хроматографа следующий. Подвижная фаза из резервуара через дегазатор по-любому попадает в хроматографическую колонку. Но есть нюанс: в зависимости от способа вымывания вещества (градиентного или изократического), различают несколько типов жидкостных хроматографов. В изократическом, компоненты подвижной фазы сначала подаются насосом через фильтр в систему ввода образца. Туда же вводится проба. Смесь сначала попадает в колонку предварительного насыщения, затем в разделительную. Потом в детектор. Градиентные же жидкостные хроматографы делятся еще на два вида: в одном градиент подвижной фазы формируется на линии низкого давления, в другом – на линии высокого давления. В первом, подвижная фаза поступает из резервуара через фильтры сначала в программатор градиента, а затем в насосы высокого давления. Градиент в этом случае формируется бинарный, трех или четырехмерный. Во втором – подвижная фаза через фильтр, сразу подается насосами через смеситель в систему ввода образца. Градиент (бинарный или трехмерный) формируется за счет управляемой работы насосов высокого давления. Ну а далее – все как и в изократическом хроматографе.
		О чем свидетельствует цена на жидкостный хроматограф Классические жидкостные хроматографы достаточно молоды – им всего-то лет 50. Тем не менее, современные высокоэффективные жидкостные хроматографы, от «старичков» отличает ряд достоинств. Поэтому и цена на жидкостный хроматограф нового поколения выше. Но и ветераны по-прежнему в ходу. ВЭЖХ позволяют исследовать даже несколько нанограммов вещества (в классических минимальным количеством были мкг). Разделение происходит в десятки раз быстрее. Во столько же возросла и скорость потока. Если раньше детектирование производилось аналитически, теперь эту работу выполняют высокочувствительные рефрактометрические, спектрофотометрические, кондуктометрические, электрохимические, флуориметрические, лазерные детекторы испарительного светорассеяния, ELSD и прочие аппаратные и программные средства, сигнализирующие об уровне концентрации вещества. Желание не поскупиться и купить жидкостные хроматографы вполне оправдано. Вот неполный список областей их применения: санитарный, экологический контроль, тестирование качества пищевых продуктов и сырья, ветеринария и фармакология, биохимия, клинический анализ и криминалистика. Блочно-модульная конструкция данных приборов, путем замены или наращивания числа модулей позволяет реализовывать всю палитру методов жидкостной хроматографии. Но есть и компактные, менее дорогие ВЭЖХ: их назначение – стандартный рутинный лабораторный анализ.

Наиболее существенным в развитии хроматографического приборостроения, за последнее время, является стремительное расширение разработок и выпуска жидкостных хроматографов при дальнейшем совершенствовании и устойчивом увеличении выпуска газовых хроматографов.

Все более популярным становится метод высокоэффективной ЖХ (ВЭЖХ), причем развитие метода происходит значительно быстрее, чем предшествующее развитие метода ГХ. Это связано со следующими причинами. Анализ на основе метода ВЭЖХ может быть экспрессионным (10—12-компонентиая смесь анализируется в среднем за 10... 15 мин или быстрее); чувствительность метода достигает 10^-9... 10^-10 г/мл (в пределе до 10^-12 г/мл); объем вводимых проб составляет не более 10... 100 мкл; метод экономичен.