Подсчет эритроцитов и тромбоцитов, расчет величины гематокрита, эрицитарных и тромбоцитарных индексов

Кондуктометрические гематологические анализаторы

Технология автоматического подсчета клеток была разработана в 1947 г. Wallace H. и Joseph R. Coulter.Апертуро-импендансный метод (метод Культера, или кондуктометрический метод) основан на подсчете числа и определении характера импульсов, возникающих при прохождении клеток через отверстие малого диаметра (апертуру), по обе стороны которого расположены два изолированных друг от друга электрода. Если через узкий канал, заполненный электропроводящим раствором, проходит клетка крови, то в этот момент сопротивление электрическому току в канале возрастает.

Несмотря на то, что изменение сопротивления невелико, современные электронные приборы легко его улавливают. Каждое событие — прохождение клетки через канал — сопровождается появлением электрического импульса. Чтобы определить концентрацию клеток, достаточно пропустить определенный объем пробы через канал и подсчитать число электрических импульсов, которые при этом генерируются. Если в один и тот же момент в канале находятся две клетки, они регистрируются в виде одного импульса, что приведет к ошибке подсчета клеток. Во избежание этого проба крови разводится до такой концентрации, при которой в канале датчик авсегда будет не больше одной клетки.

Апертуро-импедансный метод позволяет определять большинство эритроцитарных и тромбоцитарных показателей, связанных с объемом клеток (HCT, MCV, MCH, MCHC, MPV), а также является основой для дифференцировки лейкоцитов по трем параметрам.

Разделение эритроцитови тромбоцитов в современных анализаторах проводится по измерению амплитуды электрического сигнала: тромбоциты (небольшие по размеру клетки) при прохождении измерительного канала генерируют электрические импульсы низкой амплитуды. После добавдения лизирующего реагента происходит лизис эритроцитов и в суспензии остаются лейкоциты. Проба подсчитывается повторно, и из первого счета импульсов высокой амплитуды (эритроциты +лейкоциты) вычитают импульсы высокой амплитуды второго счета (лейкоциты). Разница импульсов высокой амплитуды до и после лизиса соответствует количеству эритроцитов — RBC (red blood cells).

Устройство, которое разделяет импульсы по величине амплитуды, называется дискриминатор. В совремееных анализаторах применяются многоканальные дискриминаторы, позволяющие получить детальную информацию о размерах клеток в виде гистограмм, поскольку каждый канал соответствует определенному объему клеток.

При суммировании амплитуд импульсов в результате подсчета количества эритроцитов получается величина, отражающая общий объем, занимаемый эритроцитами, т.е. гематокрит HCT (hematocrit). Разделив гематокритную величину на концентрацию эритроцитов (RBC), мы имеем полезную характеристику эритроцитов — средний объем MCV (mean corpuscular volume).

Аналогичные показатели можно получить и для тромбоцитов: концентрация тромбоцитов — PLT (platelet), тромбокрит — PCT (platelet crit), средний объем тромбоцитов — MPV (mean platelet volume).

Поскольку в норме концентрация эритроцитов в крови на 3 порядка превышает концентрацию лейкоцитов, то вклад лейкоцитов в общее количество подсчитываемых клеток пренебрежимо мал по сравнению с эритроцитами, поэтому в некоторых анализаторах за количество эритроцитов принимают общее подсчитанное количество клеток. Такое допущение справедливо, за исключением случаев с гиперлейкоцитозом.

Дата добавления: 2014-11-16