Ступенчатый аллелизм

Ступенчатый аллелизм.

Метод ДНК-зондов

ДНК-зонд – «капля» целого гена или его части, помеченная радиоактивным или флуоресцентным методом. Наиболее часто получают методом обратной транскрипции. Была выделена из эритроцитов и-РНК, кодирующая α,β-цепи гемоглобина, и на базе этой РНК получили меченые зонды. Далее взяли культуру клеток человека и приготовили из нее хромосомные препараты. На одном из этапов клетки были обработаны, с целью вызвать неполную денатурацию, и в это же время было добавлено большое количество зондов. Так как зондов много, то они могут заменять участки ДНК, к которым они комплиментарны, далее цепи ренатуируют. Когда хромосомные препараты были приготовлены и окрашены, то на том участке, где к хромосоме присоединился зонд, будет наблюдаться флуоресценция. Если хромосома хорошо дифференцируема, то можно определить, какая это хромосома и на каком участке произошло присоединение.

В истории изучения структуры гена ведущее место занимал вопрос о природе аллелизма. Сравнивая эффекты аллелей в гетерозиготах, пришли к выводу о том, что ген представляет собой элементарную неделимую структуру, которая при мутациях изменяется целиком, т.е. сложилось впечатление, что ген является единицей функции мутации и рекомбинации (кроссинговер). Это предложение опровеглось при открытии множественного аллелизма.

1929-1930 г. Серебровский и Дубинин использовали серию множественных аллелей, которые контролировали наличие или отсутствие щетинок на различных поверхностях у дрозофил. Каждая линия характеризуется наличием нескольких щетинок. Скрещивая несколько линий в F1, получили гетерозиготных самок.

SC₁ – отсутствие щетинок на полях ABC

SC₂ – отсутствие щетинок на полях BCD

Оказалось, что компаунды (гетерозиготы по разным рецессивным или доминантным аллелям) не имеют щетинок на BC, а на полях AD щетинки имеются. Проводя скрещивание с 13 разными линиями они наблюдали одну и ту же закономерность восстановления признака у компаунда.

Авторы выдвинули гипотезу, что ген, представлен как основа и называется базиген (ABCDEFG), и состоит из частей – трансгенов. Обнаружилось, что ген дробим и мутирует не целиком, а по трансгенам. Следовательно, он не является единицей мутации.

Аллель – это разное состояние одного и того же гена. Аллельные мутации – это те, которые затрагивают один и тот же ген. Возник вопрос, как определить, аллельные или неаллельные случайные возникающие мутации.

Дата добавления: 2015-04-24