Метод Н,Н-COSY має майже таку ж чутливість, що і звичайний спектр на ядрах 1Н. Тому для вимірювання спектрів Н,Н-COSY необхідно використовувати таку ж саму кількість зразка, що і для звичайного спектру. Якщо в наявності є 5-10 мг зразка, то для нього можна отримати цілком якісний спектр Н,Н-COSY. Єдине, на що слід звертати увагу, це на наявність динамічних уширень сигналів. Для уширених сигналів інтенсивність кроспіків зменшується, отже деякі з них можуть виявитись загубленими. Заважають отриманню якісного спектра також механічні домішки, тому треба слідкувати, щоб досліджувана речовина повністю розчинялась в обраному розчиннику і не випадала з розчину на протязі всього експерименту (до однієї години).
При вимірюванні спектру Н,Н-COSY намагаються звузити спектральний діапазон таким чином, щоб на краях спектру не було пустого місця, але щоб всі сигнали попали у спектр. Отриманий таким чином спектр є аналогічним до оглядового одновимірного протонного спектру. Нижче, на Рис. 31 показано приклад такого спектру, що був виміряний для похідної бензофурану 9.
Рис. 31. Оглядовий спектр COSY сполуки 9.
Як бачимо, у такому спектрі хоча і міститься вся необхідна інформація, але вилучити її досить важко, оскільки ряд кроспіків розташовані дуже близько від діагоналі і їх складно віднести до конкретних сигналів в одновимірному спектрі. Тому для аналізу часто використовують не оглядові спектри, а їх фрагменти. Так, з наведеного вище спектру видно, що всі цікаві сигнали знаходяться в діапазоні від 6 до 8 м.ч. Тому доцільно записати саме цей фрагмент спектру. Його зображено на Рис 32:
Отриманий у такий спосіб спектр більш зручний для аналізу ССВ. Зі спектру також видно, що інтенсивність кроспіку пропорційна величині КССВ, отже, можна робити висновки про наявність далеких ССВ (методику з’йомки Н,Н-COSY спектру можна настроїти так, що будуть проявлятися лише крос-піки між протонами з далекою ССВ). Слід також зауважити, що в спектрі Н,Н-COSY можуть спостерігатися піки домішок, навіть коли їх погано видно в одновимірному спектрі. Такий сигнал ми спостерігаємо поблизу 7 м.ч.
6.4. Аналіз спектру Н,Н-COSY
Аналіз спектру Н,Н-COSY полягає у визначенні координат кроспіків. Для проведення цієї процедури від кожного кроспіка проводять горизонтальну та вертикальну лінії до перетину з діагоналлю. Наприклад, для кроспіка А, що зображений на Рис. 32, горизонтальна лінія проходить через дублет протона Нa при 7,57 м.ч., а вертикальна – через дублет протона Нb при 6,40 м.ч. Отже, кроспік А свідчить про спін-спінову взаємодію між цими протонами. Кроспіки є симетричними відносно діагоналі, тобто одній КССВ відповідає два еквівалентних кроспіки в спектрі Н,Н-COSY. Для дослідження ССВ можна використовувати будь-який з пари кроспіків. Наслідком віцинальної взаємодії між протонами Н6 та Н7 є поява в спектрі кроспіка Б. Більш слабкий кроспік В відповідає взаємодії через 4 хімічних зв’язки між протонами Н4 та Н6.
6.5. Подання результатів
Результати аналізу спектрів COSY зручно подавати у графічному вигляді, користуючись структурною формулою сполуки. На ній біля відповідних протонів позначаються величини хімічних зсувів, а наявніcть кроспіку позначаються вигнутими стрілками між ними. Приклад такого подання даних для описаного спектру показано нижче:
studopedia.su - Студопедия (2013 - 2024) год. Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав!Последнее добавление
