Биотестирование растворенных токсических веществ

Лабораторная работа № 2

по росту отрезков колеоптилей пше­ницы»

Биотест с отрезками колеоптилей пшеницы также хорошо раз­работан и основан на растяжении определенной зоны колеоптиля под действием того или иного вещества по сравнению с контролем, который принимается за 100 %. Разработан тест для определения аук­синов и ингибиторов; среди последних и фенольные вещества, ко­торые в живом растении чаще всего подавляют рост, а в больших концентрациях (например, сточных водах целлюлозно-бумажных комбинатов) являются токсическими веществами, вызывающими загрязнение питьевых вод. Примером этого может служить загряз­нение вод Ладожского озера и реки Невы.

АУКСИНЫ [< гр. auxanō увеличиваю; расту] – группа вырабатываемых растениями фитогормонов, стимулирующих ростовые про­цессы; в больших дозах действуют угнетающе; синтетически изготовленные ауксины (напр., гетероауксин)применяются в растениеводстве.

Нормальный рост колеоптилей осуществляется на 2 %-ном ра­створе сахарозы в дистиллированной воде, в котором и растворяют то или иное токсическое вещество. Применение метода дает возмож­ность показать, что действие многих токсикантов двояко: в очень малых концентрациях они стимулируют рост, а в больших – ингибируют. Так, широко известный гербицид 2,4Д в концентрации ниже миллионных долей (10^–8–10^–9 %) проявляет стимулирующий эффект, а уже в концентрациях 10^–6 –10^–77 % ингибирующий.

Помимо колеоптилей пшеницы можно использовать и гипокотили хвойных древесных пород.

ГИПОКОТИЛЬ [ гипо... + гр. kotylē впади­на; чашка] – подсемядольное ко­лено – часть стебля в зародыше или проро­стке между корнем и первыми листьями (семя­долями).

рисунок 2.1 – Ветка сосны

рисунок 2.2 – Разнообразие хвойных

Оборудование, реактивы, материалы:

1) термостат;	2) кюветы;	3) пинцет;	4) вата;
5) фильтровальная бумага;	6) пленка;	7) бритвы;	8) предметные стекла;
9) пенициллиновые бутылочки с пробками;	10) чашки Петри;
11) пипетки на 1–5 мл;	12) карандаш по стеклу;
13) миллиметровка;
14) испытуемые веще­ства: вода, исходный раствор гербицида;
15) 2 %-ный раствор саха­розы;	16) семена пшеницы.

При индивидуальной работе можно использовать для нарезки отрезков колеоптилей специальный станочек, в котором выточены бороздки для укладывания ростков. Уложенные ростки зажимают с двух сторон резинками. Затем в поперечные бороздки, сделанные через 5 мм, вставляют бритву и нарезают очень быстро 10–12 штук отрезков колеоптилей. При нарезке можно использовать специаль­ный резачок. При отсутствии резачка используют миллиметровку, покрытую стеклышком, и бритву.

Дата добавления: 2014-11-29