Методические рекомендации по подготовке к занятию. Тема 14 Подсчет числа хромосом на временных препаратах

Тема 14 Подсчет числа хромосом на временных препаратах

Методические рекомендации по подготовке к занятию

Тема 13 Методы получения полиплоидов растений

Цель:

- ознакомить с методом получения полиплоидов растений

План:

1 Формы изменчивости Ч. Дарвина

2 Основные формы мутационной изменчивости

3 Возникновение полиплоидия

В настоящее время разработано много методов получения полиплоидных растений. Большая часть этих методов основана на колхицинировании. Колхицин – желтовато-белый порошок, относится к группе алкалоидов. Применение колхицина для получения полиплоидных форм основано на том, что слабые растворы этого вещества парализуют процесс образования тянущих нитей веретена. Поэтому в митозе хромосомы не расходятся к полюсам, клетка не делится, и образуется ядро с тетраплоидным набором хромосом, а если действовать колхицином на последующие деления, то число хромосом в клетках может увеличиться в 4, 8, 16 и более раз.

Порядок выполнения задания.

1. В чашке Петри на фильтровальной бумаге прорастить в течение 2-3 дней семена ржи районированного сорта.

2. Когда колеоптиле достигнет 2-4 мм длины, поместить проростки в 0,25% водный раствор колхицина. Для этой цели в чистую чашку Петри, имеющую диаметр на 1-2 см меньше, чем фильтровальная бумага, на которой проращиваются семена, наливают раствор колхицина.

Бумагу с проростками вынимают из чашки Петри и перевертывают таким образом, чтобы верхушки проростков оказались в растворе колхицина, а корни, прикрытые бумагой, сверху.

3. Через 30 минут проростки вынуть из раствора, промыть дистиллированной водой, высадить в ящик и поставить в теплицу.

4. Через 30 дней отобрать тетраплоидные растения. Они отличаются толстыми мясистыми листьями, неправильными искривленными побегами.

5. Подсчитать число хромосом и проверить плоидность отобранных растений на временных или постоянных препаратах, приготовленных по обычной цитологической методике.

Литература: 8, с. 98-109

Контрольные вопросы:

1 Какие формы изменчивости различал Ч. Дарвин?

2 Какие виды наследственной изменчивости выделяют в настоящее время?

3 Назовите основные формы мутационной изменчивости.

4 В результате чего может возникнуть полиплоидия?

5 Что такое модификационная изменчивость и каковы ее причины?

Цель:

- ознакомить с методом подсчета числа хромосом

План:

1 Подсчет числа хромосом на временных препаратах из зародышевых корешков

Для приготовления временных препаратов используют либо ацетокармин, либо ацетолакмоид, либо ацетоорсеин. Удобнее всего подсчитывать число хромосом на продольных срезах молодых корешков. Корешки должны быть длиной не более 1,5-2 см; у них используют меристему зоны деления клеток.

Порядок выполнения задания.

1. На предметное стекло нанести каплю ацетолакмоида.

2.Получить возможно более тонкий продольный срез кончика корешка изучаемого растения; первый срез с эпидермисом отбрасывают.

3. Перенести полученный срез на предметное стекло в каплю ацетолакмоида, накрыть покровным стеклом и осторожно несколько раз подогреть на спиртовке. По мере испарения ацетолакмоида его следует добавлять, не снимая покровного стекла.

4. Когда клетки среза будут достаточно мацерированы, нагревание прекратить. Не трогая покровное стекло, фильтровальной бумагой убрать лишний лакмоид.

5.Кончиком спички или деревянной палочки круговыми движениями осторожно раздавить препарат, стараясь распределить клетки равномерно в один слой. Покровное стекло не должно смещаться.

6. Приготовленный препарат поместить на предметный столик микроскопа и найти хорошие метафазные пластинки.

7. Пользуясь рисовальным аппаратом или окулярной сеткой при объективе 90х и окуляре 10х, тщательно зарисовать каждую хромосому на подобранной метафазной пластинке.

8. После того как контуры каждой хромосомы будут нанесены на бумагу, необходимо сверить рисунок с препаратом. Убедившись в точности рисунка, подсчитать на нем хромосомы. Для установления точного числа хромосом необходимо произвести их подсчет на 5-10 метафазных пластинках на нескольких временных препаратах.

Литература: 8, с.15-22

Контрольные вопросы:

1 Перечислите, какой формы могут быть хромосомы

2 На какой стадии митоза удобно изучать форму и размер хромосом?

3 Что такое идиограмма хромосом?

Дата добавления: 2014-11-29