Микроскопическое исследование морфологии клеток

Технология окрашивания мазков аспирата из полости матки по Паппенгейму

Фиксация и окрашивание мазков по методу Паппенгейма выполняется одновременно с помощью панхромных гематологических красителей.

Фиксация мазков.Реагент (краситель-фиксатор): раствор эозин-метиленового синего по Май-Грюнвальду ⁴ или по Лейшману.

Оборудование: кювета для фиксации и окраски мазков со штативом-контейнером или аппарат Гематек. Допускается применение широкогорлой посуды с притертой пробкой.

Последовательность процедур:

- мазки помещают (два варианта):

1) в штатив-контейнер, опускают в кювету с фиксатором на 3-5 минут и вынимают из фиксирующего раствора;

2) или на лотки со специальными «рельсами» для окрашивания мазков и наливают раствор фиксатора-красителя на препараты на 3-5 минут;

Контейнер с мазками ополаскивают в кювете с фосфатным буфером (рН 7,0) в течение 1 минуты или на мазок, помещенный на «рельсы», не сливая красителя, добавляют фосфатный буфер на 1 мин.

Окрашивание мазков.Оборудование:

- кювета для окраски мазков со штативом-контейнером или лотки со специальными «рельсами» для окрашивания мазков;

- химические стаканы низкие (для разведения красителей).

Реагенты:

- рабочий раствор азур-эозина по Романовскому.

Последовательность процедур:

- контейнер с фиксированными мазками переносят в кювету с рабочим раствором красителя или фиксированные мазки располагают горизонтально на специальные рельсы и наливают по 3-4 мл красителя на каждый из препаратов; окрашивание мазков происходит в течение 8-15 минут;

- смывают краску водопроводной водой;

- окрашенные и промытые мазки высушивают на воздухе в течение 15 – 20 минут.

Для получения правильной информации необходимо последовательное микроскопическое изучение всего цитологического мазка. Обзор цитологической картины проводят под малым увеличением (10^х), детализацию выбранных объектов – под увеличением (20 – 40 ^х ); далее микроскопическое изучение мазка выполняется под иммерсионным объективом (100 ^х). Вначале проводят систематическое изучение полей зрения по краю мазка. Затем мазок исследуют методом «систематического перекрестного двухразового шага», который позволяет практически без пропуска изучить каждый миллиметр площади препарата.

3.
Оценка результатов изучения морфологии (цитологической картины) аспирата из полости матки.

Цель цитологического исследования мазков аспирата из полости матки правильно оценить цитологическую картину и установить отсутствие или наличие патологических изменений.

Оценка цитологической картины мазков аспирата должна включать описание соответствующих параметров, характеристику клеток, межклеточного вещества и т.д. Заключение должно соответствовать принятой классификации болезней

1.
Оцениваемые параметры цитологической картины при микроскопическом изучении мазков⁵

Оценка цитологической картины мазков аспирата должна включать описание следующих параметров (характеристик):

• 
  фон препарата, наличие и характер межуточного вещества;
• 
  количество и расположение клеток, образование комплексов или структур, характер клеточных границ;

Характеристика клеток:

• 
  размеры и форма клеток;
• 
  ядро: форма и размеры, расположение и окрашиваемость;
• 
  ядерно/цитоплазматическое соотношение;
• 
  характер строения хроматина;

Характеристика ядрышек:

• 
  наличие, количество, форма, размер, четкость границ;

Характеристика пролиферативной активности (в световом микроскопе):

• 
  наличие и число митозов (в том числе атипичных);
• 
  наличие многоядерных клеток;
• 
  наличие молодых клеточных форм;
• 
  Характеристика цитоплазмы:
• 
  объем, равномерность окрашивания, четкость границ;
• 
  секреция, включения, вакуолизация;
• 
  признаки дистрофии.

4.2. Цитологическая картина исследования мазков аспирата из полости матки в норме и при патологии

4.2.1. В цитологических мазках, полученных из эндометрия без патологических изменений, присутствуют различные виды эпителиальных клеток, элементы стромы и капилляры; клетки железистого эпителия (цилиндрические, призматические и кубической формы); веретенообразные и звездчатые клетки стромы, гистиоциты, лаброциты (тучные клетки), лимфоциты, обрывки капилляров. Возможно, обнаружение клеток шеечного канала: поверхностные (цилиндрические) и резервные клетки. Результат исследования мазков аспирата из полости матки оформляется в виде цитологического заключения. Цитологическое заключение может носить описательный, предположительный и утвердительный характер.

4.2.2. Основные формы цитологического заключения

Цитологическая картина оценивается как:

• 
  эндометрий без патологических изменений (указать к какому типу он относится: пролиферативному, секреторному, десквамозному, атрофическому);
• 
  воспалительный процесс эндометрия;
• 
  гиперплазия эндометрия (без атипии клеток);
• 
  гиперплазия эндометрия с атипией клеток;
• 
  железистая гиперплазия эндометрия с атипией клеток;
• 
  подозрение на аденокарциному эндометрия;
• 
  аденокарцинома (с указанием степени дифференцировки: высоко-, умеренно- и низкодифференцированная);
• 
  аденокарцинома с плоскоклеточной дифференцировкой (аденоакантома, железистоплоскоклеточная карцинома);
• 
  муцинозная карцинома;
• 
  светлоклеточная карцинома;
• 
  плоскоклеточная карцинома;
• 
  недифференцированная карцинома;
• 
  карциносаркома (злокачественная смешанная мезодермальная опухоль);
• 
  хориокарцинома.

3.
Регистрация цитологических заключений и архивирование

препаратов

Цитологическое заключение регистрируется на электронных или бумажных носителях, которые хранятся в лаборатории течение 3 лет; бланки с результатами цитологического исследования вклеиваются в историю болезни пациентки и хранятся – 25 лет. При использовании информационно - вычислительных систем (компьютерной техники) цитологические заключения вводятся в «электронную» историю болезни.

Препараты без патологических изменений не сохраняются, подвергаются специальной обработке (дезинфицирующими растворами) по правилам биологической безопасности. Препараты с патологическими изменениями (с цитологической картиной специфического воспаления или онкологических заболеваний) архивируются и хранятся в течение 20 лет. Архив цитологических препаратов формируют в соответствии с решением заведующего лабораторией. Препараты из архива должны выдаваться по письменному запросу лечащего врача или другого ответственного сотрудника лечебно-профилактического учреждения.

6. Оценка правильности цитологического заключения

Дата добавления: 2015-05-10