План заняття. 1. Провести якісну реакцію на аскорбінову кислоту

1. Провести якісну реакцію на аскорбінову кислоту.

2. Провести дослідження окислення вітаміну С.

3. Виявити наявність вітаміну Р.

4. Провести якісну реакцію на вітамін В₁.

5. Вивчити якісну реакцію на вітамін В₆.

6. Визначити вітамін РР з постановкою проби на мідь.

1. Якісна реакція на аскорбінову кислоту

Аскорбінова кислота – вітамін С – широко розповсюджена в рослинних продуктах. Особливо багаті на вміст цього вітаміну свіжі овочі і ягоди, цитрусові, чорна смородина, гілки хвої, болгарський перець та ін.

Відсутність вітаміну С призводить до тяжкого захворювання – цинги або скорбуту.

Виявлення аскорбінової кислоти відбувається за допомогою розчину 2,6 діхлорфеноліндофенолята натрію синього кольору (краска Тільманса). Ця сполука є слабким окислювачем, який швидко реагує з сильними відновлювачами, до яких відносять вітамін С. В кислому середовищі краска стає червоною, а при відновленні – втрачає забарвлення.

Об’єкт дослідження: 1. Сік картоплі;

2. Сік моркви або капусти.

Обладнання і посуд: 1. Штатив із пробірками;

2. Крапельниці;

3. Піпетки;

4. Колби мірні, вогнетривкі;

5. Нагрівальний прилад.

Реактиви: 1. Н₂О₂, 3 %-й розчин;

2. НС1, 10 %-й розчин;

3. Діхлофеноліндофенолят натрію (краска Тіль-манса), 0,001 н розчин.

Техніка виконання роботи

Виявляють вітамін С в соках, які вироблено з картоплі, моркви або капусти. Для одержання соку матеріал, який досліджують, пропускають через тертушку і одержану масу віджимають через полотно. Потім сік повторно фільтрують крізь марлю. В дві пробірки наливають по 2 мл розчину, який досліджують. До однієї з них додають кілька крапель 3 %-го розчину перекису водню, вміст пробірки нагрівають. За цих умов вітамін С руйнується.

Далі в обидві пробірки додають по 2 краплі 10 %-го розчину НС1 та по одній краплі натрієвої солі 2,6 діхлорфенліндофенолята. У кислому середовищі барвник набуває рожевого кольору, але в присутності аскорбінової кислоти розчин знебарвлюється внаслідок відновлення барвника. У тій пробірці, де вітамін С був зруйнований, рожеве забарвлення зберігається.

2. Дослідження окислення вітаміну С

Об’єкт дослідження: 1. Аскорбінова кислота;

2. Глюкоза, 1 %-й розчин.

Обладнання і посуд: 1. Штатив із пробірками;

2. Піпетки.

Реактиви: 1. НС1, 10 %-й розчин;

2. CuSO₄, 5 %-й розчин;

3. NaOH, 10 %-й розчин;

4. 2,6 – ДХФІФ, 0,001 н розчин (краска Тільманса).

Техніка виконання роботи

В першу пробірку вливають 5 крапель краски Тільманса та 5 крапель соляної кислоти, а в другу – 10 крапель NaOH та 5 крапель сірчанокислої міді. Потім додають по 5 крапель аскорбінової кислоти. В третю і четверту пробірки вливають такі ж самі реактиви, але замість аскорбінової кислоти додають глюкозу. Спостерігають зміну забарвлення.

3. Виявлення наявності вітаміну Р

Наявність речовин з Р-вітамінною дією визначають по реакції цих речовин з хлорним залізом. При цьому утворюється комплексна сполука, що має зелене забарвлення.

Об’єкт дослідження: 1. Чай чорний;

2. Чай зелений.

Обладнання і посуд: Штатив із пробірками.

Реактиви: 1. Етиловий спирт;

2. Трихлористе залізо, 10 %-й розчин.

Техніка виконання роботи

В першу пробірку насипають 1 г зеленого чаю, в другу – 1 г чорного чаю. В обидві додають по 10 мл етилового спирту, енергійно перемішують. Через 15 хвилин суміш фільтрують. Від фільтратів відбирають у дві пробірки по 10 краплин розчину, в кожну додають по 1 мл трихлористого заліза. Спостерігають появу зеленого забарвлення у пробірці з зеленим чаєм.

4. Якісна реакція на вітамін В₁

Вітамін В₁ виявляють по утворенню у лужному середовищі з діазореактивом (суміш сульфонілової кислоти з розчином нітрату натрію) складну комплексну сполуку червоного або оранжевого кольору.

Об’єкт дослідження: Тіамін (вітамін В₁).

Обладнання і посуд: 1. Штатив із пробірками;

2. Флюориметр.

Реактиви: 1. Сульфанілова кислота, 1%-й розчин;

2. Нітрат натрію, 5 %-й розчин;

3. Їдкий натр, 10 %-й розчин;

4. Na₂CO₃, 5 %-й розчин.

Техніка виконання роботи

Спочатку готовлять карбонатно-лужний розчин: змішують 1 мл 10 %-го розчину NaОН та 1 мл 5 %-го розчину Na₂CO₃.

У другій пробірці готовлять діазореактив: змішують 1 мл розчину 1 %-ої сульфанілової кислоти та 1 мл 5 %-го розчину нітрата натрію.

Потім до карбонатно-лужного розчину доливають 1 мл діазореактиву і по стінці пробірки обережно приливають 1 мл тіаміну. Відзначають появу кільця червоного або оранжеве забарвлення.

При окисленні тіаміну, при його зберіганні, може утворюватися тіохром, який дає синю флюорисценцію у ультрофіолетовому промені. Тобто, якщо помістити ампулу з тіаміном у флюориметр, то можна спостерігати флюорисценцію.

5. Якісна реакція на вітамін В₆

Наявність вітаміну В₆ можливо виявити по утворенню комплексної сполуки червоного кольору з трихлористим залізом.

Об’єкт дослідження: Піридоксин (вітамін В₆).

Обладнання і посуд: Штатив із пробірками.

Реактиви: Трихлористе залізо,10 %-й розчин.

Техніка виконання роботи

У пробірку наливають 1 мл піридоксину і 1..3 краплі трихлористого заліза. Перемішують і спостерігають появу червоного забарвлення.

6. Проба з міддю на вітамін РР

Об’єкт дослідження: Нікотинова кислота (вітамін РР).

Обладнання і посуд: 1. Штатив із пробірками;

2. Нагрівальний прилад;

3. Піпетки.

Реактиви: 1. Оцтова кислота, 10 %-й розчин;

2. Оцтовокисла мідь, насичений розчин.

Техніка виконання роботи

До 1 мл нікотинової кислоти приливають 1 мл 10 %-го розчину оцтової кислоти і нагрівають до початку кипіння. До нагрітого до кипіння розчину додають 1-1,5 мл розчину оцтовокислої міді і знов гріють до кипіння. У пробірці з’являється голубувата муть, а потім випадає у синій осад мідна сіль нікотинової кислоти.

ЛАБОРАТОРНА РОБОТА № 15

«виЗначення жиророзчинних вітамінів»

Мета заняття: Провести дослідження якісних реакцій жиророзчинних вітамінів

Дата добавления: 2014-12-08