Основные правила проведения лабораторных анализов

Подготовка рабочего места и реактивов.

Для каждой методики должно быть подготовлено рабочее место, на котором собраны нужные реактивы и посуда. Пипетки устанавливают в пробирках, которые стоят в штативах. На каждой пробирке (или гнезде штатива) делают надпись, для какого реактива или операции пипетка предназначается. На флаконы с реактивами наклеивают этикетки с названиями реактивов и датами приготовления. Когда реактивы готовы, приступают к анализу калибровочных проб, по данным которых строят калибровочный график. Если он получился линейным и результаты воспроизводимы, можно переходить к исследованию биологического материала. Лучше всего пронумеровать гнезда в штативе и работать так, чтобы анализ пробы с определенным номером всегда выполнялся в одном и том же гнезде. Для этого все образцы биологического материала, поступившие в лабораторию за день, нумеруют подряд и в дальнейшем всю работу выполняют под номерами. Подавляющее большинство анализов можно с равным успехом проводить как в пробирках, так и в пенициллиновых флакончиках, однако флакончики удобнее, так как могут стоять на столе без штатива и легко закрываются пробками.

Мытье посуды.

Наиболее широко распространена обработка стеклянной посуды хромовой смесью. Хромовая смесь – очень едкий реактив, поэтому также используется сода, мыло и стиральный порошок. Каждый способ мытья посуды имеет свои преимущества и недостатки. Хромовая смесь обеспечивает степень чистоты, достаточную практически для всех видов анализов, но способ трудоемок и требует соблюдения мер предосторожности. Стиральные порошки безопаснее и работать с ними проще, но они прочно адсорбируются на стекле и могут быть удалены только при многократном промывании посуды водой.

Приготовление реактивов и проверка их чистоты. Важно!

Приготовление реактива начинается с взвешивания. Надо готовить такое его количество, которое может быть израсходовано за 1-2 месяца, но в то же время навеска не должна быть менее 20-30 мг, так как иначе точное взвешивание осложняется. При приготовлении калибровочных растворов в прописях обычно указывают круглые числа, например 100 мг или 0,2 ммоля, которые должны быть растворены в 50 или 100 мл растворителя. Растворы обычно отмеривают с помощью мерной посуды – мерных колб и цилиндров, но иногда бывает удобно взвесить растворитель на весах, особенно если нужно отмерить большие и некруглые количества.

3% раствор – в 100 г раствора содержится 3 г данного вещества и 97 г других составных частей – «процентные растворы».

Вода: спирт: ацетон 1: 2: 3 – данная смесь получена путем смешивания 1 объема воды, 2 объемов спирта и 3 объемов ацетона – «объемные проценты».

Растворы с точными концентрациями, особенно калибровочные и буферные, надо готовить в мерных колбах; мерные цилиндры можно использовать только при отсутствии высоких требований к точности.

Отмеривание растворов, взвешивание центрифугирование.

Для отмеривания растворов применяют пипетки различных конструкций и дозаторы. Наиболее перспективны автоматические пипетки со сменными наконечниками для фиксированных или изменяемых объемов. Сухие вещества для приготовления реактивов взвешивают на аналитических, аптечных или технических весах. Лабораторные центрифуги могут иметь два типа роторов – угловые и с подвесными стаканчиками. В угловом роторе граница осадка идем косо, что затрудняет отсасывание жидкости. В роторе с подвесными стаканчиками осадок ложится точно на дно пробирки, и его граница строго перпендикулярна длинной оси, и если осадок неплотный, то вследствие толчков при остановке центрифуги может образоваться муть.

Дата добавления: 2015-07-13