Практическая работа. Предварительная работа

Предварительная работа

Ход работы

До проведения практического занятияподготавливают ростки пшеницы. Для этого хорошо всхожие семена замачивают на 18–20 ча­сов в воде, а на другой день раскладывают пинцетом в кюветы зароды­шем вверх и в одном направлении на слой мокрой ваты (2–3 см), на которую помещают два слоя фильтровальной бумаги. Вату увлажня­ют до полной влагоемкости, что легко регулировать, сливая осторож­но излишки воды через край кюветы. Кювету закрывают пленкой, подгибая ее края под дно кюветы, а затем ставят в термостат при тем­пературе 25–27 °С зародышами на север, что обеспечивает более ров­ное прорастание.

Проростки проращиваются до среднего размера 1,5–2,5 см (не более), т. к. большие проростки теряют чувствительность. Для установления нужного времени замачивания и проращивания предварительно проводят пробные работы, т. к. на эти процессы влияют многие переменные: сорт пшеницы, всхожесть, размеры семян и время года. Наш многолетний опыт показал, что в про­цессе прорастания семян существует определенная периодич­ность, обусловленная генетически и внешние факторы играют здесь второстепенную роль. Так, семена почти всех растений, не требующих стратификации, дружно и быстро прорастают в ве­сенний период, хуже – в осенний и очень плохо – в период глу­бокого покоя (с половины ноября до половины января).

СТРАТИФИКАЦИЯ [лат. stratum настил, слой + facere делать] – 1) распределение тем­пературы воздуха в атмосфере с высотой, от которого зависит возможность и степень разви­тия вертикальных перемещений; 2) распреде­ление по вертикали слоев воды различной плотности, обусловливающее теплообмен и дру­гие физические процессы в морях и озерах; 3) выдер­живание семян труднопрорастающих древес­ных, кустарниковых и некоторых лекарственных растений во влажном песке, торфе, мхе при температуре 1–5 °С или под снегом для ускоре­ния их прорастания; 4) разделение, расчлене­ние общества на страты; социальная стратификация – структура общества.

Из исходного раствора гербицидов или других испытуемых ве­ществ приготавливают серию растворов на 2 %-ной сахарозе мето­дом последовательного разбавления. Последний из растворов должен быть ниже ПДК (для гербицидов меньше 10^–6 %). Сделать вытяжку из почвы: 10 г растертой почвы заливают 25 мл дистилли­рованной воды, сильно взбалтывают 10–15 мин, отстаивают, филь­труют через воронку. Можно также взять для биотестирования воду реки, водохранилища.

Ростки пшеницы срезают у основания бритвой или пинце­том с заточенными кончиками, складывают в чашку Петри. Ис­пользуя миллиметровку и предметное стекло, разделяют колеоптили на фракции: 1,5–2 мм, 2–2,5 мм и работают на пре­обладающей фракции. Затем от колеоптиля бритвой отсекают кончик 0,5 мм, вырезают следующие 5 мм – зону растяжения, и помещают на 10–15 мин в чашку Петри с дистиллированной во­дой для удаления ауксинов и лучшей реакции на испытуемое ве­щество. Через указанное время вырезанные зоны колеоптилей помещают (по 10 шт.) в пенициллиновые бутылочки с испытуе­мым раствором, которые закрывают резиновыми пробками. Повторность опытов – трехкратная. Пенициллиновые бутылоч­ки осторожно поворачивают набок, отрезки колеоптилей расправ­ляют так, чтобы они все плавали в растворе. В таком состоянии их помещают в термостат при температуре +25 °С – +26 °С на 2–3 дня (в учебных целях – на неделю).

Через указанные сроки снимают результаты измерения длины отрезков колеоптилей. Рост их на чистой 2 %-ной сахарозе прини­мается за контроль (100 %), реакция же на испытуемые растворы подсчитывается относительно контроля.

Строится гистограмма ингибирования (а в отдельных случа­ях и стимулирования) роста отдельными токсическими веще­ствами или их смесями (вытяжка из почвы, вода) в разных разведениях.

Примечание: работы № 1 и № 2 (тест с семенами и с отрез­ками колеоптилей) можно совместить, т. е. в одно занятие прове­сти закладку опытов, а в другое (через неделю) – снятие результатов и подсчет.

Дата добавления: 2014-11-29